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41.
采用α-干扰素抑制各种肿瘤细胞生长的MTT法。结果:不同品牌的10000,1000,100IU/ml的IFNα2a对人脑胶质瘤细胞(SHG-44)、人骨肉瘤细胞(HOS-8603)、人白血病细胞(HL-60)、红白血病细胞(R562)和淋巴瘤细胞的生长抑制率分别为20%、10%、5%左右。结论:进口和国产的不同品α2a对上述5种肿瘤细胞株均有较明显的生长抑制效应,且抑制率相近。 相似文献
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人抑瘤素M基因重组逆转录病毒载体的构建及鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
目的构建携带人Oncostatin M(OSM,抑瘤素M)基因的逆转录病毒载体。方法用DNA重组技术,以pcDNA3.1finyc-his(-)A-hOSM重组质粒为模板PCR扩增人OSM基因,酶切连接到带有GFP标记的逆转录病毒载体pEGZ/MCS.HA上,连接产物转化大肠杆菌DH5a,筛选阳性克隆,抽提质粒,用PCR法、限制性内切酶EeoRI和BamHI双酶切法及测序鉴定。然后以脂质体转染法,将重组的逆转录病毒载体与辅助质粒HIT456、HIT60共同转染入包装细胞系293T以包装病毒。结果构建了重纽人抑瘤素M基因逆转录病毒载体,PCR产物电泳可见约750bp处有特异性条带,EcoRI和BamH,双酶切,电泳出现两个条带,约750bp处亦有相应条带。核酸测序结果与GenBank中所报道的人抑瘤素M基因的CDS序列完全一致。转染293T细胞在倒置荧光显微镜下可见绿色荧光,且细胞有病变。提示构建携带人OSM基因的逆转录载体成功。结论携带人抑瘤素M基因的重组逆转录病毒载体pEGZ/MCS-HA-hOSM成功构建为此基因的临床应用和实验研究奠定了基础。 相似文献
44.
目的 研究不同水平浓缩铀内污染机体时,对脑内主要蛋白组分的变化。方法 通过低温高速离心,离子交换层析,以及透析过程,从SD大白鼠脑中经分离纯化,获得β-NGF,并经PC12细胞突起生长试验鉴定其活性。结果 发现浓缩铀内污染机体时,可导致β-NGF得率降低,并与内污染剂量成线性关系,同时可导致脑内蛋白质裂解,从而使SDS-PAGE电泳图谱中主要蛋白组分分子量范围扩大,条带增加,结论 浓缩铀内污染诱发机体脑组织的放射毒理效应是可导致脑内蛋白质的裂解,同时可使β-NGF得率降低。 相似文献
45.
目的观察重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)和重组人白介素-11(rhIL-11)联合治疗极重度骨髓型急性放射病(ARS)比格狗的治疗效果,为临床救治提供依据。方法用4.5Gy-(60)Coγ射线照射比格狗建立极重度骨髓型ARS模型,随机分成照射对照组、综合对症组和细胞因子组。照射对照组不给予任何治疗,综合对症组给予包括输血、抗感染等对症治疗,细胞因子组在综合对症治疗基础上给予rhG-CSF和rhIL-11治疗3周,然后观察各组的血象变化、输血量、抗生素使用时间和动物的存活率等。结果照射后3组动物血象中各类细胞都呈急剧下降,细胞因子组治疗后血象基本恢复正常。细胞因子组的平均输血量和输血时间均显著少于综合对症组(P〈0.01),抗生素使用时间也较短(P〈0.05)。照后45d观察期内,存活率照射对照组为0%,综合对症组为80%,细胞因子组为100%,3组存活率有显著差异(P〈0.01)。结论综合对症基础上联合rhG-CSF和rhIL-11治疗极重度骨髓型ARS比格狗,能够促进骨髓造血功能的恢复,刺激血细胞较快地回升,显著减少输血量,缩短抗生素使用时间,并能提高照射狗的存活率。 相似文献
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48.
背景:单份脐血的造血细胞数量有限,难以满足成人的需要,如何有效地扩增脐血造血干/祖细胞是目前研究的热点。目的:构建人白血病抑制因子基因修饰的人胚肺成纤维细胞,观察转基因细胞对脐血CD34+造血干/祖细胞体外扩增的影响。方法:建立转人白血病抑制因子基因的饲养层细胞,用RT-PCR法和ELISA法鉴定目的基因的表达;采用免疫磁珠法分离脐血CD34+造血干/祖细胞,流式细胞术检测纯度;将CD34+造血干/祖细胞与饲养层细胞共培养,流式细胞术检测各组增殖效果;扩增后的造血干/祖细胞用跨膜迁移实验检测自发迁移率和基质细胞衍生因子1诱导迁移试验以鉴定体外扩增的造血干/祖细胞的归巢能力。结果与结论:成功建立转基因饲养层细胞,RT-PCR法和ELISA法证实有目的基因表达,与人白血病抑制因子转基因饲养层细胞共培养7d后CD34+造血干/祖细胞可大量扩增,同时表面黏附分子的表达量仍较高。体外迁移实验显示与转基因饲养层细胞共培养的造血细胞的诱导迁移率明显高于对照组,可以较好地保持其归巢能力。因此转人白血病抑制因子基因的饲养层细胞可有效扩增脐血CD34+造血干/祖细胞,延缓其分化,并且体外扩增后仍保持较高的归巢能力。 相似文献
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血小板抗体及淋巴细胞亚群检测在特发性血小板减少性紫癜中的诊断意义 总被引:3,自引:0,他引:3
目的 比较抗血小板特异性抗体、PAIgG及淋巴细胞亚群在特发性血小板减少性紫癜(ITP)及非免疫性血小板减少症中的水平,以评价其在ITP中的诊断价值.方法 用改良单克隆抗体特异性俘获血小板抗原法(MAIPA)检测患者血浆中抗血小板膜糖蛋白(GPⅡb/Ⅲa、GPⅠb和P-选择素)的特异性抗体.利用流式细胞术(FCM)检测患者外周血中PAIgG及淋巴细胞亚群.结果 ITP组MAIPA的阳性率为63.3%,非免疫性血小板减少组为阴性;PAIgG分别为73.3%、45%.淋巴细胞亚群中,ITP组CD3、CD4、CD4/CD8显著高于正常对照组,CD8、CD19则显著低于正常对照组.结论 抗血小板特异性自身抗体抗体对提高ITP的诊断有一定的实用价值,淋巴细胞亚群的变化能较好地反映ITP 的病理机制. 相似文献
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