基因工程IFNα2a对肿瘤细胞生长的抑制作用

采用α－干扰素抑制各种肿瘤细胞生长的ＭＴＴ法。结果：不同品牌的１００００,１０００,１００ＩＵ／ｍｌ的ＩＦＮα２ａ对人脑胶质瘤细胞（ＳＨＧ－４４）、人骨肉瘤细胞（ＨＯＳ－８６０３）、人白血病细胞（ＨＬ－６０）、红白血病细胞（Ｒ５６２）和淋巴瘤细胞的生长抑制率分别为２０％、１０％、５％左右。结论：进口和国产的不同品α２ａ对上述５种肿瘤细胞株均有较明显的生长抑制效应,且抑制率相近。     

腺病毒介导的E1A对PC-3人前列腺癌细胞生长的抑制效应

1研究背景前列腺癌是男性生殖系统常见的恶性肿瘤,其发病率及病死率都很高,目前首选的治疗方法仍然是手术治疗,但效果尚不理想。当今,基因治疗作为肿瘤治疗的一种新模式,越来越受到人们的重视。     

内源性抑郁症生物学病因研究进展

目前，内源性抑郁症在医学上被理解为一种综合征，病人表现为抑郁心境、兴趣丧失、食欲下降、体质量减轻、早醒以及情感的昼夜变化。内源性抑郁症可能存在着某些生物学上的变化，受某些因素诱发，但病情呈自主性，病前病人有稳定的性格，需要积极地治疗，电休克、抗抑郁剂治疗有良好的效果。近几年来，国外对内源性抑郁症的病因研究越来越多。     

rhG-CSF和rhIL-11联合治疗极重度骨髓型急性放射病比格狗疗效观察

目的观察重组人粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）和重组人白介素-11（rhIL-11）联合治疗极重度骨髓型急性放射病（ARS）比格狗的治疗效果,为临床救治提供依据。方法用4.5Gy-（60）Coγ射线照射比格狗建立极重度骨髓型ARS模型,随机分成照射对照组、综合对症组和细胞因子组。照射对照组不给予任何治疗,综合对症组给予包括输血、抗感染等对症治疗,细胞因子组在综合对症治疗基础上给予rhG-CSF和rhIL-11治疗3周,然后观察各组的血象变化、输血量、抗生素使用时间和动物的存活率等。结果照射后3组动物血象中各类细胞都呈急剧下降,细胞因子组治疗后血象基本恢复正常。细胞因子组的平均输血量和输血时间均显著少于综合对症组（P〈0.01）,抗生素使用时间也较短（P〈0.05）。照后45d观察期内,存活率照射对照组为0%,综合对症组为80%,细胞因子组为100%,3组存活率有显著差异（P〈0.01）。结论综合对症基础上联合rhG-CSF和rhIL-11治疗极重度骨髓型ARS比格狗,能够促进骨髓造血功能的恢复,刺激血细胞较快地回升,显著减少输血量,缩短抗生素使用时间,并能提高照射狗的存活率。     

重击法致大鼠眼挫伤后视网膜勿动蛋白的表达

目的探查眼挫伤后视网膜勿动蛋白(Nogo)的表达情况。方法重击法致2月龄SD雄性大鼠眼挫伤,伤后1d、4d7、d、14d分别取材,冰冻切片,免疫组化检测Nogo,并与正常同龄大鼠视网膜Nogo相比较,分析Nogo表达的变化。另外,免疫透射电镜检查、分析Nogo的细胞内分布。结果Nogo主要在Müller细胞表达,分布于细胞膜上和细胞浆内。正常同龄大鼠视网膜Müller细胞有很少的Nogo表达;而挫伤眼,在伤后1d4、d、7d,有不同程度的Nogo表达增加,伤后14d,Nogo的表达回到伤前水平。结论眼挫伤后视网膜Müller细胞Nogo的表达增加,说明眼挫伤后视网膜的修复过程中有神经生长抑制因子的参与,设法适时恰当抑制Nogo的活性可能有助于视网膜的修复。     

ING4的原核表达及多克隆抗体的制备

目的在原核系统中表达并纯化ING4蛋白，制备多克隆抗体。方法构建表达载体pET-21a（＋）-ING4，转化大肠杆菌BL21（DE3），用IPTG诱导表达。SDS-PAGE电泳检测。结果构建的表达载体pET-21a（＋）-hGDNF经酶切、PCR鉴定均出现750bp左右的条带，测序结果正确，用IPTG诱导转化菌有30KD大小的目的条带，表达的目的蛋白占菌体总蛋白10％以上，以包涵体形式存在，纯化后其纯度可达70％以上。用纯化的ING4蛋白免疫新西兰兔制备多克隆抗体。结论制备的多克隆抗体为下阶段的研究提供了重要的实验材料。     

羧甲基茯苓多糖对淋巴细胞产生细胞因子的促诱生作用

目的：观察羧甲基茯苓多糖（ＣＭＰ）对人外周血淋巴细胞（ＨＰＢＬ）产生肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）、白细胞介素－６（ＩＬ－６）的促诱生作用。方法：用ＨＰＢＬ经ＣＭＰ预处理后再以ＰＨＡ或和Ｃｏｎ Ａ刺激,培养后测定上清液中ＴＮＦ和ＩＬ－６活性。结果：ＣＭＰ促诱生组比仅用ＰＨＡ或／和Ｃｏｎ Ａ常规刺激组培养上清液中的ＴＮＦ效价高０．５－１．０倍,ＩＬ－６效价高０．５－０．８倍,ＣＭＰ＋ＰＨＡ＋Ｃｏｎ Ａ组对上     

ING4基因的克隆及其诱导HeLa细胞凋亡的实验研究

 目的：分离小鼠ING4基因并构建真核表达载体pcDNA3.0-ING4, 观察ING4基因转染人宫颈癌HeLa细胞后对细胞凋亡的影响。方法:应用RT-PCR技术从小鼠肝组织中扩增得到ING4cDNA。利用DNA重组技术构建真核表达载体pcDNA3.0-ING4并用双酶切、PCR、基因测序进行鉴定,然后利用阳离子脂质体lipofectamine将其转染HeLa细胞，用RT-PCR检测ING4基因的表达情况，应用荧光显微镜（Hoechst33258染色）、激光扫描共聚焦显微镜和流式细胞仪观察细胞凋亡情况。结果:RT-PCR产物为约 750 bp 的条带,构建的真核表达载体pcDNA3.0-ING4经双酶切、PCR鉴定均出现 750 bp 大小的条带，基因测序正确, Hoechst33258染色发现pcDNA3.0-ING4转染HeLa细胞的凋亡率（21.25%）明显高于对照组pcDNA3.0转染HeLa细胞的凋亡率（8.91%,P<0.01）。共聚焦显微镜也观察到了典型的细胞凋亡。细胞周期检测显示S期细胞所占百分数pcDNA3.0-ING4转染组高于pcDNA3.0转染组。结论:分离得到了小鼠ING4基因并成功构建真核表达载体pcDNA3.0-ING4, 初步研究发现该基因转染HeLa细胞后可促使细胞凋亡。     

哮喘患儿血清ECP、IL-4及IFN-γ水平的变化及意义

哮喘是一种慢性炎症反应,多种炎症细胞及细胞因子共同参与了这一过程。本文测定患儿血清中嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)、IL-4、IFN-γ的水平,以探讨其在儿童哮喘发病中的意义。     

rhLIF与IL-24基因协同诱导HL-60细胞的凋亡

目的：构建能稳定表达白血病抑制因子（LIF）的转基因细胞,并研究所表达的LIF与IL-24基因在诱导HL-60细胞凋亡方面的协同作用。方法：用真核表达质粒pcDNA3-LIF转染ECV304细胞,G418筛选阳性细胞,收集阳性细胞和培养上清,RT-PCR检测LIFmRNA的表达。同时在已转化重组腺病毒质粒的大肠杆菌中抽提质粒pAdEasy-1-pTrack-CMV-IL-24,用PacI酶切使重组腺病毒质粒线性化,脂质体转染QBI-293A细胞,收获Ad-IL-24腺病毒子。将重组病毒子（Ad-IL-24）感染HL-60细胞,同时加入含LIF的培养上清,并设对照组,RT-PCR检测IL-24 mRNA表达,光镜下观察HL-60细胞形态的变化,激光扫描共聚焦显微镜观察细胞凋亡改变,流式细胞仪检测细胞凋亡率,免疫细胞化学分析凋亡因子的改变。结果：成功构建能稳定表达LIF蛋白的转基因细胞;获得高滴度的重组腺病毒Ad-IL-24,用它感染HL-60细胞后,能检测到IL-24 mRNA的表达。各种检测方法表明LIF、IL-24基因都能抑制HL-60细胞生长、诱导凋亡,且两者具有协同作用。结论：LIF、IL-24基因都能抑制HL-60细胞生长,诱导凋亡,两者具有协同作用。