正交试验法优选凌寒片的醇提取工艺

目的通过正交试验法优选凌寒片的最佳醇提取工艺。方法以淫羊藿苷含量、干膏率为评价指标,选择乙醇浓度、乙醇用量、提取时间及提取次数为考察因素,利用L_9（3^4）正交试验确定凌寒片的醇提取工艺。结果凌寒片最佳醇提取工艺为加90％乙醇16倍量,回流提取1次,提取时间1h。结论优选出的醇提取工艺简单、可行,可作为该制剂合理开发的依据。     

莪术油配伍椒目仁油对小鼠移植性肿瘤的抑制作用

目的观察不同剂量莪术油配伍椒目仁油对小鼠移植性肿瘤S180的抑瘤作用,以及对人源性肝癌细胞株HepG2和大肠癌细胞株SW480的体外抑瘤作用。方法 72只二级昆明小鼠采用肿瘤移植法建立小鼠荷瘤动物模型;椒莪软胶囊灌胃给药,剂量分别为0.3、0.6、1.2 ml/kg;氟尿嘧啶22.5 mg/kg作为阳性对照药腹腔注射给药;连续给药15 d,观察药物对肿瘤生长的抑制作用。对人源性肝癌细胞株HepG2和大肠癌细胞株SW480进行传代培养后,制备不同剂量(椒莪软胶囊0.015 625、0.031 25、0.062 5、0.125、0.25、0.5、1、2、4 mg/ml)含药血清、氟尿嘧啶阳性药血清和肿瘤移植模型不用药对照血清,作用于人源性肝癌细胞株HepG2和大肠癌细胞株SW480,四甲基偶氮唑蓝比色法观察血清对两种细胞的抑制作用。椒莪软胶囊0.0、6.25、12.5、25.0μg/ml给药15 h后,经流式细胞仪测定对人源性肝癌细胞株HepG2细胞凋亡的影响。结果①椒莪软胶囊0.3、0.6、1.2 ml/kg肿瘤抑制率分别为19.73%、32.22%和46.68%。随着给药剂量的增加,坏死的肿瘤细胞所占比例也相应增加,生长活跃的肿瘤细胞逐渐减少。②抑制作用随剂量升高而作用增强,对人源性肝癌细胞株HepG2体外最低药物物浓度为0.062 5 mg/ml,对大肠癌细胞株SW480体外最低药物浓度为0.125 mg/ml。③椒莪软胶囊可明显促进人源性肝癌细胞株HepG2的细胞凋亡。结论椒莪软胶囊对小鼠移植性肿瘤有明显的抑制作用,对人源性肝癌细胞株HepG2和大肠癌细胞株SW480有明显的抑制作用。椒莪软胶囊在临床具有广阔的应用前景。     

锰致PC12细胞凋亡作用及与p-Erk关系

目的以鼠嗜铬神经瘤细胞(PC12)为模型,筛选锰对神经细胞增殖抑制作用的时间及剂量,观察锰作用下PC12细胞的细胞形态学、生化指标改变和磷酸化的胞外信号调节激酶(p-Erk)的表达。方法用200、400、600、800μmol/L MnCl2的培养液,分别作用对数生长期PC12细胞1、2、3、4 d后,四甲基偶氮塞唑蓝(MTT)筛选锰的细胞毒性剂量;透射电镜观察细胞形态学变化;琼脂糖凝胶电泳检测MnCl2对PC12细胞基因组DNA的影响。免疫印迹法(western blot)检测p-Erk。结果 MTT显示200～800μmol/L MnCl2作用1、2、3、4 d对PC12有显著的抑制作用,呈剂量和时间依赖趋势,600μmol/L MnCl2作用4 d对PC12的抑制率50%;600μmol/L MnCl2作用4 d电镜可见细胞凋亡,同样条件下细胞DNA碎片化;Western blot显示600μmol/L MnCl2作用1、2、3、4 d可见p-Erk2逐渐降低,其中作用2 d时较对照降低75%(n=3,P<0.05),200、400、600μmol/L MnCl2分别作用4 d时,p-Erk亦逐渐降低,当400μmol/L MnCl2作用4 d时较对照明降低78%(n=3,P<0.01);使用Erk通路MEK1/2特异性阻制剂PD98059实验结果表明:锰可能通过MEK1/2磷酸化下游的Erk,下调p-Erk。结论锰对PC12细胞的毒性作用可能是通过关闭胞外信号调节激酶ErK通路诱导细胞凋亡。     

拓扑特肯诱导人口腔上皮癌细胞凋亡的机制

目的 :研究拓扑特肯 (Topotecan ,TPT)诱导体外培养的人口腔上皮癌细胞 (KB)凋亡的作用及其可能机制 .方法 :体外培养KB细胞 ,加 30mg/L的TPT孵育 1 2 ,2 4和4 8h ,用MTT法检测TPT对KB细胞增殖的作用 ;DNA凝胶电泳和流式细胞仪技术检测TPT诱导KB细胞凋亡 ,West ern blot检测 p p38MAPK的表达 .结果 :TPT处理细胞 1 2 ,2 4和 4 8h后 ,KB细胞的抑制率分别为 (2 4± 9) % ,(34±7) %和 (4 5± 1 0 ) % ,各组间有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;流式细胞仪检测其凋亡率 ,1 2h时 (1 1 .5± 2 .8) % ,2 4h(31 .2± 4 .1 ) % ,各组间有显著性差异 (P <0 .0 1 ) ;DNA凝胶电泳可见TPT作用 1 2h组DNA碎片化 ,是典型的细胞凋亡生化指标 ;TPT处理细胞 1 2 ,2 4和 4 8h后 ,KB细胞的 p p38MAPK表达逐渐升高 (n =3,P <0 .0 5 ) .结论 :TPT可通过p p38MAPK开放表达信号通路诱导体外培养的TPT处理KB细胞凋亡 .     

色胺酮对人白血病细胞株K562细胞增殖抑制、凋亡诱导的影响

目的探讨色胺酮(Tryptanthrin,Try)对人白血病细胞株K562细胞增殖和凋亡的影响。方法K562细胞进行常规培养后,利用MTT方法进行Try(1.56～50)mg.L-1的细胞增殖影响;Hoechst33258荧光染色观察细胞的形态学改变;流式细胞技术检测细胞周期及凋亡情况等指标;综合评价Try对K562细胞株增殖和凋亡的影响。结果Try在3.12～50mg.L-1浓度范围内能明显抑制K562细胞的增殖,并具有时间和浓度依赖性;Hoechst33258荧光染色及流式细胞仪结果显示,不同浓度Try作用48h后,K562细胞可发生明显的凋亡;同时Try也可影响K562的细胞周期,将细胞阻滞于G0/G1期,随Try剂量增大G0/G1期细胞比例也逐渐增高,并出现明显的亚二倍体凋亡峰;同时,S期细胞比例随剂量增大而逐渐降低。结论色胺酮能明显抑制K562细胞增殖并具有诱导K562细胞发生凋亡的作用。     

超临界CO2流体萃取苦豆子中氧化苦参碱及其含量测定

采用超临界CO2，流体萃取法提取了苦豆子中的氧化苦参碱，以0．1ml／L氨水作碱化剂，在45℃，压力42MPa的条件下萃取2h。并用高效液相色谱法对萃取液中的氧化苦参碱进行定量分析，结果表明该方法可靠，精密度高，同时也为其他生物碱利用超临界CO2流体萃取法的萃取及定量建立了一种快速、简便、有效的方法。     

染料木素对维甲酸模型大鼠骨密度和微量元素的影响

目的　观察染料木素对维甲酸模型大鼠骨密度和微量元素的影响。方法　维甲酸 70 mg·kg- 1灌胃两周(正常对照组给予等量生理盐水 )后 ,各组大鼠给药如下 :正常对照组和模型组 ig等容量生理盐水 ;骨疏康组以5 .0 g· kg- 1 的骨疏康灌胃 ,染料木素大、中、小剂量组分别以 1 8.0 ,9.0和 4.5 mg· kg- 1 灌胃给药。并分别于0 ,1 ,2 ,4,8,1 2周从各组取 8只大鼠 ,测量大鼠体质量 ,股骨、胫骨长度和质量 ,测定股骨、胫骨和腰椎骨密度和胫骨中微量元素含量。结果　 1染料木素可增加维甲酸模型大鼠的体质量 ,并明显增加维甲酸大鼠的左股骨、左胫骨质量和长度 ( P <0 .0 5或 P <0 .0 1 ) ;2增强维甲酸模型大鼠的骨密度 ( P <0 .0 5或 P <0 .0 1 ) ;3可明显升高维甲酸模型大鼠微量元素含量 ( P<0 .0 5或 P <0 .0 1 )。结论　染料木素可使维甲酸模型大鼠的骨密度显著增加 ,并使骨质微量元素明显增加 ,对治疗骨质疏松症有很好的疗效     

染料木素对去卵巢大鼠骨代谢的影响

目的　探讨染料木素对去卵巢所致骨质疏松模型大鼠的影响。方法　SD大鼠 36 0只 ,随机分为 7组 :正常对照组、模型组、骨疏康组、尼尔雌醇组和染料木素大、中、小剂量组。各组大鼠切除双侧卵巢 (正常对照组行假手术 ) ,术后第 8天开始ig给药 ,并分别于不同时间点从各组取 10只大鼠对体质量、血生化、BMD和生物力学等指标进行测定。结果　染料木素可抑制去卵巢模型大鼠的体质量增加 ,使模型大鼠的血清Ca、Mg、P、CT水平明显升高 ,BGP、ALP水平降低 ,与正常对照组有显著差异 ;在 4 .5、9mg·kg-1时可显著增强模型大鼠的股骨、胫骨和腰椎L2 - 4的BMD ;对模型大鼠的股骨生物力学指标有明显改善(P <0 .0 5或P <0 .0 1)。结论　染料木素可明显改善去卵巢模型大鼠的血生化指标、骨密度和生物力学指标 ,对骨质疏松有较好的疗效。     

药物新剂型中辅料的应用

本文对近几年药物制剂的新剂型和新的给药系统中辅料的应用做了概括的综述,辅料作为制剂中不可或缺的部分在剂型和生产中起着关键作用,因此研究开发新的药用辅料对于促进剂型和药学事业的发展起着非常重要的作用。     

椒目中α-亚麻酸的提取与鉴定

目的:从花椒的种子即椒目中分离和纯化α-亚麻酸,鉴定化学结构并进行含量测定。方法:椒目粗粉采用皂化、酸化、梯度冷冻、尿素包合及硝酸银络合等步骤分离和纯化不饱和脂肪酸,并用HPLC测定α-亚麻酸含量,鉴定结构。结果:提取样品中α-亚麻酸的含量为91.6%~95.2%;结构为9,12,15-十八碳三烯酸(z,z,z-9,12,15-octadecatrienoic acid),全顺式,非共轭立体构型,分子式为C18H30O2。结论:本研究从废弃资源椒目中提取分离得到高纯度α-亚麻酸,因此,椒目是α-亚麻酸的良好资源。