人参皂苷Rg1对小鼠非酒精性脂肪肝的改善作用和机制研究

目的：探讨人参皂苷（ginsenoside,Rg1）对高脂饮食诱导小鼠非酒精性脂肪肝（non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD）的改善作用及可能的机制。方法：将42只健康成年C57/BL雌性小鼠随机分为对照组、模型组、Rg1低剂量组、Rg1高剂量组、二甲双胍组,对照组和模型组每组各9只小鼠,其余小组每组各8只小鼠。对照组给予普通饲料喂养,其余各组给予高脂饲料喂养,持续喂养16周。16周后,对照组和模型组给予0.9％生理盐水20 mL/（kg·d）灌胃,Rg1低剂量组给予人参皂苷Rg1 20 mg/（kg·d）灌胃,Rg1高剂量组给予人参皂苷Rg1 40 mg/（kg·d）灌胃,二甲双胍组给予二甲双胍150 mg/（kg·d）灌胃。持续治疗4周后采集各组小鼠血清和肝脏组织。观察各组肝组织病理学形态,测定血清转氨酶及血脂水平、肝组织匀浆中丙二醇（malondi－aldehyde,MDA）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、游离脂肪酸（free fatty acid,FFA）的含量及内质网应激（endoplas－mic reticulum stress,ERS）与炎症小体相关蛋白的表达情况。结果：Rg1低、高剂量组血清丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotrans－ferase,ALT）分别为（41.87±10.64）、（43.46±13.84） U/L,天冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase,AST）分别为（159.56±21.29）、（159.56±25.01）U/L,甘油三酯（triglyceride,TG）分别为（0.69±0.15）、（0.75±0.12）U/L,均明显低于模型组（P=0.001,P=0.010,P=0.000）,肝组织脂肪变性程度明显轻于模型组（P=0.000）。Rg1能降低FFA,MDA含量,提高SOD活力（均P=0.000）。Rg1能下调GRP78、CHOP、Caspase12、NLRP3、IL-1β蛋白的表达（P=0.000,P=0.003）。结论：Rg1可能通过提高抗氧化酶活性、抑制ERS相关分子及炎症小体活化来改善NAFLD。     

互联网传染病图像资料总结及思考

本研究通过Google、百度、Yahoo搜索引擎,同时参考相关专业数据库、论坛及文献,对当前互联网主要的传染病图像资料网站进行筛选。共甄别选取含3类及以上病原体种类的综合性网站9个,专门类网站中寄生虫方向9个、真菌方向4个、病毒方向2个、细菌方向2个。对各网站网址、主要特点、图像资料类别和数量进行归纳总结,为传染病教学内容的学习和理解,提供参考。     

胆管Cajal间质细胞与药物性肝内胆汁淤积的相关性研究

目的：通过研究大黄素对药物性肝内胆汁淤积症模型相关的生化指标及Cajal间质细胞（ICC）的影响,以期发现胆管ICC在肝内胆汁淤积中的作用及大黄素对ICC及肝内胆汁淤积的影响。方法15只雄性SD大鼠采用简单随机法均分为3组,即对照组、药物性肝内胆汁淤积模型组及大黄素干预组（n＝5）。建立大鼠淤胆型肝炎及大黄素干预的模型。使用反转录PCR（RT‐PCR）及免疫组织化学法分别检测模型组、大黄素组及对照组间肝功能生化指标、干细胞因子受体c‐kit基因及蛋白表达水平。结果模型组肝功能生化指标水平与对照组相比明显升高（P＜0．05）,大黄素组上述指标水平较对照组也有明显升高,但较模型组低,其间差异有统计学意义（P＜0．05）。对照组、模型组及大黄素组位于548bp处的条带均有表达。模型组c‐kitmR‐NA表达量明显低于干预组及对照组（P＜0．05）。大黄素组低于对照组,组间差异无统计学意义（P＞0．05）。免疫组织化学结果显示c‐kit模型组中表达量明显低于对照组及大黄素组（P＜0．05）。结论胆管ICC与药物性肝内胆汁淤积形成过程可能存在密切关系,肝内胆汁淤积的形成与胆管ICC减少有关,而大黄素对肝内胆汁淤积的治疗作用可能与其所致的胆管ICC数量相对增多或对胆管ICC的保护作用有关。     

戊型肝炎检测的研究进展

戊型肝炎(HE)是由戊型肝炎病毒(HEV)引起的急性自限性肝炎。主要经污染的水源传播,也可通过食物和日常生活接触传播,常引起大的爆发或流行,但也可散发。庄辉等曾对我国17个城市2548例急性散发性病毒性肝炎进行了血清学调查,其中戊型肝炎占3.4%~26.3%,平均为9.7%。1986年-1988年     

粪便钙卫蛋白测定在门诊常见肠道疾病诊断中的意义

目的：研究粪便钙卫蛋白在诊断常见肠道疾病-炎症性肠病（inflammatory bowel disease,IBD）、肠易激综合征（irritable bowel syndrome,IBS）、结肠癌中的意义。方法：选取门诊病人新鲜粪便共120例,其中健康对照组、IBS组、IBD组及结肠癌组各30例,用 ELISA法定量检测各组中粪便钙卫蛋白水平,确定钙卫蛋白诊断 IBD及结肠癌的敏感性和特异性,并与传统炎症相关性指标,如红细胞沉降率（erythrocyte sedimentation rate,ESR）、C反应蛋白（C reactive protein,CRP）、白细胞（white blood cell,WBC）计数相比较。结果：IBD组与结肠癌组、IBS组、对照组比较,粪便钙卫蛋白水平的差异均具有统计学意义（P<0.05）。而结肠癌组与IBS组、健康组比较,差异也均具有统计学意义（P<0.05）。CRP、ESR、WBC计数在结肠癌、IBS及正常对照组间差异均无统计学意义（P >0.05）,IBS组与 IBD组间 ESR、CRP水平存在显著性差异（P<0.05）。粪便钙卫蛋白诊断 IBD的敏感性为86.7%,特异性为83.3%。钙卫蛋白诊断结肠癌的敏感性为86.7%,特异性为76.7%。结论：粪便钙卫蛋白不仅能够初步筛查肠道器质性疾病和功能性疾病,而且在鉴别IBD和结肠癌方面具有一定的作用。     

TSPAN8参与小鼠非酒精性脂肪性肝病的脂质代谢

目的 探讨四跨膜蛋白8（TSPAN8）在非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）发生发展中的变化及其在脂质代谢中的作用。方法 将30只C57BL/6J 雄性小鼠随机分为普通饲料组（ND,n=15）和高脂饲料组（HFD,n=15）。Western blot检测1、3、6月末各组小鼠肝脏组织中TSPAN8的表达水平。HepG2细胞分成6组：完全培养基培养,无其他处理的命名为对照组（CON）;游离脂肪酸（FFA）处理以构建NAFLD细胞模型的命名为FFA组;TSPAN8过表达细胞命名为PCDNA-TSPAN8组,其对照为PCDNA3.1 组;FFA处理后的PCDNA-TSPAN8命名为PCDNA-TSPAN8+FFA组,其对照为PCDNA3.1+FFA组;qRT-PCR及Western blot检测CON组和FFA组细胞中TSPAN8表达水平;油红O染色法和全自动生化仪检测PCDNA-TSPAN8+FFA和PCDNA3.1+FFA组细胞内脂质蓄积情况。qRT-PCR检测与脂质代谢相关基因mRNA的表达情况。结果 Western blot显示,与同喂养时间ND组相比,HFD喂养3、6月的小鼠肝组织中TSPAN8的表达下降（P<0.05）。qRT-PCR与Western blot显示,与CON组比较,TSPAN8在FFA组中的表达下降（P<0.01）。与PCDNA3.1+FFA组相比,PCDNA-TSPAN8+FFA组中细胞内甘油三酯（TG）水平下降（P<0.001）。qRT-PCR示,与PCDNA3.1组比较,脂肪酸转运蛋白 5（FATP5）在PCDNA-TSPAN8组中表达降低（P<0.01）,与CON组相比,FATP5在FFA组表达上调（P<0.001）。结论 TSPAN8参与NAFLD的脂质代谢,细胞过表达TSPAN8可能通过降低FATP5的表达来抑制细胞内脂质的沉积,可能具有潜在的临床价值。     

LPS联合z-VAD-FMK介导IFN-γ预处理巨噬细胞发生程序性坏死

目的:探讨脂多糖(LPS)联合z-VAD-FMK介导M1亚型巨噬细胞程序性坏死的机制。方法:使用佛波酯(PMA)和干扰素γ(IFN-γ)诱导THP-1细胞系分化得到M0和M1亚型巨噬细胞。以LPS(100μg/L)分别处理M0和M1巨噬细胞,检测不同时点的乳酸脱氢酶释放和DNA断裂情况,并观察不同抑制剂的影响。采用Western blot法检测受体相互作用蛋白(RIP)1、RIP3、细胞外信号调节激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、P38和NOD样受体蛋白3(NLRP3)的蛋白水平。结果:LPS能够诱导M1亚型巨噬细胞发生死亡,联合z-VAD-FMK可特异性介导M1亚型巨噬细胞发生程序性坏死,而对M0亚型巨噬细胞无此作用。IFN-γ能够上调RIP3表达,并增强LPS介导的JNK磷酸化,RIP3和JNK抑制剂可部分阻断LPS联合z-VAD-FMK介导的M1亚型巨噬细胞程序性坏死。结论:IFN-γ上调RIP3和增强LPS介导的JNK磷酸化,使得LPS联合z-VAD-FMK能特异性诱导经过IFN-γ预处理的巨噬细胞发生程序性坏死。     

重组质粒pZeoSV2（＋）／CpG—HBcAg（ISS）对BALB／c小鼠的免疫作用

目的：探讨重组质粒pZeoSV2（＋）／CpG-HBcAg（ISS）对BALB／c小鼠免疫的作用。方法：构建真核表达质粒pZeoSV2（＋）／CpG-HBcAg（ISSb,c）,将其免疫BALB／c小鼠,ELISA法检测免疫后小鼠血清中IFN-γ、IL-2、IL-12、IL-4和IL-10的含量。结果：pZeoSV2（＋）／CpG-HBcAg（ISSb）组较pZeoSV2（＋）／CpG-HBcAg（ISSc）组免疫BALB／c小鼠后能使Th1型细胞因子IFN-γ、IL-2和IL-12的表达增强,抑制Th2型细胞因子IL-4和IL-10的产生。结论：含CpG-HBcAg（ISSb）的重组质粒能够明显诱导小鼠血清Th1型细胞因子的表达,抑制Th2型细胞因子的表达。     

人参皂苷Rg1对非酒精性脂肪肝HepG2细胞脂质摄取和氧化的影响

目的:探讨人参皂苷Rg_1改善游离脂肪酸(FFA)诱导的非酒精性脂肪肝(NAFLD)HepG2细胞脂质摄取和氧化的作用及机制。方法:将HepG2细胞分为空白组,模型组,人参皂苷Rg_1低、高剂量组(25,50μmol·L~(-1))。1 mmol·L~(-1)游离脂肪酸处理HepG2细胞24 h构建非酒精性脂肪肝细胞模型,25,50μmol·L~(-1)人参皂苷Rg_1处理24 h。细胞增殖及毒性检测-8(CCK-8)检测人参皂苷Rg_1对HepG2细胞活性的影响,微量法检测细胞内甘油三酯(TG)含量,油红O染色观察脂滴聚集情况,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测与脂质摄取和氧化相关基因与蛋白的表达情况。结果:与空白组比较,模型组细胞内TG含量及脂滴聚集吸光度显著增加(P0. 01);与模型组比较,人参皂苷Rg_1组细胞内TG含量及脂滴聚集吸光度显著降低(P0. 01)。Real-time PCR和Western blot结果均显示,与空白组比较,模型组过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ),脂肪酸结合蛋白1(FABP1),脂肪酸转运蛋白2/5(FATP2/5)和脂肪酸转运酶(CD36)mRNA和蛋白的表达明显升高(P0. 05),过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα),肉毒碱棕榈酰基转移酶1(CPT1)和酰基辅酶A氧化酶1(ACOX1)mRNA和蛋白的表达明显降低(P0. 05);与模型组比较,人参皂苷Rg_1组PPARγ,FABP1,FATP2,FATP5和CD36mRNA和蛋白的表达明显降低(P0. 05,P0. 01),PPARα,CPT1和ACOX1 mRNA和蛋白的表达明显升高(P0. 05,P0. 01)。结论:人参皂苷Rg_1可通过降低脂质摄取和增强脂质氧化减少NAFLD细胞模型脂质蓄积。     

365例乙型肝炎基因型分布与临床相关性研究

目的:探讨湖北地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型分布情况以及其与临床的相关性.方法:选取湖北地区HBV DNA阳性的慢性乙型肝炎患者365名,应用多对型特异性引物聚合酶链反应检测HBV的基因型.结果:在365份HBV DNA阳性血清中,除3份标本不能分型外,B型占78.45%,C型和BC混合型占17.68%和3.87%,未发现其他HBV基因型.B型患者血清ALT水平显著高于C型和BC混合型患者(P=0.01,P＜0.001),血清TBil、HBeAg阳性率在各基因型患者间差异无显著性意义.慢性肝炎患者中B基因型显著多于C基因型(P=0.012),肝硬化及肝癌患者中,B、C基因型分布的差异有显著性意义(P=0.007,P=0.001),重症肝炎患者的基因型分布无显著性意义.结论:湖北地区存在B、C、BC混合3种HBV基因型,且以B型为优势基因型.在慢性肝炎患者中B型比例较高,肝硬化及肝细胞癌患者中C型比例较高.