急性缺血性中风阴阳类证的血清转录组学特征分析

目的:筛选急性缺血性中风阴类证、阳类证患者血清的差异表达长链非编码核糖核酸(lncRNA),微小RNA(miRNA),信使RNA(mRNA),获取基因间调控关系,从转录组学层面探讨急性缺血性中风阴类证、阳类证形成的物质基础与生物学机制。方法:使用lncRNA,mRNA及miRNA芯片微阵列,分别检测急性缺血性中风阴类证、阳类证与非中风受试者(各10例)血清中lncRNA,miRNA与mRNA的表达情况,通过联合分析,筛选出阴类证、阳类证相关的差异表达谱。对获得的差异基因进行反义lncRNA与mRNA共表达分析、基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)功能通路分析,获取基因间调控关系,预测lncRNA的靶基因。对40例(阳类证10例,阴类证30例)样本中部分差异基因进行实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)验证。结果:227个lncRNA,54个mRNA,4个miRNA的表达与阳类证密切相关,394个lncRNA,206个mRNA的表达和阴类证密切相关。阳类证组中反义lncRNA RP11-647P12. 1和RP11-677M14. 2可能通过上调表达水平,分别调控神经元衍生神经营养因子(NDNF)和神经颗粒素(NRGN)的基因表达。通路富集显示,阴类证、阳类证之间转录组表达谱差异主要与血压调节、神经递质受体活性调节、内分泌激素调节、炎症反应、肾素-血管紧张素系统等通路相关。结论:急性缺血性中风阴类证、阳类证的lncRNA,miRNA,mRNA表达谱存在差异,阴、阳类证的表型差异可能由血压调节、肾上腺素能受体调节、肾素-血管紧张素系统以及γ-氨基丁酸(GABA)等多个通路的共同参与。转录组学特征为研究急性缺血性中风阴类证、阳类证的生物学基础提供了一定的科学依据。     

非霍奇金淋巴瘤患者血清和尿新喋呤的表达与疗效的关系

目的研究血清和尿新喋呤表达水平与非霍奇金淋巴瘤疗效的相关性。方法采用ELISA法，检测27例非霍奇金淋巴瘤患者治疗前后血清和尿中的新喋呤含量，并分析治疗前血清和尿中的新喋呤水平与患者疗效的关系。结果完全缓解和部分缓解患者的治疗前后的血清和尿新喋呤水平均低于稳定和进展组（P〈0．05）；治疗前后血清与尿新喋呤水平均高度相关（r=0．80、0．82，P〈0.05）。结论治疗前血清和尿新喋呤水平可作为非霍奇金淋巴瘤疗效的预测指标，尿液检测更加方便。     

丹参酮ⅡA 促进氧糖剥夺再灌注神经干细胞的增殖作用

目的观察丹参酮ⅡA 对原代培养的小鼠神经干细胞（NSCs）在氧糖剥夺再灌注（OGD/R）损伤条件下增殖 作用的影响。方法对原代小鼠NSCs 进行培养、鉴定;采用CCK-8 法测定细胞活力;通过检测神经球细胞 直径来观察NSCs 的增殖情况;对OGD/R 损伤条件进行筛选,建立OGD/R NSCs 模型。结果与溶剂对照组相 比,0.03、0.1、0.3、1、3、10、30 μmol·L-1 丹参酮ⅡA 干预48 h后,NSCs 的细胞活力显著提高（P＜0.01）; 0.3、1、3 μmol·L-1 丹参酮ⅡA 干预48 h 后,NSCs 神经球细胞透光性良好,神经球细胞直径明显增大（P＜ 0.05,P＜0.01）。NSCs 糖氧剥夺4 h 再灌注后的细胞活力介于40%~60%之间,故选择OGD/R（4 h/20 h）作为 NSCs 的OGD/R 损伤条件。与溶剂对照组比较,模型组NSCs 神经球细胞直径明显缩小、细胞活力明显下降 （P＜0.01）;与模型组比较,3 μmol·L-1 丹参酮ⅡA 干预48 h后,NSCs 神经球细胞直径明显增大、细胞活力明 显升高（P＜0.01）。结论丹参酮ⅡA 可促进正常条件及OGD/R 损伤条件下NSCs 的增殖及其细胞活力,丹参 酮ⅡA 对脑缺血损伤的保护作用机制值得进一步探讨。     

清脑通络方对老年性阿尔茨海默病大鼠海马突触结构的重建作用

目的:观察清脑通络方对老年性阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)模型大鼠海马突触结构的影响。方法:将大鼠随机分为青年组、老年组、模型组、石杉碱甲组、清脑通络方组。除青年组和老年组外,其他各组大鼠注射D-半乳糖和鹅膏蕈氨酸到基底前脑进行造模。造模成功后,清脑通络方组大鼠灌胃清脑通络方6 g/(kg·d),石杉碱甲组大鼠灌胃石杉碱甲0.3 mg/(kg·d),青年组、老年组、模型组大鼠以等体积生理盐水灌胃,连续4周。电镜观察大鼠海马CA1区和CA3区分子层突触特征,用体视学方法分析海马CA1区和CA3区突触数密度(N_v)、突触连接带面密度(S_v)和突触连接带平均面积(S)。结果:老年组大鼠CA1区和CA3区突触数密度、突触面密度与青年组比较无明显变化。与老年组比较,模型组大鼠CA1区和CA3区突触数密度、突触面密度显著降低(P0.01)。与模型组比较,清脑通络方组大鼠在CA1区和CA3区的突触数密度、突触面密度显著增加(P0.05,P0.01);石杉碱甲组大鼠在CA1区和CA3区的突触数密度增加,在CA3区突触面密度增加(P0.01)。与石杉碱甲组比较,清脑通络方组大鼠在CA1区的突触面密度增加(P0.01)。结论:清脑通络方对老年性AD大鼠海马突触密度有显著的改善作用。     

基于“填精补髓、清脑通络法”探讨血管性认知障碍中医证治规律

血管性认知障碍(VCI)是脑血管病变及其危险因素导致的血管性损伤,涉及至少1个认知域受损的临床综合征,涵盖从轻度认知障碍到痴呆、合并阿尔兹海默病等混合性病理所致的不同程度认知障碍。从中医“整体观念”出发,肝风内动是VCI的始动因素,肾虚髓减,痰瘀阻滞脑络是VCI的关键环节,根据“治病求本、杂合以治”的原则,治疗上应“间者并行,甚者独行”,须“标本兼顾,通补兼施”,临床运用填精补髓、清脑通络之法,以补肾填髓方药坚固脑之脉络,在痰瘀等病理产物尚未戕害清窍之时,阻断其阻滞脑脉或侵入脑内,基于以上理念探讨VCI中医证治规律,以飨同道。     

丹参酮ⅡA保护脑缺血再灌注损伤的蛋白组学机制研究

目的 建立大脑缺血再灌注（I/R）损伤小鼠模型,探讨丹参酮ⅡA(Tanshinone IIA)对其神经保护作用及可能的蛋白组学机制。方法 将70只C57BL/6N雄性小鼠随机分为假手术组、缺血再灌注损伤模型对照组、丹参酮ⅡA治疗组。模型组采用大脑中动脉栓塞法（tMCAO）制作脑I/R损伤模型,丹参酮ⅡA治疗组采用10 mg/kg丹参酮ⅡA腹腔注射长时程干预28 d,进行神经功能评分及脑梗塞体积测定,取损伤半侧脑组织进行蛋白组学检测。结果 丹参酮ⅡA治疗可以降低脑I/R损伤后的神经功能评分,减少脑梗塞面积;蛋白组学分析显示丹参酮ⅡA治疗组与模型组比较,有109个差异蛋白表达,模型组与假手术组比较,有168个差异蛋白表达,3组比较差异表达蛋白45个,丹参酮ⅡA治疗后蛋白表达谱差异主要与脂质代谢调节、铁代谢等蛋白水平相关。结论 丹参酮ⅡA能保护脑缺血再灌注损伤,其长时程保护作用机制可能与调控脂质代谢及铁代谢等多个通路的共同作用有关。蛋白组学特征为研究丹参酮ⅡA保护脑缺血再灌注损伤的分子基础提供了一定的科学依据。     

微血管保护在中风病神经保护治疗中的作用

对于急性脑卒中神经保护最有效的治疗是通过溶栓恢复缺血区的血流,但较短的治疗时间窗以及溶栓引起的出血和水肿限制了血管再通治疗的应用。缺血/再灌注诱导的微血管损伤通过破坏血脑屏障的完整性加剧微循环堵塞决定局灶性脑缺血血管再通后组织存活。在缺血/再灌注损伤诸多复杂的机制中,微血管壁损伤导致过度产生的氧和氮自由基明显促进了这些病理进程,微血管保护在中风病神经保护治疗中起重要作用。     

灯盏生脉胶囊对短暂性脑缺血发作小鼠神经保护机制研究

目的建立短暂性脑缺血发作(TIA)小鼠模型,探讨灯盏生脉胶囊(DZSM)对其神经保护作用的机制。方法采用尾静脉注射t-BHP及低氧方法成功制备了TIA样小鼠模型,分别给予不同浓度的DZSM灌胃治疗,ELISA测定血清可溶性P-选择素、TXB2、NO、ET、VEGF含量。结果灯盏生脉胶囊可明显降低模型组小鼠血清P选择素水平和血清TXB2含量;降低模型小鼠的血清ET含量,升高NO;抑制VEGF的过度表达。结论灯盏生脉胶囊通过减轻过氧化物和缺氧造成的血小板激活和释放,抑制局部微血栓形成,改善内皮细胞功能,在促进新生血管形成的同时防止毛细血管通透性的过度增高,发挥对TIA的神经保护作用。     

灯盏生脉胶囊对短暂性脑缺血发作小鼠神经保护作用及其机制研究

目的建立短暂性脑缺血发作（TIA）小鼠模型,探讨灯盏生脉胶囊（DZSM）对其神经保护作用及可能的机制。方法采用尾静脉注射t-BHP及低氧方法成功制备了TIA样发作小鼠模型,分别给予DZSM0．36s／kg、DZSM0．18s／kg、DZSM0．09g／kg灌胃治疗,进行神经功能评分及行为学检测,化学比色法检测脑组织SOD、MDA、GSH．px的含量。结果高、中、低剂量DZSM均可明显改善TIA小鼠神经功能缺损评分情况,DZSM0．36g／kg、DZSM0．18g／kg可明显改善TIA小鼠卒中指数。TIA小鼠血清MDA明显增高、SOD、GSH-Px含量明显下降,高、中、低剂量DZSM可使TIA小鼠脑MDA含量均明显下降。而GSH-Px、SOD含量明显上升。结论灯盏生脉胶囊可降低TIA小鼠的神经功能缺损评分和卒中指数,其作用机制可能通过提高TIA小鼠体内抗氧化系统的活性,降低脂质过氧化反应,从而抑制t-BHP过氧化反应导致的神经、血管内皮细胞等氧化应激损伤来实现。     

非霍奇金淋巴瘤患者血清和尿新喋呤的表达研究

为了研究血清和尿液中新喋呤、血清LDH和β2微球蛋白的表达水平与非霍奇金淋巴瘤疗效的相关性,采用酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测27例非霍奇金淋巴瘤患者治疗前后血清和尿液中的新喋呤含量,同时检测血清LDH水平和血清β2微球蛋白含量,分析比较治疗前血清和尿液中的新喋呤水平、血清LDH、β2微球蛋白与患者疗效的关系。研究结果显示:完全缓解和部分缓解的患者治疗前后的血清和尿液中新喋呤水平、血清LDH、β2微球蛋白值均明显低于稳定和进展组患者(P<0.05)。结论:治疗前血清和尿液中新喋呤值、血清LDH、β2微球蛋白值均可作为预测非霍奇金淋巴瘤疗效的重要指标,其中检测尿液中新喋呤值更为稳定和方便。