影响ELISA效果的常见问题及对策（医技）

EUSA是酶联免疫吸附测定的简称，是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。它以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合，由于抗原、抗体反应在一种固相载体——聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而保证试验结果的特异性与稳     

巨球蛋白血症伴血清CA125升高1例并文献复习

目的 报道1例巨球蛋白血症患者伴可疑假性血清CA125水平升高及实验室干扰处理。方法 1例巨球蛋白血症患者采用罗氏E601检测CAl25水平明显升高,结果可疑假阳性,拟采用稀释、更换检测平台、聚乙二醇PEG6000沉淀、嗜异性抗体封闭试剂、蛋白A/Gq琼脂糖沉淀等多种方法对标本处理,以排除可疑干扰。结果 经过以上方法处理后,CA125检测结果仍高,可以确认结果的准确性。随着患者病情好转,CA125水平逐渐降低。结论 巨球蛋白血症合并血清CA125水平升高可能为一种罕见临床表型。本病例提示对于异常检测结果,实验室应注意结合临床信息。在排除实验室干扰后,可辅助临床确诊罕见疾病表型。     

脑脊液生物标志物在阿尔茨海默病与非痴呆神经疾病间的浓度比较

目的观察脑脊液淀粉样蛋白和总tau（t-tau）蛋白、磷酸tau（p-tau）蛋白等生物标志物在阿尔茨海默病（alzheimer’s disease,AD）患者和非痴呆神经疾病患者中的鉴别诊断作用。方法采用ELISA方法检测12例AD患者和22例非痴呆神经疾病患者脑脊液标本中淀粉样蛋白Aβ（1-40）、Aβ（1-42）、t-tau蛋白、p-tau蛋白的浓度水平。结果与AD患者相比,非痴呆神经疾病患者Aβ（1-42）、t-tau水平增高,Aβ（1-40）、p-tau水平降低。在诊断效果上,Aβ（1-40）、总tau蛋白曲线下面积较大,特异性、灵敏度均大于80%。与另一实验室结果比较,p-tau在两个实验室的检测结果相关性较好（R2=0.950）。结论 Aβ（1-40）和t-tau在AD组与非痴呆神经疾病组之间差异具有统计学意义,可用于两组间的鉴别诊断。P-tau检测方法稳定,实验室间重复性良好,适于临床开展。     

碱性磷酸酶常规测量系统与参考方法的比对和偏移评价

目的通过复现碱性磷酸酶(ALP)国际参考方法评价4种常规测量方法的正确度。方法实验室内复现国际临床化学联合会(IFCC)公布的ALP参考方法;参考临床和实验室标准化协会(CLSI)EP9-A2文件用患者新鲜血清标本将Roche Modular系统、Beckman AU系统、Siemens Dimension系统、迈克试剂-Beckman AU系统与参考方法进行比对,评价常规方法与参考方法的相关性和偏移,根据回归方程调整常规方法的系数,重新比较与参考方法的相关性和偏移。结果 4种检测体系与参考方法的相关系数r均大于0.99。与参考方法相比,Roche系统存在负偏移,Beckman AU系统、Siemens Dimension系统存在正偏移,国产迈克试剂-Beckman AU仪器系统偏移最小。通过线性回归方程调整系数后,常规方法与参考方法的结果偏移降低。结论实验室通过建立参考方法并与常规方法进行方法学比较,调整仪器参数,可最大程度地保证检测结果的可比性和准确性,是实验室内质量控制的有效手段。     

基础：体液学检查进展（下）

浆膜腔积液检查的内容日益增多，相关的实验技术也不断地提高，从以前化学及显微镜方法鉴别炎症与非炎症发展到用免疫学、生化学等方法鉴别引起浆膜腔积液的良性与恶性肿瘤甚至用液相色谱等手段对肿瘤进行定位检查，实验方法和技术的进步使疾病的诊断更为明确，现代的浆膜腔积液的实验室检查已成为临床疾病诊断的重要手段。常用项目有：     

症状不典型心肌梗死1例

目的报道1例心肌损伤标志物大幅升高但临床症状、体征及其他辅助检查结果均不典型的急性心肌梗死案例。方法在3种检测平台上测定患者血液标本中的心肌损伤标志物以排除系统间差异和检测错误;排除溶血、纤维蛋白原、异嗜性抗体等干扰物的存在;密切结合超声心动图、核磁共振、冠脉造影等辅助检查手段寻找心肌损伤标志物大幅升高的原因。结果结合多种辅助检查结果该患者最终明确诊断为急性心肌梗死,左主干+三支病变。结论该患者没有出现急性心肌梗死典型症状,且心电图、超声心动表现与大面积心肌损伤不符,这主要是因为侧支循环的建立和冠脉血栓发生了自溶所致。     

基础：血气标本的采集

一般而言，血气是指血液中所含的O2和CO2气体。血气分析是评价病人呼吸、氧化及酸碱平衡状态的必要指标。它包括血液的pH、PO2、PCO2的测定值，还包括经计算求得如TCO2、AB、BE、SatO2、ContO2等参数。血气分析的有关数据对临床疾病的诊断和治疗发挥着重要的作用。在血气分析中，血液标本的采集和保存是否恰当，对测定结果有较大的影响，甚至比仪器分析的误差还大，因此必须引起足够的重视。临床工作在操作中应掌握以下注意事项：     

基础：体液学检查进展（上）

体液学试验是检验医学重要的组成部分。在常规临床检验中，积极地深入地开展体液学检查是非常必要的。根据医院的特点、规模和临床的需要，应有的放矢地、逐步地、选择性地开展体液学检查。     

气动物流传输系统致白血病患者假性高钾血症

  目的  探讨采用气动物流传输系统运输白细胞显著升高白血病患者的血液标本对血钾检测结果的影响。  方法  分析2013年7月至2015年7月北京协和医院检验科急诊生化实验室发现的4例白血病患者假性高钾血症相关临床指标,包括临床诊断、标本运输方式、白细胞数量、血浆钾离子浓度、血气钾离子浓度、部分血清钾离子浓度、化疗情况、心电图等临床信息。以同期10例感染性疾病合并类白血病反应患者和50例白细胞数量正常非血液系统疾病患者的以上临床指标作为对照组,比较气动运输和人工运输对白细胞不同功能状态、不同标本类型、不同容器标本血钾结果的影响。  结果  4例白细胞数量显著升高(206.8×10⁹/L~652.1×10⁹/L)白血病患者肝素锂抗凝静脉血标本通过气动传输导致血钾明显升高(5.9~14.8 mmol/L);气动传输对血气标本、血清管标本的血钾无明显影响;而气泵运输方式对于对照组的肝素锂抗凝静脉血标本和血气标本的血钾水平无显著影响(P＞0.05)。  结论  对于白细胞显著升高的白血病患者,采用气动物流传输系统运输肝素锂抗凝的静脉血标本可导致血钾假性升高。     

肾移植后外周血淋巴细胞HLA-A基因表达的检测与意义

目前肾移植后免疫状态的评估方法较多,但都缺乏较高特异度和灵敏度。近年国内外学者报道外周血淋巴细胞(PBL)表面人类白细胞抗原-Ⅰ(HLA-Ⅰ),主要是HLA-A、-B可较准确反映机体细胞免疫状态[1,2]。据此我们设计本实验,拟观察PBL HLA-A作为肾移植后免疫状态评估指标的可行性。材料与方法一、研究对象试验组为齐鲁医院血液净化中心的30例肾移植患者,其中男21例,女9例,平均41岁。治疗中使用FK506、硫唑嘌呤(Aza)、泼尼松(Pred)和FK506[或环孢素A(CsA)]、霉酚酸酯(MMF)和Pred预防排斥反应。30例患者于移植后1个月采集抗凝外周血,其…