血吸虫多抗原肽疫苗的合成及生物活性

目的：合成由寡聚赖氨酸和曼氏血吸虫28 Ku GST抗原肽段26-43(P₂₆)、141-153(P₁₄₁),日本血吸虫26 Ku GST抗原肽段187-202(J₁₈₇)组成的血吸虫多抗原肽疫苗,通过活性试验考察其抗原性及对实验动物的保护性免疫效果。方法：用固相逐步接肽法合成多抗原肽疫苗,产物经斑点酶联免疫吸附试验测定抗原性,并在无免疫佐剂存在下接种小鼠,以日本血吸虫尾蚴攻击感染,6周后剖杀小鼠进行体内成虫和肝内虫卵计数。结果：合成多抗原肽均能与感染日本血吸虫的病人或病兔血清结合,接种(P₁₄₁)₄-MAP、(J₁₈₇)₄-MAP的昆明小鼠和接种(P₂₆)₈-MAP的BALB/c小鼠,与对照组相比成虫检获数分别减少64.6%,41.3%和28.1%;每克肝脏虫卵数分别减少54.9%,45.6%和40.6%。结论：合成血吸虫多抗原肽疫苗能诱导小鼠产生抵抗日本血吸虫感染的保护性免疫力。     

含两种不同肽段的血吸虫多抗原肽疫苗的合成与生物活性

目的:合成由曼氏血吸虫28 Ku GST抗原肽段26-43(P26)、141-153(P₁₄₁)和日本血吸虫26 Ku GST 抗原肽段187-202(J₁₈₇)中的两种不同肽段组成的血吸虫多抗原肽疫苗,通过活性试验考察其抗原性、免疫原性及对实验动物的保护性免疫效果。方法:用Boc 化学和Fmoc 化学相结合的策略合成含两种不同抗原肽的多抗原肽疫苗,产物经斑点酶联免疫吸附试验测定抗原性,在无免疫佐剂存在下接种小鼠,ELISA 试验检测血清抗体,并用日本血吸虫尾蚴攻击感染,6 周后剖杀小鼠进行体内成虫和肝内虫卵计数。结果:合成多抗原肽能不同程度地与感染日本血吸虫的病人或病兔血清结合,并能诱导昆明小鼠产生对日本血吸虫天然抗原特异的抗体应答。接种(P26)2(J187)2 MAP、(P26)2(P141)2 MAP和(P26)4(P141)4 MAP的昆明小鼠,与对照组比较成虫检获数分别减少40-1 % ,61-1 % 和34-4% ; 每克肝脏虫卵数分别减少48-4% ,67-1 % 和47-4% 。结论:含两种不同抗原肽的合成血吸虫多抗原肽疫苗能够诱导昆明小鼠产生显著的抗日本血吸虫感染的保护性免疫力,选择更好的肽段结合在一起将有可能获得免疫保护作用更强的多抗原肽疫苗分子。     

血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗对小鼠肝脏虫卵肉芽肿形成过程中TNF-αmRNA表达的影响

目的 检测血吸虫重组ＢＣＧ－Ｓｊ２６ＧＳＴ疫苗对小鼠肝虫卵肉芽肿细胞内ＴＮＦ－ｍＲＮＡ表达的影响。方法 用１０～６ＣＦＵ疫苗皮下注射和腹腔注射分别免疫ＢＡＬＢ／Ｃ鼠,免疫后８Ｗ用日本血吸虫尾蚴进行攻击感染,感染后６Ｗ剖杀小鼠,分离肝脏,运用原位杂交技术检测ＴＮＦ－α ｍＲＮＡ表达。结果 疫苗免疫,尾蚴攻击后小鼠肝虫卵肉芽肿细胞内ＴＮＦ－α ｍＲＮＡ表达显著加强。结论 血吸虫重组ＢＣＧ－Ｓｊ２６ＧＳＴ疫苗能促进宿主Ｔｈ１反应,加强宿主抗血吸虫感染的保护性免疫力。     

日本血吸虫DNA疫苗的构建及其保护性免疫的研究

为探讨血吸虫ＤＮＡ疫苗保护性免疫效果,首先构建、鉴定和表达日本血吸虫ＤＮＡ疫苗（ｐＣＤ－Ｓｊ３２）。实验结果表明：ｐＣＤ－Ｓｊ３２免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠能诱导产生抗日本血吸虫感染免疫力,减虫率为３５．６％～４４．４％,减卵率为３９．４％～６９．０％;１００μｇＤＮＡ一次肌肉注射,免疫后８周攻击感染组的效果好;ＣＤ８＋Ｔ淋巴细胞、ＩＬ－２、ＴＮＦ和ＩＮＦ－γ可能在血吸虫病免疫功能调控中起重要作用;ｐＣＤ－Ｓｊ３２能诱导宿主产生高滴度特异性抗体,并在体外能介导巨噬细胞产生抗体依赖细胞介导的细胞毒性（ＡＤＣＣ）免疫效应。结果提示,ｐＣＤ－Ｓｊ３２有可能发展为新的预防血吸虫病的亚单位疫苗。     

日本血吸虫重组BCG-sj26GST疫苗免疫小鼠后IgG抗体反应的动态观察

目的：检测日本血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗免疫小鼠不同时间后的IgG抗体。方法：将10^6CFU疫苗采用皮下和静脉注射分别免疫BABL/C鼠,分别于免疫后0、4、8、10、14和16周各剖杀4只,收集血清,常规ELISA法检测IgG抗体,同时设PBS皮下注射对照组。结果：皮下注射组和静脉注射组IgG抗体水平都于免疫后4周显著增加,免疫后10周达最高水平,并持续在较高水平至免疫后16周。疫苗免疫后10周静脉注射组的抗体水平显著高于皮下注射组。结论：日本血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗静脉注射免疫效果优于皮下注射。     

日本血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗诱导小鼠脾细胞IL-6变化的研究

目的：研究日本血吸虫重组BCG－Si26GST疫苗对小鼠脾细胞IL－6的影响,方法：实验1采用该疫苗皮下免疫小鼠,免疫后8周用日本血吸虫尾缦进行攻击感染,感染后6周剖杀小鼠,同时设有PBS对照组,实验2用该疫苗皮下和静脉注射分免疫小鼠,于免疫后,0,4,8,10,14和16周各剖杀4只,分离脾脏,用Si26或PHA刺激脾细胞,用ELISA法检测5 清液中IL－6含量,结果：疫苗免疫尾缦攻击后,IL－6水平无明显变化;动态观察发现IL－6于疫苗免疫后8－10周达最高水平,结论：IL－6可能与日本血吸虫重组BCG－Si26GST疫苗诱导的保护性免疫力无关。     

日本血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗诱导小鼠脾细胞TNF-α和IL-1变化的研究

目的：研究日本血吸虫重组BCG－Sj26GST疫苗对小鼠脾细胞产生TNF－α和IL－1的影响。方法：实验1分别采用10 6CFU和10 8CFU疫苗皮下免疫BALB／C鼠，免疫后8W用日本血吸虫尾螺进行攻击感染，感染后66W剖杀小鼠，同时设有PBS对照组，实验2用10 6CFU疫苗皮下和注射分别免疫小鼠，于免疫后，0，4，8，10，14和16W各剖杀4只，分离脾脏，用Sj26或丝裂原刺激脾细胞，用ELISA法检测脾细胞上清液中TNFα水平，用成纤维细胞增殖法检测IL－1于免疫后4－8W达最高水平，静脉注射组TNF－α和IL－1分别于免疫后16w和4－8W达较高水平。结论：日本血吸虫重组BCG－Sj26GST疫苗促进小鼠脾细胞较早分泌TNF－α和IL－1，它们在血吸虫保护免疫中起重要作用。αααα     

中国血吸虫病的现状与展望

寄生于人体的血吸虫种类较多,主要有三种,即日本血吸虫(Schistosoma japonicum)、曼氏血吸虫(S.mansoni)和埃及血吸虫(S.haematobium),中国仅有日本血吸虫即通常所说的血吸虫。从湖北江陵西汉古尸体内检获的血吸虫卵事实,表明血吸     

Vertical Transmission of Schistosoma Jkaponicum in the Rabbit

The aim of the present study was to confirm observations on the vertical transmission of Schistosoma japonicum in the rabbit.S.japonicum-infected pregnant rabbits were used in this study.Perfusion of mother rabbits was done 9 weeks after infection in order to obtain worm burdens in relation to their initial cercarial dose.Anti-schistosoma specific IgM antibodies in serum samples collected from rabbit kittens were detected by ELISA.Our results showed that gestation period lasted the normal 29-31 days.All the exposed mother rabbits became infected with S.japonicum.Positive IgM antibody OD values were detected in 12 out of the 60 kittens examined (20.0%).In group C and A,40.0% and 17.9% of the kitten were congenitally infected,respectively.18.1% of the kittens born to mothers infected with a single dose of 200 cercariae perrabbit were positives;this is not significantly different from that obtained for the 600 dose group (22.2%).Three randomly selected IgM^ kittens harbored between one and two adult worms.The livers of these kittens displayed granulomatous lesions.It is concluded that congenital S.japonicum infection does occur in the rabbit and is affected by the mother stage of pregnancy and to a lesser extent by its infection load.