阿苯达唑治疗泡球蚴病患者血清中Th1/Th2型细胞因子的变化及临床意义

目的　为探讨泡球蚴病患者经阿苯达唑治疗后 ,机体免疫应答的状态和对病程转归影响。方法　 35例泡球蚴病患者经阿苯达唑治疗 1 2月前后 ,血清中sIL - 2R ,IFN -γ ,IL - 4IL - 5 ,IL - 6 ,TNFα,及特异性IgG ,IgE抗体进行检测。 结果　在治疗 1 2月后 ,Th1型细胞因子sIL - 2R ,IFN -γ无改变 (P >0 0 5) ,Th2型细胞因子IL - 4显著性下降 (P <0 0 1 ) ,IL - 5在患者中检出率明显降低 (P <0 0 1 ) ,TNFα和IgE水平较治疗前显著性下降 (P <0 0 1 )。 结论　泡球蚴病患者治疗后 ,Th2型细胞因子反应减弱 ,机体的保护性免疫应答有所恢复     

编码大陆株日本血吸虫天冬酰胺肽链酶cDNA的克隆及其在BALB/c小鼠体内的表达

血吸虫成虫３１／３２ｋＤａ蛋白除具有公认的免疫学诊断价值外,作为疫苗抗原的候选分子也有潜在价值［１］。我们对编码大陆株日本血吸虫３２ｋＤａ天冬酰胺肽链酶（Ｓｊ３２）进行了克隆、测序鉴定、构建真核表达载体,并在小鼠骨骼肌细胞得到表达,为该抗原的ＤＮＡ疫苗研究打下了基础。　　材料与方法Ｓｊ３２ｃＤＮＡ的克隆、鉴定日本血吸虫成虫ＲＮＡ的分离纯化,ｃＤＮＡ合成等参见文献［２］。根据文献［３］报道的核苷酸序列,设计并合成引物,Ｐ１：５ＣＴＣＧＧＡＴＣＣＡＡＧＡＧＡＡＡＴＡＡＴＧＴＴＴＴＡＴＴＣ３Ｐ…     

不同方式构建的日本血吸虫双价DNA疫苗保护力的比较

目的寻求高效抗血吸虫感染的双价核酸疫苗。方法以共表达和融合表达两种方式构建两种日本血吸虫双价核酸疫苗pVIVO2-mcs-Sj23/SjFABP、pVIVO2-mcs-Sj23·SjFABP,以鸡尾酒式混合获得混合双价疫苗(pVIVO2-mcs-Sj23/SjFABP与pVIVO2-mcs-Sj23·SjFABP)。大量制备质粒,50只BALB/c小鼠随机分为5组:混合疫苗组、双价共表达疫苗pVIVO2-mcs-Sj23/SjFABP组、双价融合表达疫苗pVIVO2-mcs-Sj23·SjFABP组、空质粒对照组及生理盐水对照组。免疫后4周攻击感染,感染后45天剖杀,计数各组小鼠成虫数、肝虫卵数和免疫保力超过50%实验组的虫卵肉芽肿面积。结果与对照组比较,实验组小鼠成虫数、虫卯数和虫卵肉芽肿面积有显著性差异(P<0.05);融合表达组和共表达组无显著性差异(P>0.05);混合DNA疫苗组免疫保护力优于单一双价组;与混合DNA疫苗组比较,pVIVO2-mcs-Sj23·SjFABP组的肝脏肉芽肿面积有显著性减小(P<0.05)。结论血吸虫混合双价DNA疫苗诱导小鼠对血吸虫的保护力优于单一双价DNA疫苗。     

日本血吸虫多价分子疫苗的制备及其鉴定

目的:为了制备足量、高纯度的供血吸虫保护性免疫力研究的多价分子疫苗。方法:通过制备型SDS-PAGE和电渗析方法从日本血吸虫成虫分离纯化出28 kD、31/32 kD及97kD蛋白。并检测其蛋白含量,蛋白纯度和分子量及其抗原活性。结果:此三种纯化蛋白经SDS-PAGE检测均为单一条带并与所分离的蛋白分子量相符;其蛋白含量分别为0.35mg/ml、0.4mg/ml和0.3mg/ml;Westem-blot均为单一反应区带;ELISA反应滴度分别为1:640、1:1280和1:320。结论:所制备的日本血吸虫成虫28kD、31/32kD及97kD蛋白多价分子疫苗,具有纯度高、制备快、回收率高等优点,而且不影响所纯化的抗原活性。     

日本血吸虫多价分子疫苗的制备及其抗原性的研究

目的:为了制备足量、高纯度的供血吸虫保护性免疫力研究的多价分子疫苗。方法:通过制备型SDS-PAGE和电渗方法从日本血吸虫成虫分离纯化出28KD、31/32KD及97KD蛋白。经BCA法检测蛋白含量,SDS-PAGE检测蛋白纯度和分子量,Western-blot及ELISA检测其抗原活性。结果:日本血吸虫成虫28KD、31/32KD及97KD三种纯化蛋白经SDS-PAGE检测均为单一条带并与所分离的蛋白分子量相符;其蛋白含量分别为0.35mg/ml、0.4mg/ml和0.3mg/ml;West-ern-blot均为单一反应区带;ELISA反应滴度分别为1:640、1:1280和1:320。结论:由制备型SDS-PAGE和电渗析方法制备的日本血吸虫成虫28KD、31/32KD及97KD蛋白多价分子疫苗,具有纯度高、制备快、回收率高等优点,而且不影响所纯化的抗原活性。     

血吸虫合成多肽抗原免疫效果的实验研究

人工合成的10个不同血吸虫多肽片段对小鼠进行免疫保护实验，采用200μg／只皮下注射，共免疫3次，每次间隔1周，末次免疫后2周，以（40±2）条日本血吸虫正常尾蚴攻击感染。另设不免疫攻击感染日本血吸虫的小鼠为对照组。实验组小鼠分别获得10．7％～73．6％的减虫率、23．0％～75．9％的减卵率和－11．22％～66．78％的虫卵结节减小率。各实验组血清抗体均为阳性，随时间的延长有增高趋势。实验提示，以寡赖氨酸为母校，连接4个或8个抗原肽的多肽抗原效果比较理想。     

疟疾流行区居民抗疟药预防疟疾的使用[英]／Greenwood B／／Am J Trop Med Hyg

无免疫力的人群短期进入疟疾流行区，为防止疟疾感染使用抗疟药的重要性和意义已经获大家共识。化学预防促进了某些疟疾流行区旅游业和经济的发展，而采用抗疟药保护疟疾流行区居民则具有争议，英国伦敦学者Greenwood就过去抗疟药在不同方面使用情况作了回顾，并对疟疾控制中感兴趣的问题进行讨论。     

不同剂量日本血吸虫裸露DNA疫苗pCDSj32诱发小鼠保护性免疫力的初步研究

应用已构建的日本血吸虫裸露ＤＮＡ疫苗ｐＣＤＳｊ３２经骨骼肌免疫小鼠，获得了较好的保护性免疫效果。１００μｇ和２００μｇｐＣＤＳｊ３２免疫后，减成虫率分别为５２．４３％和３６．４７％；肝组织减卵率分别为５４．１９％和５７．７９％；并对各组小鼠肝脏虫卵肉芽肿的面积进行了测量。结果表明，ｐＣＤＳｊ３２免疫小鼠后可减少虫荷，降低血吸虫的产卵量，抑制肝脏虫卵肉芽肿的形成。     

白细胞介素-12在日本血吸虫脂肪酸结合蛋白诱导小鼠保护性免疫力中的佐剂作用

目的 研究白细胞介素-12（IL-12）对日本血吸虫脂肪酸结合蛋白（Sj14FABP）DNA疫苗的免疫增强效果。方法　 分别构建pVIVO2-Sj14FABP 和pVIVO2-IL12-Sj14FABP疫苗，鉴定构建成功后免疫小鼠。48只雄性BALB/c小鼠随机分为A、B、C和D等4组, 分别用0.9% NaCl（对照组）、pVIVO2、pVIVO2-Sj14FABP和pVIVO2-IL12-Sj14FABP肌注免疫1次（100 μg/只）。免疫后30 d各组小鼠感染40±2条尾蚴, 感染后45 d剖杀, 计数成虫及肝内虫卵；同时用ELISA法检测小鼠血清中IgG抗体水平，用双夹心ELISA法检测脾淋巴细胞经伴刀豆球蛋白A（ConA）和可溶性虫卵抗原（SEA）刺激后培养上清中白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-4（IL-4）和干扰素-γ（IFN-γ）含量。 结果 经PCR和酶切鉴定，成功构建pVIVO2-Sj14FABP和pVIVO2-IL12-Sj14FABP重组质粒；C、D组免疫后分别获得24.1%和39.4%的减虫率、27.2%和32.8%的减卵率；细胞因子检测结果，D组经ConA和SEA诱生的IL-2和IFN-γ水平显著增高（P　<　0.01），而IL-4水平显著降低，差异有统计学意义（P　<　0.01）；免疫后30 　d小鼠血清IgG水平无明显升高，各实验组间差异也无统计学意义(P　>0.05)。 结论 Sj14FABP DNA疫苗可诱导BALB/c小鼠产生部分抗血吸虫感染保护作用, 细胞因子IL-12能够诱导机体免疫反应向Th1型优势分化，并增强血吸虫病DNA疫苗免疫保护性效果。