增生性瘢痕中凋亡相关基因转录的变化

目的　探讨凋亡相关基因bcl -2、bax、p5 3和c- myc在不同形成时期的增生性瘢痕中的基因转录变化。方法　提取 16例不同发生时期的增生性瘢痕和 8例正常皮肤的总RNA后 ,分离mRNA ,用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)方法检测bcl- 2、bax、p5 3和c -myc基因在不同组织中的表达。结果　在增殖期的瘢痕中 ,凋亡促进基因bax、c- myc和 p5 3的表达量分别是正常皮肤的(62 .8± 14 .7) %、(78.0± 17.0 ) %和 (4 9.8± 4.3 ) % ,基因表达明显降低 (P <0 .0 5 ) ,而在成熟期的瘢痕中 ,这 3种基因的表达量都明显高于增殖期的瘢痕 ,恢复到正常皮肤水平。在正常皮肤中 ,bcl- 2基因表达水平较低 ,而在增殖期和成熟期的增生性瘢痕中表达量都显著升高 (P <0 .0 5 )。结论　bax、c- myc和 p5 3基因表达降低 ,bcl- 2基因表达增强可能是瘢痕中细胞凋亡减少 ,形成增生性瘢痕的机制之一 ,而bax、c- myc和 p5 3基因表达增强可能与瘢痕达到成熟状态有关。     

几种用于创伤修复研究的动物模型

创伤是整个医学领域最重要的基本问题之一。创伤愈合的研究已愈来愈受到人们的重视,而其中建立符合临床发病过程和建立符合影响创面愈合主要因素的动物模型又是研究创伤愈合机理与评价创伤修复药物的基础。现根据我们自己的工作实践,并结合国外有关报道,介绍几种用于创烧伤创面修复实用的动物模型。一、急性创伤修复模型该类模型应反映出创伤发病急、有明确致伤因素、创面为急性炎症反应以及愈合快等的特点。１．皮肤切线伤模型　利用利刀切割动物皮肤,产生线状切口,可深至皮下。此类模型切口可选在动物背部脊柱两侧或腹部,长度以２～…     

烧伤休克防治措施的改进

烧伤休克属低血容量性休克,但它与出血性休克血容量急剧减少的发病机理不同,它是由于体液渗出所致的渐进性血容量减少.这种减少有一个时间过程,随烧伤面积与深度和机体状况不同而时间有所长短,大面积烧伤病人伤后1h就有发生休克的可能.所以烧伤后及时快速补液,就成为防治休克的最主要措施,我们认为防治烧伤休克,补液应遵循"及时、快速、足量"的六字方针,在这一原则指导下应使休克期复苏治疗达到以下三个目的:①纠正"失代偿性显性休克",尽快改善机体缺氧状况,使组织氧输送量和氧耗量恢复正常;②纠正"代偿性隐匿性休克",迅速恢复胃肠道血液供应;③清除氧自由基,减轻组织重灌注损伤.     

脓毒症大鼠肾脏高迁移率族蛋白-1与肿瘤坏死因子表达的关系

新近的研究提示 ,高迁移率族蛋白 1(highmobilitygroup 1protein ,HMG 1)作为晚期炎症介质 ,可能参与了脓毒症及其介导急性肝、肺损害的病理生理过程[1-3 ] 。本实验采用盲肠结扎穿孔法 (CLP)造成大鼠脓毒症模型 ,对肾组织HMG 1mRNA表达的改变及其与肿瘤坏死因子 (TNF)的关系进行了初步探讨。一、材料与方法1.动物分组及模型 :雄性Wistar大鼠随机分为 3组 :(1)正常对照组 (10只 ) ;(2 )盲肠结扎穿孔组 (2 0只 ) :动物麻醉后 ,沿腹正中线切开 ,在盲肠根部结扎盲肠。用 18号针穿刺盲肠 3次 ,并留置一条宽 2mm的橡皮片贯通盲肠 ,防止针…     

高迁移率族蛋白B1诱导小鼠腹腔巨噬细胞凋亡的受体机制

目的 了解高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对小鼠腹腔巨噬细胞凋亡的影响及其受体机制.方法 分离培养小鼠腹腔巨噬细胞,在巨噬细胞中加入不同的刺激物,分为HMGB1组:加入10 μg/ml的HMGB1;HMGB1+抗晚期糖基化终末产物受体(RAGE)组:先加入RAGE多克隆抗体5μg/ml孵育2 h后,再加入HMGB1;HMGB1+重组鼠(rm)RAGE/Fc组:将10 μg/ml的HMGB1与10μg/ml的rmRAGE/Fc混合作用2 h后,再加入巨噬细胞;对照组:加入磷酸盐缓冲液.采用流式细胞仪检测细胞表面RAGE的表达强度.激光共聚焦显微镜观察细胞凋亡情况,流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 HMGB1组RAGE阳性细胞率(54±12)%明显高于对照组[(13±5)%,P＜0.01],其荧光强度(126±10)也显著高于对照组(34±8,P＜0.01).HMGB1+rmRAGE/Fc组、HMGB1+抗RAGE组凋亡细胞明显多于对照组,而HMGB1组晚期凋亡及坏死细胞明显多于其他3组.HMGB1组细胞凋亡率(39.5±2.3)%高于HMGB1+rmRAGE/Fc组[(17.3±3.6)%]、HMGB1+抗RAGE组[(14.8±4.8)%]及对照组[(5.4±2.3)%,P＜0.01].结论 HMGB1可诱导RAGE表达上调,RAGE是HMGB1诱导巨噬细胞凋亡的主要受体之一.     

特殊毁损性创面的修复与重建

目的报道特殊毁损性创面的修复与重建.方法1993年1月～2000年12月收治147例患者的毁损性创面175处,其中电烧伤96例,热压伤18例,一氧化碳中毒昏迷、癫痫发作等原因烧伤18例,药物渗漏、创面感染致深部组织坏死6例,放射性烧伤3例,化学烧伤2例,爆炸伤2例,冻伤2例.175处毁损性创面应用局部皮瓣,前臂逆行岛状皮瓣,胸大肌皮瓣,胸三角皮瓣,背阔肌皮瓣,腓肠肌肌皮瓣,胫前、胫后动脉岛状皮瓣等修复.创面缺损范围1cm×1cm～20cm×28cm,皮瓣最大22cm×30cm,最小1.5cm×2.0cm,同时行去细胞异体肌腱移植,修复缺损肌腱7例.结果169个皮瓣全部成活,创面Ⅰ期愈合;6个皮瓣远端小部分坏死,经切除坏死痂皮植皮愈合;7例去细胞异体肌腱移植全部成活.28例经4个月～8年随访,功能、外形均满意.结论根据毁损性创面部位、范围和程度,选择不同类型的皮瓣进行修复和去细胞异体肌腱移植,是恢复功能、改善患者生活质量的理想方法.     

脓毒症内分泌调节机制的研究进展

内分泌系统是机体应激时十分重要的调控系统之一,创伤、感染等外部打击以及体内免疫、炎症甚至心理等内在因素改变都可以引起神经内分泌系统的变化。内分泌系统可进一步广泛的参与机体代谢、免疫、炎症、凝血等众多方面的调节过程,在脓毒症的发生发展中具有重要作用。一、脓毒症时内分泌激素水平发生改变内分泌系统是机体重要的防御系统之一。机体可通过激活下丘脑 垂体 肾上腺(HPA)轴,加速能量供给,保护心、脑、肺等重要器官,降低过度炎症反应以及抑制生殖等非必要的能量消耗,以确保机体承受打击所造成的损害。首先,HPA轴在脓毒症早期活…     

FGF10及其受体对胎儿皮肤附件形成的诱导作用

探讨成纤维细胞生长因子10(FGF10)及其受体(Bek)在胎儿皮肤附件(SA)形成中的表达特征及其生物学意义。采用病理学技术和免疫组化方法检测FGF10、Bek、细胞角蛋白-19((CK19)、Bcl-2和细胞增殖核抗原(PCNA)在130块分别来自26例不同胎龄(8～31周)胎儿5个不同部位(头、下颌、耳垂、肩和胸骨柄)的皮肤组织中的表达水平。结果显示，除胎龄(E)8周胎儿缺乏FGF10和Bek蛋白表达外，所有蛋白在E11周以后的皮肤内都有阳性表达。在E11周，表皮下成团分布的间质细胞过表达FGF10、PCNA和Bcl-2，表皮细胞和周皮细胞则所有蛋白均呈强阳性表达；在E13周时表皮细胞局灶性增殖形成SA胚芽，并逐渐向真皮内生长、分化和迁移。提示问质细胞旁分泌的FGF10与上皮细胞膜Bek特异性结合，是诱导胚胎SA上皮细胞生长及其形态发生的重要信号。     

内毒素对人皮肤成纤维细胞的影响及在增生性瘢痕形成中的意义探讨

增生性瘢痕是烧伤患者创面愈合后所面临的主要问题之一,其临床特点为难耐的瘙痒及外观和功能毁损,给患者造成极大的痛苦.对增生性瘢痕诱因、发病机制和防治的研究,已成为创面修复领域的前沿课题.     

人β-防御素3基因在COS-7细胞中的表达

目的：构建人β—防御素3(hBD3)的真核表达载体，建立稳定表达hBD3的细胞株。方法：用EcoR Ⅰ酶切合有hBD3全长基因的pGEM-hBD3重组质粒，获得其编码区全长序列，将其连接入EcoR Ⅰ预处理过的pcDNA3中。转化大肠杆菌，酶切鉴定筛选出插入方向正确的转化子。采用脂质体转染法将重组pcDNA3-hBD3真核表达载体导入COS-7细胞，用G418进行抗性筛选，用RT-PCR和Western印迹检测目的基因hBD3的mRNA和蛋白表达水平。结果与结论：构建的pcDNA3-hBD3真核表达载体转染COS-7细胞后可稳定表达hBD3的mRNA和蛋白，且蛋白主要以分泌形式存在于培养上清中。