羧甲基茯苓多糖对人外周血淋巴细胞分泌IFN-α和IFN-γ的调节作用及中间体制备

用羧甲基茯苓多糖（CMP）预处理人外周血淋巴细胞（HPBL），经200IU／mlIFN－α启动后，加NDV的促诱生组的α-干扰素（IFN－α）效价比无CMP的常规诱生组高1．2倍；经PHA和／或ConA促诱生组的γ-干扰素（IFN－γ）效价比无CMP的PHA和／或ConA刺激常规诱生组高0．5倍（P＜0.01），尤以CMP＋PHA＋ConA促诱生的IFN－γ效果最佳。说明CMP具有IFN－α和IFN－γ促诱生效应（P＜0．01）。用CMP促诱生的IFN－α和IFN－γ中间体经各项指标检测不仅IFN－α和IFN－γ效价高，而且可达到生物制剂药用标准，经临床试验证明安全有效。     

低剂量辐照促培养人表皮细胞生长的实验研究

对培养人表皮细胞用低剂量辐照，观察按一定密度接种的人表皮细胞生长融合成片的时间，作MTT检测。结果提示低剂量辐照对培养人表皮细胞具有促进生长、增高代谢酶（SDH）的作用。初步检测了在该实验条件下的最佳剂量为80cGy。     

造血生长因子联合应用对骨髓粒-单系造血祖细胞体外增殖的影响

目的：研究不同造血生长因子联合应用对骨髓粒－单系造血祖细胞体外增殖的调节作用。方法：应用甲基纤维素体外半固体培养法，检测各种生长因子联合应用组，ＣＦＵ－ＧＭ集落的生长情况。结果：造血生长因子的联合应用不仅可增加ＣＦＵ－ＧＭ集落数，促进ＣＦＵ－ＧＭ集落的体外形成，而且，也能明显地增加ＣＦＵ－ＧＭ集落的体积，大型ＣＦＵ－ＧＭ集落数的比例在各联合应用组增加显著，其中以ＩＬ－３＋ＩＬ－６＋Ｇ－ＣＳＦ＋ＧＭ－ＣＳＦ联合应用组作用最强。同时，结果还显示，造血生长因子的联合应用可加速ＣＦＵ－ＧＭ集落的形成。结论：造血生长因子的联合应用能够协同地促进骨髓粒－单系造血祖细胞的体外增殖，从而为联合应用造血生长因子来扩增少量骨髓，外周血或脐血中造血干／祖细胞进行移植治疗白血病或实体瘤提供了实验依据。     

抗VEGF发卡状核酶抑制肝癌VEGF表达和移植瘤生长

目的:采用抗人血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)发卡状核酶基因转染肝癌细胞,观察核酶对VEGF表达及肿瘤生长的影响。方法:采用脂质体介导的方法,将人工合成的抗VEGF发卡状核酶基因转染肝癌细胞SMMC-7721,同时制备空载体和细胞对照,经G418筛选获得阳性克隆,基因组水平鉴定核酶在细胞中的表达,半定量RT-PCR法和免疫组化法观察核酶对SMMC-7721细胞VEGF表达的影响。接种各组细胞于裸鼠皮下,观察瘤体体积大小和质量,免疫组化法观测各组肿瘤微血管变化和VEGF的表达。结果:核酶基因成功导入到肿瘤细胞中,转基因细胞的增殖速率明显下降(P<0.01),转染核酶组细胞VEGF水平明显下降(P<0.01)。移植瘤成瘤率和生长速度减慢(P<0.01),肿瘤组织VEGF表达和血管形成减少(P<0.01)。结论:抗人VEGF发卡状核酶基因在体内、体外均可抑制肝癌VEGF表达,通过减少血管形成抑制肿瘤生长,为进一步开展肝癌血管靶向基因治疗提供实验依据。     

人lamda3干扰素(hIFN-λ3)基因克隆及表达

目的构建表达hIFN-λ3基因的真核表达载体，并在COS-7细胞中表达具有抗病毒活性的rhIFN-λ3蛋白。方法用口腔滤泡炎病毒VSV刺激A549人肺腺癌细胞，抽提总RNA，经RT-PCR获得全长cDNA，与pcDNA3．1／myc—his(-)A真核表达载体连接，构建重组体pcDNA3．1A-hIFN-λ3，并在COS-7细胞中进行表达，采用微量细胞病变抑制试验研究表达产物的抗病毒活性。结果经PCR和限制性酶切鉴定以及DNA测序确证重组入载体中的基因片段不仅方向正确，而且确为hIFN-λ3，与GeneBank报告序列完全一致，并成功地在COY-7细胞中瞬时表达了具有抗病毒活性的rhIFN-λ3蛋白。结论该研究成功地克隆出hhIFN-λ3基因编码序列，并在COS-7细胞中获得瞬时表达，证明了rhIFN-λ3蛋白具有抗病毒活性，为今后干扰素的基因治疗奠定了基础。     

抗病毒蛋白MxA的诱导和检测方法的实验研究

目的 研究抗病毒蛋白ＭｘＡ的表达及其活性。方法用ＩＦＮα２ｂ或３型腺病毒（Ａ＿３）分别对ＷＩ－３８细胞或人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ）作用 １２或２４ ｈ，并用Ｗｅｓｔｅｍ ｂｌｏｔ法或ＦＡＣＳ法，分别对Ｍ蛋白的表达进行定性和定量检测。采用微量细胞病变抑制法，对重组的ＭｘＡ和ＩＦＮα２ｂ进行抗病毒效应实验。结果 （１）低浓度的 ＩＦＮα２ｂ（＞ １×1０～＃ＩＵ／Ｌ）和Ａｄ＿３（＞２００ ＴＣＩＤ＿５０），均可诱导相应细胞表达 ＭｘＡ；（２）１０μｇ／Ｌ ＭｘＡ可抵抗２０个 ＴＣＩＤ＿（５０）的 ＨＳＶ－Ｉ、Ｐｏｌｉｏ． Ｖ感染 Ｖｅｒｏ细胞、Ａｄ＿３感染ＨｅＬａ细胞，抵抗２００个ＴＣＩＤ＿（５０）的ＶＳＶ感染Ｗｉｓｈ细胞。结论ＭｘＡ只能由干扰素（ＩＮＦα2ｂ）或病毒诱导产生，其具有广谱的抗病毒活性。     

固本生血丸对人骨髓造血祖细胞体外增殖的影响

应用造血祖细胞体外培养法研究了中药复方制剂——固本生血丸对人骨髓造血祖细胞体外集落形成的影响。结果表明：该制剂在０．０１～１０μｇ／ｍｌ浓度范围内与细胞因子（ＧＭ－ＣＳＦ或ＥＰＯ）协同促进正常骨髓和再障骨髓ＣＦＵ－ＧＭ、ＨＣＦＵ－ＧＭ，ＣＦＵ－Ｅ和ＢＦＵ－Ｅ的集落形成；作用高峰在１０μｇ／ｍｌ浓度上；当超过该浓度时，集落数量增加不明显（Ｐ＞０．０５），而单独应用该制剂时无集落形成。     

重组人白细胞介素24对肺癌A549细胞生长和肿瘤血管生成影响的实验研究

白细胞介素24（IL-24）即黑色素瘤分化相关基因7（mda-7），除具有免疫刺激应答功能外，还有抑制肿瘤细胞生长、促进其凋亡和抑制肿瘤血管生成的作用，被认为是一种新的抑癌基因。本研究观察了pET-21a-IL-24重组质粒表达系统的表达产物——部分纯化人重组IL-24（rhlL-24）蛋白，在体内外对肺癌A549细胞、瘤体生长的抑制作用和抗肿瘤血管生成作用。     

慢阻肺及肺心病患者细胞免疫功能的改变

慢阻肺及肺心病患者细胞免疫功能的改变苏州市第四人民医院（２１５００１）陆如山，曾刚苏州医学院缪竞诚，徐兴娣，徐培君，顾冠彬，张云，盛伟华慢性阻塞性肺疾病（ＣＯＰＤ，慢阻肺）是一种常导致肺心病的感染性疾病，其发生、发展和转归与机体免疫系统的功能有密切关...     

64排螺旋CT血管造影对肝动脉解剖变异的研究

目的:应用64排螺旋CT血管造影(computed tomography angiography,CTA)评价肝动脉血管变异。方法:对200例行64排螺旋CT检查的患者的肝动脉CTA资料进行分析,结合文献分析肝动脉解剖变异率及CTA对肝动脉解剖变异的诊断价值。结果:200例中,肝动脉解剖结构正常者166例,肝动脉解剖变异者34例。根据Michels分型,发现6种解剖变异,其中最多的是MichelsⅢ型(14例,7.0%),其次是MichelsⅡ型(9例,4.5%),另有MichelsⅣ型2例(1.0%)、MichelsⅤ型6例(3.0%)、MichelsⅥ型1例(0.5%)、MichelsⅨ型1例(0.5%),Michels分型以外的1例(0.5%)。本研究中肝动脉变异发生率与既往文献明显不同。结论:肝动脉的变异率及变异分型具有不规律性,64排螺旋CTA能提供肝动脉解剖结构的信息,对制定合理的手术、介入治疗方案有重要意义。