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201.
大鼠嗅黏膜嗅鞘细胞的分裂增殖和免疫细胞化学特性 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:体外培养大鼠嗅黏膜嗅鞘细胞(olfactoryensheathingcells,OECs),观察其形态、分裂增殖和免疫细胞化学特性,探索自体嗅黏膜嗅鞘细胞作为OECs来源的可能性。方法:采用差时贴壁的方法分离培养成年大鼠嗅黏膜嗅鞘细胞,相差显微镜下观察细胞形态和分裂增殖;用免疫组化方法观察GFAP、NGFRp75、S鄄100、NGF、BDNF、NT鄄3的表达。结果:培养的细胞根据形态来分,可分为双极、多极和偏平状;细胞分裂时先回缩成球形,分裂成两个子球,再伸出突起,变成梭形或多极形。GFAP、NGFRp75、S鄄100、BDNF和NT鄄3表达阳性。结论:在含血清培养基上,大鼠嗅黏膜嗅鞘细胞能正常分裂增殖和分泌神经营养因子。 相似文献
202.
hOSM在COS-7细胞中表达及对人A375黑色素瘤细胞的生长抑制作用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:克隆人抑瘤素(hOSM)基因并构建真核表达载体,在COS-7细胞中表达具有抑制人A375黑色素瘤细胞生长的基因重组蛋白。方法:用PMA刺激U937细胞,抽提总RNA,经RT-PCR获得cDNA,与pUCmT载体连接,经PCR获得全长hOSM基因,再与pcDNA3·1/myc-his(-)A真核表达载体连接,构建真核表达重组质粒pcDNA3·1A-hOSM,经PCR和限制性酶切及DNA测序鉴定后,在COS-7细胞中进行瞬时表达,采用RT-PCR鉴定hOSM基因的转录,MTT法检测表达产物抑制A375细胞生长的活性。结果:重组入载体中的基因片段不仅方向正确,而且所克隆的hOSM基因,与GeneBank报告序列完全一致,并成功地在COS-7细胞中瞬时表达了具有抑制A375细胞生长的rhOSM蛋白。结论:本研究成功地克隆出hOSM基因并在COS-7细胞中获得瞬时表达,证明了表达的基因重组蛋白具有抑制人A375黑色素瘤细胞生长的活性,为在真核细胞中进行稳定表达,深入研究rhOSM的生物学功能创造了条件。 相似文献
203.
204.
目的观察桂皮酸(CINN)对人肝癌细胞(HepG-2)的作用。方法体外培养HepG-2细胞,用CINN处理后,观察细胞形态、细胞集落形成能力、甲胎蛋白分泌量及细胞周期频数分布的变化。结果细胞形态趋向良性分化,集落形成率降低,甲胎蛋白分泌减少,G0/G1期细胞增加而G2 M期细胞减少。结论CINN可使HepG-2细胞某些恶性表型发生逆转。 相似文献
205.
206.
香菊冲剂是苏州市中医院献出的经验方,由香薷、藿香、野菊花和青蒿四味药组成。经体外试验证明有较好的抑菌和抗病毒作用。一、抑茵作用经微极法测定MIC的结果,表明香菊冲剂对引起呼吸道疾病的常见菌,除金黄色葡萄球菌的抑菌效果偏低外,其他细菌均有明显的抑制作用,甚至对某些肠道杆菌也有较强的抑菌作用。二、抗流感病毒的作用经香菊冲剂预处理的流感病毒接种鸡胚尿囊腔,孵育48h后的血凝效价明显下降,而且与作用时间的长短有关。三、在Hep-2(人喉癌细胞)和Wish(人羊膜细胞)细胞上抗病毒作用不同浓度的香菊冲剂与VsV(滤泡性口腔炎病毒)或poliv(脊髓灰质炎病毒疫苗混合型)作用30min后,分别接种Hep-2和Wish细胞,某抗病毒效应为: 1.药物在1:16以上时对Hep-2和Wish细饱均无毒性作用。 相似文献
207.
抗病毒蛋白MxA的诱导和检测方法的实验研究 总被引:3,自引:0,他引:3
目的 研究抗病毒蛋白MxA的表达及其活性。方法用IFNα2b或3型腺病毒(A_3)分别对WI-38细胞或人外周血单个核细胞(PBMCs)作用 12或24 h,并用Westem blot法或FACS法,分别对M蛋白的表达进行定性和定量检测。采用微量细胞病变抑制法,对重组的MxA和IFNα2b进行抗病毒效应实验。结果 (1)低浓度的 IFNα2b(> 1×10~#IU/L)和Ad_3(>200 TCID_50),均可诱导相应细胞表达 MxA;(2)10μg/L MxA可抵抗20个 TCID_(50)的 HSV-I、Polio. V感染 Vero细胞、Ad_3感染HeLa细胞,抵抗200个TCID_(50)的VSV感染Wish细胞。结论MxA只能由干扰素(INFα2b)或病毒诱导产生,其具有广谱的抗病毒活性。 相似文献
208.
腺病毒载体介导的人IL-24基因对HL-60白血病细胞体外培养的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 构建人IL-24的腺病毒载体Ad-IL24,观察Ad-IL24对HL-60细胞体外培养的影响.方法 以pcDNA3.0-IL24重组质粒为模板PCR扩增IL-24基因,酶切并连接到带有绿色荧光蛋白(GFP)标记的pAdTrack-CMV质粒上,Pme Ⅰ线性化重组质粒pAdTrack-CMV-IL24,并与腺病毒质粒pAdEasy-1共转化BJ5183细菌,获得重组腺病毒载体pAdEasy-1-pTrack-CMV-IL24,经Pac Ⅰ线性化后转染QBI-293A细胞,收获重组病毒Ad-IL24.将它感染HL-60细胞,通过激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)、MTT和流式细胞术(FCM)法检测IL-24对HL-60细胞生长的影响,免疫细胞化学分析凋亡因子的改变,ELISA检测重组病毒对HL-60细胞分泌γ干扰素(IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响.结果 成功构建重组腺病毒载体pAdEasy-1-pTrack-CMV-IL24并获得高滴度的重组腺病毒Ad-IL24,各种检测方法表明IL-24基因能抑制HL-60细胞生长,诱导凋亡,IL-24还能下调HL-60细胞Bcl-2的表达并刺激它分泌二级细胞因子IFN-γ和TNF-α.结论 IL-24能抑制HL-60细胞生长、诱导凋亡,它可通过下调HL-60细胞Bcl-2的表达并刺激其分泌具有抗肿瘤活性的二级细胞因子来发挥效应. 相似文献
209.
目的克隆hIFN-λ1基因,构建pcDNA3.1 A-IFN-λ1表达质粒,并在真核细胞中获得表达,以进一步研究rhIFN-λ1的生物学特性.方法采用RT-PCR法从病毒诱导的A549细胞mRNA中克隆hIFN-λ1基因,并重组于pcDNA3.1A真核表达载体上.结果经双酶切和PCR鉴定及DNA序列分析,发现所克隆的基因与GenBank公布的序列一致,并在COS-7细胞中获得了有效瞬时表达.结论成功克隆了hIFN-λ1基因,并成功地获得了瞬时表达,其rhIFN-λ1表达产物具有抗病毒活性. 相似文献
210.