人胚嗅球嗅鞘细胞原代培养的实验研究

目的拟建立人胚胎嗅球嗅鞘细胞的培养方法并探讨这些细胞在活性、纯度方面是否具备临床应用水平。方法用含有促进细胞生长的谷氨酰胺、转铁蛋白、生物素、硒酸纳的无血清纯化液纯化嗅鞘细胞,胰蛋白酶消化收集细胞,制成单细胞悬液。采用台盼蓝染色法进行活性测定,P75NGFR和S-100双标免疫荧光染色鉴定,以Hoechst复染鉴定OECs的纯度。结果可见比较典型的嗅鞘细胞:双极或梭形、多突起形和扁圆形,主要以梭形和多突起形细胞为主。细胞活性大于95%,纯度大于90%。结论实验建立的人胚胎嗅球嗅鞘细胞原代培养的方法可行,细胞活性大于95%,纯度和均一性已达到临床应用水平。     

炭疽芽胞杆菌基因组中串联重复序列拷贝数的分析

目的研究炭疽芽胞杆菌基因组中多位点串联重复序列遗传标记的遗传变异规律。方法根据文献上发表的串联重复序列位点，利用已发表的13对引物，对88株炭疽芽胞杆菌基因组DNA进行PCR扩增，扩增产物进行琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳，利用凝胶影像分析软件对PCR产物DNA片段的碱基含量进行测算，计算出串联重复拷贝数。对部分PCR扩增产物DNA片段进行测序，利用DNAStar软件进行序列比对，分析不同菌株间的串联重复序列遗传变异规律。结果（1）炭疽芽胞杆菌基因组中的串联重复序列位置，同一菌株具有相对稳定的串联重复拷贝数。（2）88株炭疽芽胞杆菌DNA上的13个串联重复序列遗传标记中，有的串联重复序列拷贝数变异较小，有的却存在着复杂的多态性；（3）有些串联重复序列单位内的核苷酸数目不变，但核苷酸的排列组合有差异，不过其重复单位内都包含着一个相同的稳定不变的核心核苷酸序列。结论炭疽芽胞杆菌基因组DNA中串联重复序列可以精确定位，测定结果可以数值化，并且串联重复序列在菌株DNA中具有相对的稳定性，因此，串联重复序列是研究炭疽芽胞杆菌遗传特征的较好指标，具有鉴别炭疽芽胞杆菌菌株间差别的能力。     

布鲁氏菌种及种内部分生物型快速PCR鉴定方法的建立及应用研究

目的 建立一步法PCR快速鉴定布鲁氏菌种及种内部分生物型.方法 设计6对引物,建立一步法PCR反应,将布鲁氏菌6个种和种内某些生物型进行鉴定,应用该方法检测了27株布鲁氏菌参考菌株和239株临床分离的布鲁氏菌,并与生物学分型方法进行比较.结果 通过一步法PCR能够将待检菌株准确的鉴定到布鲁氏菌种,对于猪种可以定位到生物型和疫苗株;对于牛种可以鉴定到牛种生物型1、3、4 与2、5、6、7、9两组生物型;对于羊种可以鉴定到1与2、3两组生物型和羊种疫苗株.生物学分型方法和PCR方法准确鉴定到种水平的符合率分别为98.33％和100％.结论 一步法PCR是一种快速、特异、简便而低费用的鉴定布鲁氏菌种的分子分型方法.     

食管胸部上段器官外供血动脉的解剖学观测

目的为探讨食管胸部上段供血动脉的来源及分支形态,以期为临床应用补充解剖学资料。方法利用成人、婴幼儿尸体25具,红色乳胶灌注后剥离,进行解剖学观察与测量。结果得出该段供血动脉主要来源于支气管动脉的分支,占该段食管供血动脉总支数的69.84%;供血动脉可游离长度平均为(20.46±14.37)cm,起点外径平均为(1.32±0.40)cm;分支主要有两种类型,分支间存在吻合。结论食管腹段来源相对恒定,分支比较复杂,其血供评价单纯从器官外角度是丰富的,但应综合考虑器官内外的血管构筑。     

生长激素释放肽对心衰大鼠心肌组织中IL-6的影响

目的研究心肌组织中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的含量变化以及生长激素释放肽(growth hormonereleasing peptide,GHRP)对其影响。方法以阿霉素制备大鼠心衰模型,采用放射免疫学方法检测大鼠心肌组织中IL-6的含量。结果模型组与正常组相比,左室峰压、左室压力最大上升和下降速率(±dp/dtmax)降低,而心肌组织中IL-6含量增高,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗组与模型组相比,左室峰压、左室压力最大上升和下降速率(±dp/dtmax)增高,心肌组织中IL-6含量降低,差异均有统计学意义(P<0.05),而与正常组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论IL-6与CHF的发生密切相关,GHRP具有降低心肌组织中IL-6含量和改善CHF大鼠心功能的作用。     

胎儿横结肠的微血管构筑

用组织透明揭层铺片,组织切片及微血管铸型扫描电镜观察三种方法,观察了足月新鲜胎儿横结肠肠壁的微血管构筑,血管配布可分为四个层次,浆肌层血管丛主要由缘动脉的长支,短支及粘膜下丛一级血管网发的返支构成,环行有层血管丛有特定的构筑形式,依次形成肌束间,肌束内及肌纤维血管,肌纤维血管呈细小的波浪状称为蚓状血管,粘膜下层血管丛呈“层状”分布,形成三级血管,其一级血管网为结肠器官内血管三维空间联系的交通枢纽,     

青海省2005-2019年人间布鲁氏菌病流行特征及分子特征分析

目的 分析青海省人间布鲁氏菌病（布病）流行规律与趋势,对2005-2019年布鲁氏菌分离株进行分子分型,为制定青海省布病预防控制策略提供依据。方法 收集中国疾病预防控制信息系统青海省2005-2019年布病报告数据,描述和分析其时间、地区和人群三间分布。采用BCSP31聚合酶链式反应（BCSP31-PCR）、AMOS聚合酶链式反应（AMOS-PCR）和多位点串联重复序列分析（MLVA-16）方法鉴定布鲁氏菌分离株,进行聚类分析。结果 2005-2019年青海省累计报告病例577例,平均发病率为0.07/10万,不同年份差异有统计学意义。一年四季均可发病,集中在每年的3-10月。577例病例分布在6个自治州（市）的31个县（市、区）中,病例数位居前5位的是门源回族自治县（22.88%,132/577）、天峻县（10.57%,61/577）、西宁市（10.57%,61/577）、河南蒙古族自治县（10.51%,58/577）和海晏县（9.53%,55/577）。年龄范围8～82岁,男女性别比为1.8：1（374/203）,职业分布以牧民为主（47.83%,276/577）。从人全血中分离的10株菌株均为羊种Ⅲ型布鲁氏菌,分为5种基因型（2种基因型为单基因型,3种基因型为相同基因型）,MLVA-16分型和聚类分析结果显示,同青海省已发表文献的26株羊种Ⅲ型布鲁氏菌的遗传关系较近。结论 青海省布病疫情呈回升趋势,应加强人群监测和疫情通报,MLVA-16分型呈基因多态性,提示MLVA-16可用于遗传多样性分析和分子流行病学溯源调查,以提高布病监测能力。     

融入式医学人文教育在人体解剖学教学中的探索与实践

本文探讨了在人体解剖学教学中融入医学人文教育的“323”模式,其落实的关键在于教师的认识和医学人文修养的积累。通过常规性地举办敬捐活动,突出医德教育,实施“合作学习”与磨难教育,提高学生医学美学鉴赏和交流沟通能力,构建良好的物化环境等多项举措,融入式医学人文教育实践已经取得了一些成果。     

氯沙坦对大鼠慢性心力衰竭的干预作用

目的 通过氯沙坦对慢性心力衰竭(慢性心衰)干预,研究慢性心衰时心肌细胞凋亡变化的原因及其机制,为慢性心衰的治疗提供理论依据。 方法 采用阿霉素制作慢性心衰大鼠模型,以氯沙坦为干预剂,采用透射电镜、免疫组织化学、RT-PCR及原位缺口末端标记法(TUNEL)对心肌细胞凋亡的形态和凋亡蛋白Bax、Bcl-2及通路蛋白细胞外信号调节激酶（ERK1）、氨基末端激酶（JNK1）和促分裂原活化蛋白激酶（P38MAPK）的mRNA表达变化进行研究。 结果 氯沙坦治疗后,与心衰组动物相比,心肌细胞的超微结构明显好转;凋亡指数明显降低（P <0.01）;Bcl-2的含量明显升高而Bax的含量显著下降（Bcl-2 χ² =6.81、P =0.0074;Bax χ² =66149、P =0.0078,均P <0.01）;ERK1mRNA表达明显增加而JNK1mRNA表达则显著下降（ｑ =15.3514,P <0.01;ｑ =22.0156,P <0.01）。 结论 氯沙坦对慢性心衰的干预作用与ERK1和JNK1途径密切相关,而p38MAPK途径与此过程相关性不大。     

我国羊种布鲁氏菌rpoB基因遗传多态性分析

目的 调查中国羊种布鲁氏菌rpoB基因的多态性。方法 利用AMOS-PCR对分离菌株进行种型鉴定;根据布鲁氏菌rpoB基因的4个多态性位点设计特异性引物,对299株羊种布鲁氏菌流行株（羊1型菌38株、羊2型菌19株、羊3型菌242株）的rpoB基因的4个多态性位点进行扩增,并将PCR产物测序结果与羊种布鲁氏菌标准菌株的扩增结果进行比对。结果 羊种布鲁氏菌的rpoB基因检测发现,有169株为rpoB-2变异型、103株为rpoB-2型、24株为新的rpoB基因型（rpoB-4型）及3株为rpoB-1型。结论 我国羊种布鲁氏菌rpoB基因具有较高的多态性,可作为羊种布鲁氏菌的分子流行病学调查靶基因,我国羊种菌rpoB基因型和生物型无相关性。