五灵胶囊对实验性肝硬化大鼠的影响

目的 :观察五灵胶囊对大鼠肝纤维化的作用及其机制。方法 :采用以四氯化碳 (CCl4)为主的复合因素致大鼠肝纤维化 ,化学法测定血清羟脯酸 (HYP)含量 ,放免法测定血清与肝匀浆I型前胶原 (PCI)和Ⅲ型前胶原 (PCⅢ )水平 ,免疫组化法检测肝组织肿瘤坏死因子 (TNF)、纤维结合蛋白 (FN )的表达。同时 ,体外培养成纤维细胞 ,观察五灵胶囊对其的抑制作用。结果 :五灵胶囊能显著降低肝纤维化大鼠血清PCI、PCⅢ和肝匀浆HYP、PCI。五灵胶囊组大鼠肝FN表达量明显少于模型组。体外实验表明 ,五灵胶囊可抑制成纤维细胞的生长。结论 :五灵胶囊确有抗肝纤维化作用     

灵芝及其与丹参、五味子、柴胡配伍对小鼠实验性肝损伤的影响

目的　探讨灵芝醇提物分别与柴胡、丹参、五味子醇提物配伍后对小鼠实验性肝损伤的保护作用。方法　分别采用四氯化碳 (CCl4 )或D 氨基半乳糖 (D GlaN)诱导的小鼠肝损伤模型 ,给予同一剂量的药物 ,测定血清及肝组织ChE和ALT活性 ,肝组织MDA、ALP、GSH含量 ,VG染色观察肝组织形态学变化。结果　CCl4 所致小鼠血清ALT急剧升高 ,ChE显著下降 ,灵芝及灵芝 +五味子、灵芝 +柴胡组有显著降低和升高作用 ;灵芝各配伍组可显著抑制GSH的升高 ,对MDA的升高只有灵芝 +五味子可显著抑制 ,使其降至正常水平。对D GlaN所致模型组的ChE活性影响不明显 ;灵芝组可使显著升高的ALT活性明显降低 ;对GSH的升高 ,灵芝 +丹参有影响 ,但差异无显著性。灵芝及灵芝各配伍组对升高的MDA有显著降低作用 (P <0 .0 1) ,病理切片观察表明 ,灵芝及灵芝 +五味子组对肝细胞的损伤有较好的修复作用。结论　灵芝对实验性肝损伤有一定的保护作用 ,与五味子配伍作用更明显。这一作用机制可能与抗肝细胞氧化损伤有关     

薄层扫描法测定三黄前列贴中姜黄素含量

目的 建立薄层扫描法测定三黄前列贴中姜黄素含量法. 方法 样品经过适当提取后点于硅胶G薄层板上, 以三氯甲烷-甲醇-甲酸（9.6：0.3：0.1）为展开剂, 检测波长λs＝425 nm , λR＝560 nm. 结果 姜黄素点样量在 0.05～0.25 μg之间线性良好, 相关系数r＝0.999 7 . 平均回收率为101.59%; RSD＝2.61% . 结论 该法结果 准确, 灵敏, 操作简便, 可用于该制剂质量控制.     

大鼠肝纤维化形成过程中TGF-β1/ERK信号通路与Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原表达变化

目的 观察大鼠肝纤维化(hepatic fibrosis,HF)形成过程中TGF-β1/ERK信号通路蛋白与Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原蛋白表达的变化.方法 SD大鼠采用CCl4复合因素制备HF模型,分别于第2、3.5、4.5、5、6、10周时,取肝组织采用Masson染色检测肝细胞变性及胶原纤维增生程度;定量RT-PCR检测COL-Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、TGF-β1、PDGF-BB mRNA表达,Western blot法检测肝组织中COL-Ⅰ与TGF-β1/ERK信号传导通路蛋白表达的变化.结果 肝细胞脂肪性变与胶原形成程度随着造模时间的延长逐渐加重;COL-Ⅰ、Ⅲ mRNA与蛋白表达以2周、3.5周时显著上调,4.5周后降低,10周又显著上调,COL-Ⅳ表达水平在2～4.5周明显增加,随后下降至正常水平,p-ERK表达水平在各时相点增加与α-SMA表达水平有良好的一致性,p-ERK表达水平与TβRⅠ、TβRⅡ、PDGFRβ表达无良好一致性.结论 在HF形成过成中肝组织内p-ERK可激活肝星状细胞表达α-SMA,加强COL-Ⅰ、Ⅲ mRNA转录.     

椒目油A2对不同时相哮喘小鼠肺组织NF-кB信号通路及炎症因子表达的影响

目的：探讨椒目油A2（ZSOA2）对不同时相哮喘小鼠肺组织核因子- кB（NF-кB）信号通路和炎症细胞因子的影响。方法：采用腹腔注射 20% Al(OH)3+10%卵蛋白 (OVA) 混合液致敏并每天1次呼吸道滴入50 μL（0.4% OVA磷酸缓冲液pH =7.4）制备小鼠哮喘模型。在滴入后24 h、48 h、3 d、7 d、14 d分别处死小鼠,ELISA法测定肺灌洗液（BALF）中白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-5（IL-5）、干扰素-γ (IFN-γ) 含量;HE染色法检测肺组织病理形态学及伊红染色计数炎性细胞分类;Western blotting法测定肺组织NF-кB信号通路蛋白表达。结果：ZSOA2组能显著减少哮喘小鼠各时点肺组织嗜酸性粒细胞（EOS）、淋巴细胞 (LY)（P<0.05）;降低各时点BALF中IL-5、IL-4,升高IFN-γ的水平;下调肺组织中细胞黏附分子-1（ICAM-1）、血管内皮黏附分子-1（VCAM-1）、核因子抑制蛋白-α激酶（IKK-α）、磷酸化核因子抑制蛋白（p-IкB）的表达,上调肿瘤坏死因子受体1 (TNF-R1) 和磷酸化核因子- кB65（p-NF-кB65）蛋白表达水平。结论：ZSOA2治疗OVA诱发小鼠哮喘是下调肺组织内NF-кB信号通路中IKK-α和p-IкB表达,抑制细胞因子和趋化因子的释放与产生,使炎性细胞浸润程度减弱,而产生治疗哮喘的作用。     

乐尔脉对脑缺血再灌注神经细胞凋亡与相关基因表达的影响

目的:探讨脑缺血再灌注损伤后皮层神经细胞凋亡与相关基因表达及乐尔脉(当归,莪术等)的作用与机制.方法:采用大鼠左侧大脑中动脉内栓线阻断法造成局灶性脑缺血再灌注模型.缺血2 h再灌注3 d后,应用原位末端标记法(TUNEL)检测皮层神经细胞凋亡.免疫组化、RT-PCR法检测皮层神经细胞Fas、Fas-L、Bax、BcL-2、Caspase-3、9蛋白及mRNA的表达.结果:大鼠缺血2 h再灌注3 d后,模型组缺血侧皮层细胞凋亡率显著高于假手术组(P＜0.01),凋亡相关蛋白Fas、Bax、Caspase-3、9表达区域与凋亡一致,凋亡相关基因Fas、FasL、Bax、Caspase-3、9mRNA的表达上调(P＜0.05).LEM 2.0 g/kg、0.87 g/kg和氟桂利嗪可明显减少皮层神经细胞凋亡,下调Fas、Fas-L、Bax、Caspase-3、9mRNA的表达(P＜0.05),LEM 0.87 S/kg作用次于2.0 S/kg.氟桂利嗪下调Bax mRNA和BeL-2 mRNA,乐尔脉既抑制Bax mRNA表达又上调BcL-2 mRNA.结论:乐尔脉抑制了神经细胞的凋亡,从而缓解了脑缺血再灌注后的损伤,这种脑保护作用与LEM对神经细胞凋亡信号转导通路蛋白及相关基因调节作用有关.     

肝卵圆细胞对肝纤维化大鼠肝组织TGF-β/Smad信号通路的影响

目的:探讨肝卵圆细胞(HOCs)对肝纤维化(HF)大鼠肝组织TGF-β/Smad信号通路蛋白表达的影响。方法:采用CCl4和复方因素制备HF大鼠模型,取模型组大鼠分离纯化HOCs,从门静脉植入HF大鼠肝组织内,连续观察30d,同时以五灵胶囊为阳性对照。在植入后8d、15d、23d、30d各组大鼠尾静脉采血,酶法测定血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT),实验结束取肝组织Masson染色观察肝组织形态学变化,Western blotting检测肝组织Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(ERK)、磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(p-ERK)、转化生长因子β受体Ⅰ(TβRI)、转化生长因子β受体Ⅱ(TβRⅡ)、果蝇MAD类似基因2/3(Smad2/3)、果蝇MAD类似基因7(Smad7)蛋白的表达。结果:HOCs植入组与五灵胶囊组在植入后15d、23d、30dAST、ALT水平显著降低;肝组织胶原纤维增生程度明显减轻;肝组织表达ERK、p-ERK、TβRI、TβRⅡ蛋白作用显著降低,表达Smad7的作用显著增加。结论:植入HOCs可阻止大鼠HF的进展,其作用机制可能与其抑制肝组织内TGF-β/Smad信号通路p-ERK、TβRⅠ、TβRⅡ蛋白的表达有关。     

椒目油A2通过抑制EOS浸润和骨髓粒系动员减轻哮喘小鼠气管炎症反应

目的： 观察椒目油A2对哮喘支气管嗜酸性粒细胞（EOS）浸润与CD34+细胞及骨髓粒系动员的影响。方法: 腹腔注射 20% 氢氧化铝［Al(OH)3］+10% 卵蛋白（OVA） 混合液致敏与雾化吸入1% OVA诱发BALB/c 小鼠哮喘模型。在激发10 d并同时给药治疗后,小鼠被处死,瑞氏染色检测肺灌洗液（BALF）炎性细胞及骨髓造血细胞系变化,原位杂交（ISH） 检测肺组织和骨髓白细胞介素-5（IL-5）mRNA和嗜酸性粒细胞趋化因子（EON）mRNA 表达,免疫组化检测肺组织和骨髓中IL-5、EON的蛋白表达,HE和荧光染色观察肺组织炎症细胞浸润和CD34+细胞。结果: 椒目油A2和泼尼松显著地减轻肺组织支气管炎性反应的病变程度如组织肿胀、重构、增生、上皮细胞脱落等,抑制变应源致敏刺激机体所致EOS 增多和浸润, 明显地减少哮喘小鼠气管周围及骨髓中EOS密度,抑制骨髓中幼粒细胞向嗜酸性粒细胞分化,同时支气管区及骨髓中CD34+IL-5、 CD34+IL-5R、 CD34+CCR-3细胞数显著减少,这与肺组织内IL-5、IL-4、GM-CSF等细胞因子水平降低有关。结论: 椒目油A2减轻实验性哮喘小鼠气道炎症反应,其机制可能与其抑制支气管EOS增多和骨髓粒系动员相关。     

柴胡 丹参 五味子加减配伍对小鼠慢性肝损伤的作用

目的 研究柴胡、丹参、五味子加减配伍在两种小鼠慢性肝损伤模型的影响，并探讨协同作用。方法 采用CCl4,D-galactosamine(D-GlaN)制备小鼠慢性肝损伤模型，测定小鼠血清ALT、CHE和肝组织ALP、ALT、MDA、GSH水平，并进行肝脏病理组织学检查。结果 柴胡、丹参配伍和柴胡、丹参、五味子配伍可使小鼠血清ALT显著降低，CHE显著升高，能清除GSH和MDA在肝组织的蓄积，但对肝组织内ALT、ALP无影响。病理组织学检查结果提示柴胡、丹参配伍对两种性肝损伤有显著修复作用，而柴胡、丹参、五味子配伍组则无效。结论 柴胡配伍丹参对损伤肝病组织的修复，肝细胞再生显示良好的治疗作用。