生物芯片技术在药物研究中的应用

摘要：生物芯片技术是随着“人类基因组计划”的进展而发展起来的,是20世纪90年代中期以来影响最深远的重大科技进展之一,它融微电子学、生物学、物理学、化学、计算机科学为一体的高度交叉的新学科,具有重大的基础研究价值,又具有明显的产业化前景。采用生物芯片可进行生命科学和医学中所涉及的各种生物化学反应,以达到对基因、抗原和活体细胞等进行测试分析的目的。生物芯片技术的发展,大大推动药物研究开发进程。本文就生物芯片在药物研发过程中的应用进行综述。     

三七皂苷的口服吸收机制

目的研究三七总皂苷(PNS)的口服吸收机制。方法采用Caco-2细胞和动物等模型研究PNS中人参皂苷Rb_l(Rb_l)和人参皂苷Rg_l(Rg_l)的胃肠道内稳定性、肠道黏膜吸收机制及吸收过程中胃、肠及肝对药物的影响。结果Rb_l和Rg_l在胃液酸性环境下易被破坏，而在近中性环境内基本保持稳定。Rb_l和Rg_l在大肠内容物中易降解，尤以Rb_l降解较为明显；二者在小肠内容物中则相对稳定。Rb_l和Rg_l在Caco-2细胞层的摄取受温度的影响，而pH的变化及环孢菌素A的加入对二者摄取均无显著性影响。在实验考察的浓度范围内，细胞内Rb_l(或Rg_l)的摄取量随Rb_l(或Rg_l)的浓度的增加而呈线性增加，Rb_l(或Rg_l)单体与总皂苷中的Rb_l(或Rg_l)在Caco-2细胞模型中的吸收特性无明显差异。而Rg_l的细胞摄取量［(1.07±0.16) μg·mg^-1(protein)］(C₀=1 mg·mL^-1)相对Rb_l［(0.77±0.03) μg·mg^-1(protein)］(C₀=1 mg·mL^-1)较高。Caco-2细胞转运实验表明，Rb_l和Rg_l单体的转运透过系数(P_app)分别为(5.9±1.0)×10^{-8cm·s-1和(2.59±0.17)×10-7 cm·s-1(C₀=1 mg·mL-1)，二者转运都不受环孢菌素A影响。PNS溶液灌胃、十二指肠及门静脉给药后测得Rb_l大鼠绝对生物利用度分别为0.71%，2.75%和65.77%；Rg_l分别为3.29%，6.60%和50.56%。结论三七总皂苷(包括Rb_l和Rg_l)的肠道吸收机制为单纯被动扩散，吸收过程不受细胞膜内P-gp和MRP外排载体的调控，PNS中其他成分对Rb_l或Rg_l的吸收特性无明显影响。胃液的酸性环境、大肠菌丛产生的酶及肝脏的首过作用均对其口服吸收产生影响，而肠道黏膜的透过性低是其口服吸收差的主要影响因素。}     

三维牵引治疗腰椎间盘突出症伴骶髂关节骨错缝的临床研究

腰椎间盘突出症(Lumbar Intervertebral Disc Herniation)与骶髂关节骨错缝都是临床上的多发病、常见病.且两者之间症状相似,常常有着一种相互依存,互为因果的关系.从2004年7月～2008年7月我们使用DEK-IIIC型三维腰椎牵引床治疗腰椎间盘突出症伴骶髂关节骨错缝38例,取得很好的疗效,并进一步明确规定了切合实际的参数设置,现报告如下……     

中西药合用配伍禁忌

中西药合用防治疾病的情况日趋普遍,熟练掌握中西药的合理联用至关重要。对一些常见的中西药合用配伍禁忌进行了分析,以期对避免配伍禁忌的发生及保障临床用药安全起抛砖引玉之功。     

多发性硬化的临床特点分析

目的探讨多发性硬化(MS)的临床表现特点。方法回顾性分析2007-01—2010-06于我院确诊的68例多发性硬化病例,总结其一般资料、临床表现、病变部位、重要辅助检查及治疗转归等。结果 68例患者中,首发症状以肢体无力(28例,41.2%)最常见;肢体无力、感觉障碍、视觉损害是MS患者最常见的症状;MS好发于青壮年,以急性和亚急性起病为主;视、听、体感诱发电位(VEP、BAEP、SEP)有助于发现亚临床病变;脑脊液(CSF)检查可有异常;磁共振(MRI)检查阳性率高;临床定位以大脑半球、脊髓和视神经受累最多见。糖皮质激素及免疫球蛋白治疗有效。结论根据临床特点,结合神经电生理脑脊液及影像学等检查能大大提高MS的临床确诊率。     

三维牵引治疗腰椎间盘突出症伴骶髂关节半脱位的临床分析

目的：观察三维牵引治疗腰椎间盘突出症伴骶髂关节半脱位的临床效果。方法：把165例病例随机分成两组,均采用三维牵引治疗,其中治疗组85例,治疗上以骶髂关节半脱位为主设置治疗参数,腰椎间盘突出症作治疗参考;对照组80例,治疗上以腰椎间盘突出症为主,忽略骶髂关节半脱位,采用电脑系统认可的处方参数治疗,并用两组的结果进行对比。结果：治疗组的有效率为100％;对照组的有效率为50％,经统计学处理,X2=56．10,P〈0．01,有统计学意义,两组疗效有显著性差异。结论：利用三维牵引治疗腰椎间盘突出症伴骶髂关节半脱位的患者时,如果按以往方法,无视骶髂关节错位的存在,这是一个主次不分的错误治疗,50％以上患者会出现牵引后腰腿痛加重现象。     

法莫替丁固体自乳化给药系统的制备及体外溶出研究

目的：制备法莫替丁自乳化给药系统（FM—SEDDS）以提高药物的溶出度。方法：通过绘制假三元相图和体外自乳化效率的评价确定最优处方;以法莫替丁胶囊为参比制剂,测定的溶出度。结果：最优SEDDS处方中的油相为薄荷脑和单硬脂酸甘油脂的混合油相,乳化剂为RH40助乳化剂为丙二醇其比例为45．0：40．0：15．0药物为辅料总录的5．O％。结论：与法莫替丁胶囊相比,FM—SEDDS[0]的溶出度显著提高。     

MLH1 R217C/BRAF V600E 突变型家族性甲状腺乳头状癌永生化细胞系的建立及鉴定

摘要： 目的 建立家族性甲状腺乳头状癌 （FPTC） 永生化细胞系, 为研究家族性非髓样甲状腺癌 （FNMTC） 提供新的途径。方法 选取 FPTC 患者的肿瘤标本, 采用消化法分离原代细胞。使用改良的 DMEM/F12 培养基, 添加促甲状腺激素 （TSH）、 三碘甲状腺原氨酸 （T3）、 表皮细胞生长因子 （EGF） 及氢化可的松等进行培养。在原代细胞早期分 2种方式导入外源基因 SV40T/TERT 用于诱导永生化。利用 RT-PCR 检测甲状腺过氧化物酶（TPO）、 甲状腺球蛋白（TG）、 促甲状腺激素受体 （TSHR）、 钠/碘共同转运体（NIS） 等基因的表达, 同时利用免疫荧光技术检测 TPO 及磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3（GPC3）蛋白的表达。提取该患者外周血 DNA, 进行突变基因的检测。提取细胞基因组 PCR 扩增后测序, 进行突变基因的检测。结果 分离的 FPTC 原代细胞呈梭形或不规则多角形贴壁生长; 细胞生长 6 个月, 转染 SV40T 组（标记为 FPTC-S）传代至 p26, FPTC 细胞传代至 p23, 转染 SV40T+hTERT 组（标记为 FPTC-ST）传代至p19, 细胞增殖能力较好; FPTC-S 与 FPTC-ST 细胞均能够在基因水平稳定表达 TPO、 TG 与 TSHR; 患者外周血中存在 MLH1 R217C 胚系突变; 原代细胞存在 BRAF V600E 突变; 原代细胞及永生化的细胞系中均存在 MLH1 R217 基因突变。结论 本研究初步建立了 FPTC 永生化细胞系, 且该细胞系中存在 MLH1 R217C 及 BRAF V600E 突变, 该细胞系将为研究以上突变及其相互作用关系提供研究模型。     

膝关节胫侧副韧带Ⅲ度损伤并发异位骨化的临床研究

目的：：本研究旨在探讨膝关节胫侧副韧带Ⅲ度损伤后异位骨化并发症发病率;患者年龄、ISS评分与异位骨化严重程度相关性;异位骨化分度与患者膝关节功能及疼痛评分的相关性。方法：选取2012年12月至2014年12月连续病例140例胫侧副韧带Ⅲ度损伤患者进行回顾性分析。结果：共随访126例胫侧副韧带Ⅲ度损伤患者,其中男性101例、女性25例。非骨化组与各度异位骨化组比较, ISS评分( P 值<0.05)存在显著差异。非骨化组与各度异位骨化组比较伤后6周VAS评分结果( P 值<0.05),存在著差异;Ⅲ度异位骨化组与其它各组伤后6个月VAS评分相互比较结果(P<0.05),有统计学意义。Ⅲ度异位骨化组与其他各组比较伤后6个月Lysholm、膝关节屈曲角度评分,结果(P<0.05),有统计学意义。结论：ⅠⅡ度异位骨化影响患者膝关节早期疼痛症状,但对伤后6个月以上后期功能无影响;Ⅲ度以上异位骨化影响患者膝关节功能及疼痛;ISS评分大于12分患者,Ⅲ度以上异位骨化发生率明显增高。     

联合检测NT-proBNP肌酐血红蛋白对慢性心力衰竭患者预后的预测价值

目的:分析NT-proBNP、肌酐、血红蛋白对慢性心力衰竭患者预后的预测价值。方法:回顾性分析我院收治的2020年3月至2021年3月220例CHF患者的临床资料，随访1年，根据患者预后是否并发不良事件，将其分为预后良好组(n=141)和预后不良组(n=79)。比较两组患者的NT-proBNP、肌酐、血红蛋白水平，并通过多因素Logistic回归法对CHF患者预后的危险因素进行分析，采用Pearson法分析病例组血清NT-proBNP、肌酐、血红蛋白与左室射血分数(LVEF)、左心室舒张末内径(LVEDD)的相关性，受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)评价NT-proBNP、肌酐、血红蛋白对预测CHF预后的价值。结果:NT-proBNP、肌酐水平预后不良组高于预后良好组(P<0.05),血红蛋白水平预后不良组低于预后良好组(P<0.05);多因素逐步二元Logistic回归分析显示，患者的NT-proBNP、肌酐、血红蛋白水平是影响CHF预后的独立危险因素(P<0.05);Pearson相关分析结果显示，CHF患者NT-proBNP、肌酐、血红蛋白与LEVF、...