免疫治疗对支气管哮喘小鼠树突细胞共刺激分子的影响

目的应用卵白蛋白(OVA)建立特异性免疫治疗小鼠模型,探讨特异性免疫治疗对支气管哮喘(简称哮喘)小鼠树突细胞(DC)表面分子CD80、CD86表达的影响。方法120只BALB/c小鼠按随机数字表法分为哮喘模型组(A组)40只:用0.1%OVA 10μg连续腹腔注射(共70μg)及1%OVA雾化吸入(共300 mg);免疫治疗模型组(B组)40只:用与A组同剂量的OVA致敏和激发,同时连续尾根部皮下注射OVA 1 mg;对照组(C组)40只:以磷酸盐缓冲液代替OVA,其余同A组。留取各组肺组织切片,经苏木精-伊红(HE)染色观察炎症反应;用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清OVA特异性免疫球蛋白IgE(sIgE)及脾脏T淋巴细胞中白细胞介素2(IL-2)和IL-4的分泌。分离各组小鼠脾脏DC,用流式细胞仪检测其表面CD80、CD86分子表达。分离正常小鼠脾脏T淋巴细胞,与上述各组DC共培养;用ELISA法检测T淋巴细胞IL-4、IL-5的分泌量;用3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法检测其增殖反应。结果(1)B组小鼠肺组织中支气管及血管周围以大量淋巴细胞和嗜酸粒细胞为主的炎性细胞浸润明显轻于A组,但并未完全消失;A组血清sIgE吸光度(A)值为712±129,B组为124±59,C组为20±13,A、C组间比较差异有统计学意义(P<0.05),B、C组比较差异无统计学意义(P>0.05)。B组T淋巴细胞分泌IL-2、IL-4水平分别为(8±3)、(8.4±4.3)pg/m l,A组分别为(22±8)、(32.4±12.1)pg/m l,C组分别为(6±4)、(5.1±1.1)pg/m l,A、B两组比较差异有统计学意义(P<0.05),B、C组间比较差异无统计学意义(P>0.05);(2)B组DC表面CD86、CD80阳性表达率分别为58.23%、95.63%,A组分别为77.59%、96.98%,C组分别为77.37%、77.84%;(3)与B组DC共培养的正常小鼠T淋巴细胞体外经OVA刺激后,IL-4、IL-5水平分别为(10.8±2.3)、(18.8±3.8)pg/m l,A组分别为(17.3±4.7)、(35.7±7.9)pg/m l,C组分别为(5.7±2.7)、(11.0±2.2)pg/m l,A、B两组比较差异有统计学意义(P<0.05),B、C组间比较差异无统计学意义(P>0.05);B组DC与正常小鼠T淋巴细胞共培养时,刺激指数(SI)为3.8±0.7,A组为11.5±3.2,C组为5.8±1.5,A、B组间比较差异有统计学意义(P<0.05);B、C组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论建立了OVA特异性免疫治疗小鼠模型;DC表面CD86分子表达的下调可能是OVA特异性免疫治疗诱导T淋巴细胞功能丧失的机制之一。     

大剂量过敏原诱导哮喘小鼠T细胞不反应性及机制研究

目的 探讨大剂量过敏原诱导哮喘小鼠T细胞不反应性及其机制.方法 采用不同浓度的过敏原在体外处理哮喘小鼠DC及T细胞,ELISA法检测DC分泌IL-10和TGF-β1以及T细胞Th1/Th2细胞因子的分泌,并分析其相关性.结果 ①在0～10 mg/mL范围内,哮喘小鼠DC分泌IL-10、TGF-β1水平随处理浓度增高而增高,正常小鼠DC各浓度处理组之间无显著差异.②在0～1 mg/mL范围内,Th2细胞因子的分泌随处理浓度增高而增高,但在10 mg/mL的OVA作用的下,IL-4、IL-5等细胞因子的分泌水平则较其他组明显降低(P＜0.05).IL-2和IFN-γ的分泌也受到明显抑制(P＜0.05).而对正常小鼠T细胞,OVA质量浓度的变化对其Th1/Th2细胞因子的分泌无影响.③Th1/Th2细胞因子水平与DC分泌的IL-10和TGF-β1水平无明显相关性.结论 大剂量过敏原(10 mg/mL的OVA)可诱导哮喘小鼠T细胞不反应性,但与DC分泌IL-10和TGF-β1水平无明显关系.     

早期无创正压机械通气治疗慢性阻塞性肺病合并呼吸衰竭的随机对照试验

目的探讨无创正压机械通气(non-invasive positive pressure ventilation,NIPPV)用于治疗慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)急性加重合并呼吸衰竭的作用.方法选择40例COPD急性加重合并呼吸衰竭的患者,随机分为NIPPV组(NIPPV 常规综合治疗)和对照组(常规综合治疗).观察动脉血气结果、呼吸频率、心率、血压、呼吸困难分级、辅助呼吸肌动用评分、插管率、病死率、住院时间、住院费用.结果NIPPV组与对照组治疗后2、72 h比较PaO2的差异具有非常显著性意义(P＜O.01),PaCO2差异无显著性意义(P＞0.05).NIPPV组通气2 h后心率、呼吸频率、呼吸困难分级、辅助呼吸肌动用评分即较对照组显著降低.NIPPV组较对照组理论住院时间显著缩短(P＜0.01).理论住院费用无显著增加(P＞0.05).结论NIPPV与常规综合治疗比较可以迅速改善缺氧,缓解呼吸困难,改善呼吸肌疲劳,缩短理论住院时间,但对二氧化碳潴留的改善并无显著优越性.     

慢性鼻炎/鼻窦炎相关性咳嗽和胃食管反流性咳嗽临床特征比较

目的通过比较慢性鼻炎/鼻窦炎相关性咳嗽和胃食管反流性慢性咳嗽患者临床特征的差异,为两种慢性咳嗽的病因诊断提供帮助。方法纳入2009年12月至2010年12月在重庆市新桥医院就诊的慢性咳嗽患者。记录患者病史、症状和体征。对伴慢性鼻炎/鼻窦炎、无胃食管反流症状的患者拟诊为上气道咳嗽综合征（UACS）,给予氯苯那敏、减充血剂、鼻喷激素治疗1周;对有胃病史或伴胃食管反流症状的患者临床拟诊为胃食管反流性咳嗽（GERC）,给予埃索美拉唑40 mg bid,联合胃动力药治疗2周。对以上针对性治疗后随访时咳嗽有明显缓解的患者,临床诊断为UACS或GERC。结果共114例入选本研究,拟诊GERC 47例,针对性治疗后确诊32例;拟诊UACS 67例,针对性治疗后确诊UACS 43例。确诊UACS与GERC的患者在年龄、病程、咳嗽严重程度、夜间咳嗽比例、有清喉症状比例、鹅卵石征比例上均无显著差异（P〉0.05）。GERC以女性患者多见（22/32）,而UACS则以男性多见（26/43）（P〈0.05）。UACS患者咳痰的比例显著高于GERC患者（P〈0.05）。有咽部症状和体征的GERC患者（78.1%）比例显著低于UACS患者（97.7%）（P〈0.05）。声嘶和喉痛症状仅见于GERC患者,鼻后滴漏症状仅见于UACS患者。结论 GERC患者的咽喉部症状和体征与UACS患者有不同的特点。结合患者病史、咳嗽特点及并发的咽喉症状、体征综合判断,可以给临床诊断提供重要参考。     

舌下变应原特异性免疫治疗

变应原特异性免疫治疗（SIT）是目前已知的唯一能改变变态反应性疾病患者对变应原免疫的类型，并有可能治愈变态反应性疾病的方法。通常是通过反复多次皮下注射，即皮下免疫治疗（SCIT），诱导患者对变应原的耐受，但因其不良反应较大，并有可能引起过敏性休克等原因而使其应用受到限制。近来通过舌下含服的方法进行免疫治疗，即舌下免疫治疗（SLIT），引起了临床上广泛的兴趣。[第一段]     

银杏苦内酯对过敏性豚鼠气道内低密度嗜酸性粒细胞增多的调制作用

用卵蛋白吸入诱导豚鼠哮喘动物模型（哮喘组），然后，进行支气管肺泡灌洗，分析支气管肺泡灌洗细胞学改变。哮喘组支气管肺泡灌洗液中的细胞总数、嗜酸性粒细胞绝对计数及低密度嗜酸性粒细胞比例均显著高于正常对照组（Ｐ＜０．０５、Ｐ＜０．０１）。哮喘动物模型在吸入抗原激发之前，用血小板活化因子特异性拮抗剂银杏苦内酯（ＢＮ５２０２１）预处理后，支气管肺泡灌洗液中细胞总数、分类和嗜酸性粒细胞数量均与哮喘组差异无显著性。但低密度嗜酸性粒细胞比例却显著降低（Ｐ＜０．０５）。用地塞米松预处理动物模型（激素组）后，支气管肺泡灌洗液中的细胞总数、嗜酸性粒细胞数、细胞分类及低密度嗜酸性粒细胞比例均降至正常对照组水平。结果表明：银杏苦内酯能显著减少哮喘动物气道内“活化”状态的低密度嗜酸性粒细胞，可能是一种有用的哮喘抗炎药物。