吲哚胺2,3-双加氧酶基因转染未成熟树突细胞对卵蛋白致敏小鼠模型CD4+T细胞的影响

目的以pEGFP-N1-IDO真核表达载体转染未成熟树突细胞,观察吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)基因对CD4 T细胞的影响。方法体外扩增小鼠骨髓来源的未成熟树突细胞,采用光镜、扫描电镜、透射电镜、流式细胞技术鉴定后,采用DOTAP脂质体转染法进行转染,倒置荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达。同时建立卵蛋白致敏小鼠模型,分离并纯化脾脏CD4 T细胞,用3H-TdR掺入法进行混合淋巴细胞反应实验,观察IDO转染未成熟树突细胞对卵蛋白致敏小鼠模型脾脏CD4 T细胞增殖的影响,并用TUNEL法检测CD4 T细胞凋亡情况。结果IDO基因转染未成熟树突细胞能抑制卵蛋白致敏小鼠模型CD4 T细胞增殖,pEG-FP-N1-IDO质粒转染组CD4 T细胞减少,与pEGFP-N1空质粒转染组和对照组比较差异显著(P<0.05);IDO基因转染未成熟树突细胞可诱导CD4 T细胞凋亡,pEGFP-N1-IDO质粒转染组CD4 T细胞凋亡率为15.3%±2.6%,明显高于对照组和pEGFP-N1空质粒转染组和对照组(P<0.01)。结论IDO基因表达的上调可能是诱导哮喘免疫耐受的机制之一。     

白细胞介素—5在嗜酸性粒细胞生成和组织分布中的作用

本文简要介绍了白细胞介素－５（ＩＬ－５）的分子结构和受体结构及功能，特别是ＩＬ－５在诱导嗜酸性粒细胞（Ｅｏｓ）生成；增多以及Ｅｏｓ在组织定位分布中的作用；认为ＩＬ－５在上述过程中起关键作用。     

无症状哮喘患者舒张试验评定标准有关指标的探讨

目的:探讨沙丁胺醇对无症状支气管哮喘患者舒张试验评定标准的有关指标.方法:对无症状哮喘患者雾化吸入沙丁胺醇200 μg,10～20 min前后进行各项肺功能测试,按FEV1>15%基础值,最大用力呼气流量曲线FEF各项值>20%基础值为阳性标准.结果:按肺功能分级严重程度,其阳性率:轻度组FEV1仅为8.8%,中度组FEV1为31.6%,FEF25%～75%为42.1%,而在Vmax50与Vmax25则分别为52.6%;只有在重度组FEV1为51.6%,FEF25%～75%、Vmax50、Vmax25分别为64.5%、64.5%和58.1%.结论:如仅以FEV1>基础值15%为阳性诊断标准,将有较多经临床诊断为哮喘的患者达不到此标准,特别对轻度和中度无症状哮喘患者应综合考虑FEF25%～75%、Vmax50、Vmax25等指标的变化,以对本试验的评价更为客观.     

快速皮肤扩张的实验研究和临床应用

我们以狗为模型，利用常规和特殊染色技术，在光镜和电镜下对快速扩张后狗的进行观察，并作定量分析。结果发现扩张后的皮皮层明显增厚，真皮层中的胶原纤维和绊性纤维含量均下降。电镜下可见表皮细胞间隙增宽，真皮中成纤维细胞增多，且功能活跃。同时，我们将快速皮肤术应用于临床，取得了满意的效果。     

白细胞介素-5在嗜酸性粒细胞生成和组织分布中的作用

本文简要介绍了白细胞介素-5(IL-5)的分子结构和受体结构及功能,特别是IL-5在诱导嗜酸性粒细胞(Eos)生成、增多以及Eos在组织定位分布中的作用;认为IL-5在上述过程中起关键作用。     

小鼠IDO真核表达载体的构建及其在未成熟树突状细胞中的表达

目的 构建小鼠pEGFP-N1-IDO真核表达载体并观察其在未成熟树突状细胞中的表达.方法 利用RT-PCR方法扩增小鼠IDO基因全长,利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pEGFP-N1.经酶切和测序鉴定后, 用DOTAP脂质体转染法转染未成熟树突状细胞.通过G418筛选, 用倒置荧光显微镜观察转染的未成熟树突状细胞绿色荧光蛋白的表达,用RT-PCR、Western blot检测IDO的表达.结果 小鼠全长IDO基因序列正确插入pEGFP-N1载体,与GenBank中报道的序列一致,成功构建了pEGFP-N1-IDO真核表达载体,并转染未成熟树突状细胞,成功地表达目的基因.结论 真核表达载体成功构建和转染未成熟树突状细胞,并证明能有效表达于未成熟树突状细胞中 .     

致敏小鼠树突状细胞和T细胞Notch配体/受体的表达及大剂量过敏原的影响

目的探讨致敏小鼠Notch信号表达缺陷及大剂量过敏原对其影响。方法RT-PCR法分别检测致敏及正常小鼠树突状细胞Notch配体及T细胞Notch受体的mRNA表达情况,并观察大剂量过敏原作用对其表达的影响。结果（1）致敏小鼠树突状细胞Notch配体Jagged1,Jagged2和Delta1的mRNA表达均显著低于正常小鼠,致敏小鼠T细胞Notch1和Notch3的mRNA表达也显著低于正常小鼠（P〈0.05）。（2）10mg/ml的OVA作用下,Jagged1和Notch3的mRNA表达水平较对照组显著升高（P〈0.05）。结论致敏小鼠Notch信号表达缺陷,大剂量过敏原（10mg/ml的OVA）可上调Jagged1和Notch3表达。     

"难治性哮喘"的特点及机制

通过吸入激素(ICS)和吸入β2受体激动剂治疗后,大多数哮喘患者能达到有效控制,但是仍有少数患者通过充分的哮喘治疗包括使用全身性激素治疗后仍不能有效控制,临床上通常称为"难治性哮喘"(Difficult asthma).这部分患者需要经常急诊就诊和住院治疗,是导致哮喘治疗费用增加的主要原因.现将就难治性哮喘的特点及机制进行综述.     

对目前SARS诊断标准的一些看法

严重急性呼吸综合征 (SARS)作为一种新的传染病在短短 6个月内蔓延至全球 30多国家和地区、国内 2 0多个省市 ,给人民群众的健康和生命带来了极大的威胁和危害。虽然 ,SARS的病原已经确定为“SARS冠状病毒”—一种冠状病毒的变异体。而且 ,已有数种检测SARS冠状病毒的方法问世 ,但离在临床的普遍应用 ,帮助诊断仍有一定的距离。目前的诊断仍只是一种“临床诊断”。我国卫生部发布的SARS的诊断试行标准 (表 1)已经修改了数次 ,反映了对SARS的认识在不断深入 ,诊断在不断的完善。由于SARS的“问世”较短 ,对它尚没有诊断的“金标…     

氨茶碱对体外不同密度嗜酸细胞凋亡和白介素5受体αmRNA表达的影响

目的观察氨茶碱(抗哮喘药)对哮喘豚鼠体外不同密度嗜酸细胞 (Eos)凋亡及白介素5受体α(IL-5Rα)mRNA表达的影响。方法制备卵蛋白激发哮喘豚鼠动物模型,48 h后,行支气管肺泡灌洗,分离低密度及正常密度Eos(HEos,NEos),HEos及NEos分别与(1×10-6-1×10-3mol· L-1)氨茶碱共培养24 h;以原位杂交方法检测不同Eos的IL-5Rα mRNA表达,在3’末端脱氧核苷转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷缺口末端,标记法检测细胞凋亡。结果氨茶碱干预24 h后,可见Eos细胞凋亡增加,不同密度 Eos IL-5Rα mRNA表达也增加,且与氨茶碱浓度呈剂量依赖关系,IL-5Rα表达与Eos凋亡呈正相关(P<0．05)。结论氨茶碱可促进不同密度Eos表达IL-5Rα,抑制其细胞因子活动,促进Eos凋亡。