氟对大鼠肝组织caspase-3和caspase-9mRNA表达的影响

目的研究氟中毒大鼠肝组织中caspase-3、caspase-9 mRNA表达的变化。方法将48只健康清洁级SD雄性大鼠随机分为4组,分别为对照(去离子水)组和低(50 mg/L)、中(100 mg/L)、高剂量(200 mg/L)氟染毒组,每组12只。采用自由饮水方式进行染毒,连续染毒120 d。采用荧光定量PCR法检测肝组织中caspase-3、caspase-9 mRNA的表达水平。结果与对照组相比,高剂量氟染毒组caspase-3、caspase-9 mRNA的表达水平明显升高,差异均有统计学意义(P0.05)。结论过量氟从基因水平促进大鼠肝脏组织中caspase-9、caspase-3的表达。     

体外局部微环境下小鼠胚胎干细胞向神经前体细胞的定向诱导分化***★

背景：周围微环境能够调节胚胎干细胞在体外的诱导分化情况，可能与多种信号通路及细胞因子作用有关。 目的：观察局部微环境对体外培养的小鼠胚胎干细胞向神经前体细胞定向诱导分化的影响。 设计、时间及地点：细胞学体外观察，于2005-10/2006-04在上海第二医科大学发育生物学研究中心实验室完成。 材料：清洁级孕13.5 d的C57BL/6昆明鼠6只，由中科院上海实验动物中心提供。携带LacZ标记基因的小鼠胚胎干细胞株S8由上海市发育生物学研究中心提供。 方法：取孕鼠胚胎，采用组织块消化法制备小鼠胚胎成纤维细胞，经丝裂霉素C处理得到滋养层细胞。将携带LacZ标记基因的小鼠胚胎干细胞株S8解冻复苏，加入含白血病抑制因子的高糖DMEM培养基体外扩增培养，将细胞克隆吹打成单细胞悬液，加到滋养层细胞上，在37 ℃、体积分数为0.05的CO2培养箱中培养。胚胎干细胞传代后，再加入含全反式维甲酸的高糖DMEM培养基，以单纯加入高糖DMEM培养基作为空白对照，调整细胞浓度为3×108 L-1，吹打法悬浮培养48 h，收集悬浮液，反复离心去上清，移入铺有明胶的培养皿中，培养9 d。 主要观察指标：诱导前后细胞形态及生长状态变化，RT-PCR检测诱导后细胞向神经前体细胞的分化情况。 结果：胚胎干细胞在含有白血病抑制因子的高糖DMEM培养基中能够保持未分化状态，克隆生长良好；换用含全反式维甲酸的高糖DMEM培养基悬浮培养后，4.0~5.0 h聚集成团，形成圆球状的类胚体。加入全反式维甲酸的诱导组内胚层细胞呈多边形且数量较多，对照组内胚层细胞呈长梭形且数量少。诱导后细胞表达神经干细胞特异性标志巢蛋白，神经细胞特异性标志微管相关蛋白2呈弱表达，不表达神经胶质细胞特异性标志胶质纤维酸性蛋白。 结论：体外培养的小鼠胚胎干细胞可保持未分化状态，具有不断增殖的能力，经白血病抑制因子与全反式维甲酸两步诱导后可分化为神经前体细胞。     

中医治疗高血压的初步临床观察

高血压是我们在临床上常见的一种疾病。一般具有头晕、头痛、头胀、烦躁、失眠、眼花、心悸、胸闷、半身麻木不仁等症状。据历代中医文献记载,如素问标本病传论:“肝病头目眩”。至真要大论:“诸风掉眩,皆属于肝,巢氏诸病源候论:“肝气胜为血有余,则病目赤善怒,逆则头晕、耳聋不聪”。近人朱颜认为在祖国医学文献中,类似高血压的记载有内中风、肝风、肝阳、肝火、肝厥等名称。中医把上述症状的发生,责之于“肝”,认为肝体阴而用阳,肝阳上逆,风火相扰,其实与肾阴不足有关。这与苏联医学家指出的:高血压病的发生,是由于外界的不良刺激(如长久或反复的精神过度紧张与疲劳,或强烈的情绪激动)引起高级神经活动障碍,使血管发生痉挛,阻力增加,血压上升,或因肾     

胚胎干细胞来源神经前体细胞在缺氧缺血性脑损伤海马内的分化

目的研究胚胎干细胞(ESC)来源的神经前体细胞移植入缺氧缺血性脑损伤(HIBD)脑内后,在海马的迁移和分化.方法小鼠ESC体外培养和诱导分化,制作小鼠HIBD模型.术后第2～3天,将细胞植入损伤侧侧脑室.对脑组织进行病理学、聚合酶链反应(PCR)、X-gal和免疫荧光组化染色等检测.结果小鼠ESC在特定条件下,能成功诱导分化为神经前体细胞.细胞移植后,经PCR检测和X-gal染色发现能长期存在于脑内,并迁移、分布于受损海马,构成海马结构,经进一步免疫荧光检测发现可分化为神经元;同时病理学检测亦发现细胞移植后受损海马内的神经细胞数量明显增加.结论体外经过特定的诱导分化后,ESC被定向诱导分化为神经前体细胞,植入HIBD小鼠脑内后,能迁移至损伤海马,分化为神经元,替代损伤或坏死的神经细胞,是其发挥治疗作用的可能机制之一.     

有关低温合并半身体外循环的动物实验

自1959年初,我们曾多次作过圣身体外循环的动物实验,并在临床上应用于心內直视手。1959年底在全国心血管会议上的关于采用低温合并人工心肺进行心脑灌注施行直视心脏手术的动物实验报告,启发我们采用两种人工心肺机进行低温合并半身体外循环的动物实验。人工心肺机的改裝动物实验是用两种人工心肺机进行的,由于体外循环之流量基小,因而对两种心肺机都适当地改装,一、Jongbloed 氏人工心肺机的改装:Jongbloed氏人工心肺机的构造已详细报导,在低温合并半身体外循环动物实验中进行了改装;1.动静脉路联接     

中医治疗高血压病的初步临床观察

高血压病是我们临床常见的一种疾病,虽然在祖国医学文献中并没有高血压病这个名词,但其所具有的症状,如头晕、头痛、烦燥、失眠、眼花、心悸、胸闷、半身麻木不仁等,则散见于历代医籍文献中,如素问标本病传论云:“肝病头目眩”,至真要大论云:“诸风掉眩皆属于肝”,巢氏诸病源候论云:“肝气胜为血有余则病,目赤善怒,逆则头晕耳聋不     

血吸虫病某些临床动向

一、食道静脉瘤的硬化疗法血吸虫病肝硬化门脉高压症引起的食道静脉瘤出血紧急手术死亡率极高,现多不主张施行。保守疗法对出血急救处理,如安静、卧床、绝食、吸氧、输血、止血剂等一般方法,改善全身状态;同时,应用脑下垂体后叶素20u+5％葡萄糖溶液200ml 20分静脉点滴,四小时后再反复,但疗效短暂;大量出血病例先用三腔管压迫止血法对急救止血有一时效果,但病人不易接受,而且压迫时间长易发生食道胃底粘膜糜烂,坏死,拔管后再出血率高。这些急救处理约有一半病例可得到一时的止血效果,以安全、操作简便和易于普及可作为最初试用治疗方法。近年来由于内窥镜技术操作的开展,食道静脉瘤内窥镜的硬化疗法(injective scl-erotherapy)逐渐施行。本疗法的文献最初     

1993～2002年临床生化室间质量评价的结果分析

分析参加江苏省临床生化室间质量评价的结果，制作了10年各项的VIS值表。根据VIS值分析产生误差的原因，从中观察临床生化检验质量的动态变化，根据EQA的成绩反馈，将国产室内质控猪血清改为进口多项非定值人血清后，EQA成绩明显好转。生化测定项目全部上全自动生化分析仪分析。结果稳定，易于控制误差。参加室间质量评价活动对提高检验科质量管理水平有重大作用。     

青果多糖提取物对人胃癌5-FU耐药细胞的逆转作用

目的：建立胃癌5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil,5-FU）耐药细胞BGC823/5-FU,探讨青果多糖提取物对BGC823/5-FU的逆转作用及机制。方法：采用逐步递增5-FU浓度、体外间歇诱导法诱导胃癌BGC823细胞,建立胃癌5-FU耐药细胞BGC823/5-FU;CCK-8试剂盒（Cell Counting Kit-8）检测青果多糖提取物对BGC823/5-FU细胞增殖的抑制作用;不同药物处理BGC823/5-FU细胞后,qRT-PCR分析对谷胱甘肽S-转移酶π（GST-π）和多药耐药基因MDR1 mRNA的表达,Western blot检测GST-π和P糖蛋白（P-gp,由MDR1基因所表达）的表达。结果：历时5个月建立BGC823/5-FU,对5-FU耐药性稳定,耐药指数为6.28,对顺铂、长春新碱和阿霉素也有不同程度的交叉耐药性;青果多糖提取物对BGC823/5-FU的5-FU耐药性有逆转作用,逆转倍数达到3.11倍;与BGC823/5-FU细胞对照组比较,5-FU处理组对GST-π和MDR1的mRNA表达及GST-π和P-gp的蛋白表达无明显影响,但青果多糖提取物组及青果多糖提取物+5-FU组GST-π和MDR1 mRNA及GST-π和P-gp的表达明显降低（P<0.05或P<0.01）。结论：青果多糖提取物对BGC823/5-FU有逆转作用,其机制可能与降低耐药基因GST-π和MDR1 mRNA及GST-π和P-gp的表达有关。     

来源于胚胎干细胞的神经前体细胞移植修复脊髓损伤

背景:在一定条件下,胚胎干细胞可诱导分化成为神经前体细胞,当移植到健全或损伤的中枢神经系统后,可以与宿主细胞有效整合,修复重建损伤的神经组织。目的:观察胚胎干细胞诱导的神经前体细胞移植对小鼠脊髓损伤神经功能恢复的影响。设计:随机对照动物实验。单位:上海第二医科大学发育生物学研究中心。材料:选用28只6～8周龄C57/BL6J小鼠,雌雄不限。小鼠胚胎干细胞株S8及携带LacZ标记基因由上海市发育生物学研究中心提供。高糖DMEM、2-巯基乙醇、小鼠白血病抑制因子、丝裂霉素C均来自GIBCO贴壁诱导培养液由上海市发育生物学研究中心提供。方法:实验于2003-04/2004-04在上海第二医科大学发育生物学研究中心实验室完成。采用贴壁诱导法将ES细胞培养诱导分化为神经前体细胞,将小鼠麻醉,在T9～10椎骨平面制成脊髓半横断模型,随机摸球法将大鼠分为3组,假手术组(n=9):仅剪除T9-10棘突和椎板后,逐层缝合。干细胞移植组(n=10):脊髓半横断后,行距损伤区域以远约1cm的椎管内注射细胞。模型组(n=9):脊髓半横断后在损伤邻近区注射DMEM。各组分别于实验后第1,2,4,6,8周采用BBB评分观察各组小鼠神经功能恢复情况,实验后第8周(BBB评分后)利用x-gal染色观察各组脊髓损伤区胚胎干细胞存活和分化情况。X-gal染色干细胞移植组阳性的损伤脊髓部位切片进行荧光免疫组化检测。主要观察指标:①各组小鼠神经功能恢复情况。②各组脊髓损伤区胚胎干细胞存活和分化情况。③荧光免疫组化检测结果。结果:①干细胞移植组第1,2,4周BBB得分,高于模型组(P<0.01)。②脊髓损伤区胚胎干细胞存活和分化情况:干细胞移植组中小鼠的脊髓损伤处组织切片可以发现x-gal染色阳性的细胞,胞浆呈现蓝色,即胚胎干细胞来源的衍生细胞,而假手术组和模型组的脊髓均未见该现象。干细胞移植组损伤脊髓部位植入的胚胎干细胞来源的衍生细胞分布损伤区周围并与周围组织整合,与周边细胞在形态上类似。③干细胞移植组损伤脊髓部位,X-gal染色阳性细胞可表达神经元特异性标志NF,但没有表达GFAP标志。结论:将ES细胞的培养诱导分化为神经前体细胞移植后,能够存活、迁移、并分化为神经元,但改善神经功能情况不明显。