慢性乙型肝炎基因治疗策略研究进展

慢性乙型肝炎是由乙型肝炎病毒（Hepatitis Bvims，GNV）感染引起的、病死率较高的一种慢性传染性疾病，易发展为肝硬化、肝癌。据资料显示，全球约有3．5亿慢性乙肝患者，我国是慢性乙肝高发区，约有1．3亿患者。目前，基因治疗作为一种全新的治疗理念越来越受到人们的关注。基因治疗是指将外源性的有特定功能的目的基因（DNA或RNA片段），     

阳离子脂质体介导双靶区反义锁核酸抗病毒疗效研究

目的 探讨HBV S、C双靶区反义锁核酸(LNA)的抗病毒疗效.方法 设计合成互补于HBV S、C基因翻译起始区的反义LNA与脂质体混合,经尾静脉注入小鼠体内,用时间分辨免疫荧光分析法定量检测小鼠血清HBsAg;荧光PCR定量检测血清HBV DNA含量;RT-PCR检测肝组织HBV C-mRNA的表达;免疫组化法检测肝细胞HBsAg、HBcAg的表达;自动生化分析仪检测血清白蛋白(Alb)、ALT、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)等指标;小鼠肝脏、肾脏进行常规病理切片并HE染色,观察反义LNA对小鼠脏器的影响.结果 血清HBsAg的表达,注射后第1、3、5天,单靶区S组的抑制率分别为23.3%、37.9%和48.7%;单靶区C组分别为21.2%、32.6%和40.7%;双靶区SC组分别为30.6%、61.2%和72.8%.血清HBV DNA,注射后第1天开始下降,双靶区SC组的DNA下降最明显,其第1、3、5天分别下降了18.5%、36.1%和52.9%.5 d后,单靶区S组、单靶区C组和双靶区SC组小鼠肝细胞HBsAg、HBcAg的表达显著低于对照组.小鼠肝肾功能及组织学未见异常.结论 HBV S、C双靶区反义LNA对HBV转基因鼠抗病毒有显著作用,且抑制作用优于单靶区反义LNA.     

低深度高通量全基因组拷贝数变异测序在487例颈项透明层增厚胎儿染色体分析中的应用

目的:应用低深度高通量全基因组拷贝数变异测序（copy number variation sequencing,CNV-seq）技术分析颈项透明层（nuchal translucency,NT）增厚胎儿的遗传学病因,初步探讨胎儿NT增厚与染色体异常的关系。方法:回顾性收集2018年1月至2020年12月在郑州大学第一附...     

反义锁核酸与拉米夫定在HepG2.2.15细胞中抗HBV作用的比较

目的:应用反义锁核酸与拉米夫定作用HepG2.2.15细胞,对他们抗乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)效果进行比较.方法:设计针对HBV翻译起始区S基因mRNA的反义寡核苷酸,并进行锁核酸修饰,以阳离子脂质体介导反义锁核酸转染HepG2.2.15细胞;拉米夫定组直接作用HepG2.2.15细胞;分别于用药后第2、4、6、8、10天收集细胞培养上清液.用ELISA法和FQ-PCR法检测收集上清液HBsAg、HBeAg和HBVDNA的含量.MTT法分别检测反义锁核酸与拉米夫定对细胞存活率的影响.结果:拉米夫定对HBVDNA具有明显抑制作用,最高可达46.52%,但对HBsAg、HBeAg影响较小;反义锁核酸对HBsAg、HBeAg及HBVDNA均有较强抑制作用,对HBsAg、HBeAg和HBVDNA的最高抑制率分别达67.69%、59.71%和62.96%(P<0.05),且抑制随时间呈增高趋势.反义锁核酸与拉米夫定对细胞代谢均无明显影响.结论:反义锁核酸抗HBV作用机制与拉米夫定不同,反义锁核酸抗HBV作用明显优于拉米夫定.     

反义锁核酸体外抗乙肝病毒的实验研究

目的探讨锁核苷酸(LNA)修饰的反义寡核苷酸抑制乙型肝炎病毒(HBV)表达的效果及其抗HBV作用的特点。方法针对HBV S基因同一靶位分别合成三段不同化学修饰的反义寡核苷酸:锁核酸修饰、未修饰和全硫代修饰,并以无关序列为对照直接作用于HepG22.2.15细胞,ELISA法动态检测细胞上清液中HBsAg含量;实时荧光定量PCR法(FQ-PCR)检测细胞上清中HBV DNA含量;MTT法监测细胞活性。结果针对HBV S基因的反义LNA能显著抑制HepG22.2.15细胞表达HBsAg(P<0.05)且第3天出现抑制高峰,抑制作用随时间延长逐渐减弱。反义锁核酸组对HBsAg及细胞内、细胞外HBV DNA均有较强抑制作用,最高抑制率分别为51.19%、56.73%、86.9%,与其他实验组相比差异有统计学意义(P<0.05),与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);LNA在20μmol/L浓度范围内对细胞代谢无影响。结论针对S基因的反义LNA体外能发挥高效、特异、低毒的抗HBV作用,为乙型肝炎的基因治疗注入了新的思路。     

子宫肌瘤行子宫动脉栓塞术后的护理

子宫肌瘤是妇科常见病、多发病,为子宫平滑肌的良性肿瘤,25—50岁妇女发病率较高,约为20％。子宫肌瘤较大者,常因经量过多,经期延长,压迫邻近组织而有不同的临床症状,如头晕、乏力,盆腔瘀血、小便不利等,治疗方法有子宫全切术、肌瘤剔除、激素治疗及子宫动脉栓塞术。经导管子宫动脉栓塞术具有创伤小,恢复快安全简便,     

乙型肝炎病毒S/C基因位点反义锁核酸在小鼠体内抗病毒疗效研究

目的 探讨针对HBV S/C双基因位点反义锁核酸对乙型肝炎转基因小鼠HBV复制和表达的影响.方法 将30只HBV转基因小鼠随机分为5组,每组6只.分别为5%葡萄糖液对照组、空脂质体对照组、单靶区S组,单靶区C组、双靶区SC组.反义锁核酸片段经尾静脉注入小鼠体内,采用时间分辨免疫荧光技术定量检测血清HBsAg;实时荧光聚合酶链反应定量检测血清HBV DNA含量;逆转录聚合酶链反应检测肝组织HBV C-mRNA的表达;免疫组织化学法检测肝细胞HBsAg、HBcAg的表达,自动牛物化学分析仪检测血清白蛋白、ALT、尿素氮、肌酐;小鼠肝,肾脏做常规病理切片,观察反义锁核酸对小鼠脏器的影响.应用SPSS12.0统计学软件分析.各组问比较采用重复测量方差分析的SNK检验和Kruskal Wallis H检验. 结果注射锁核酸后,对HBsAg的表达均显示有较强的抑制作用,单靶区S组,单靶区C组和双靶区SC组的平均抑制率分别为36.6%、31.5%和54.9%;对HBV DNA的复制也有抑制作用,平均抑制率分别为24.0%,21.1%和35.8%.注射后1、3、5 d,HBsAg的平均抑制率分别为14.4%、25.6%和31.3%;HBVDNA的平均抑制率分别为11.0%、19.2%和24.1%;血清中白蛋白、ALT、尿素氮、肌酐等指标,各组结果与对照组比较,差异均无统计学意义;小鼠肝细胞的HBsAg、HBcAg阳性细胞数均较对照组明显减少.小鼠肝,肾脏组织学表现未见异常. 结论 HBV S/C基因位点反义锁核酸对乙型肝炎病毒转基冈鼠HBV复制和表达有显著抑制作用,且双基因靶位优于单基因靶位.     

RBRVS结合KPI绩效考核体系在县级公立医院的应用

本文介绍了笔者所在医院根据总体目标,经过点值测算、指标选择,将以资源为基础的相对价值比率（RBRVS）与关键绩效指标法（KPI）相结合用于公立医院绩效考核的设计思路与实践。通过考核,医院医疗服务能力得以提升,医疗收入结构得到优化,科室人员成本管控意识得到强化。提示,RBRVS+KPI绩效考核体系将工作量与工作质量有效结合,更能体现医护人员的劳务价值,符合公立医院薪酬制度改革的要求。     

PBL教学法在生物化学检验理论教学中的应用

目的探讨PBL教学法在生物化学检验理论教学中的应用效果。方法从2005级检验医学专业本科学生中,随机选择两个班分成实验班和对照班,实验班采用PBL教学法授课,对照班采用传统灌输式教学法授课。学习结束时对两个班进行理论考试和问卷调查。结果实验班考试成绩明显优于对照班(P<0.01)。结论PBL教学法能有效激发学生的学习积极性,提高学生分析问题与解决问题的能力、自学能力、语言表达能力、创新性思维能力等,有利于综合素质的提高,值得推广。