不同类别抗瘤中药制剂逆转结直肠癌NK免疫功能抑制的比较研究

目的比较研究不同类型抗瘤中药制剂对结直肠癌所致NK免疫功能抑制的影响。方法分别制备三氧化二砷（As2O3）、川芎嗪（LHC）、黄芪（AMB）、氧化苦参碱（MOX）、猪苓多糖（PUPS）、蒿甲醚（ART）等6种中药制剂作用后的结直肠癌细胞Colon 26再培养上清,以不经中药制剂作用的相应上清为对照;MTT法检测不同中药制剂作用后再培养上清对小鼠脾细胞NK杀伤活性的影响,直接免疫荧光FCM法检测对小鼠脾细胞CD 3ε^-ζ^＋表达的影响。结果对NK杀伤抑制的下调,As2O3、PUPS及ART之间未见显著差异（均P〉0．05,下调49．65％±8．86％）,LHC及AMB之间未见显著差异（P〉0．05,下调78．15％±9．81％）;AMB的下调作用最强。对CD 3ε^-ζ^＋表达抑制的下调,LHC和PUPS的初始下调幅度未见差异（P〉0．05,下调88．04％±7．57％）,AMB和ART的初始下调幅度未见差异（P〉0．05,下调50．00％±8．24％）,MOX与其他中药制剂的作用之间均有差异（均P〈0．01,完全消除抑制并明显促进表达）;LHC的下调作用最强。结论逆转结直肠癌细胞产生的NK免疫功能抑制是中药制剂发挥抗瘤效应的机制之一。临床可考虑联合使用扶正祛邪类及活血化瘀类抗瘤药物组方,以调整患者不利于临床治疗的NK免疫抑制状态。     

不同IL-15基因转染对 NCI-H446肿瘤细胞增殖的影响

目的探讨不同形式IL-15基因转染对人小细胞肺癌细胞株NCI—H446细胞增殖的影响。方法用本室已构建的3种转染不同IL-15基因（原型、成熟肽及以IL-2信号肽替代IL-15信号肽的改型IL-15基因）的NCI．H446细胞模型：CIL-15、CIL-15mp和CIL-2sp-IL-15mp,以野生株NCI-H446细胞（CW）为对照,台盼蓝拒染计数法测定细胞生长曲线、MTT法检测细胞增殖、流式细胞术分析细胞周期的变化、RT-PCR法检测cyclin D1和cyclin E的表达。结果与CW相比,CIL-15、CIL-15mp和CIL-2sp-IL-15mp增殖速率依次减慢、G0／G1期细胞比例依次增加、S期细胞和细胞周期蛋白cyclin E表达依次减少、cyclin D1表达无变化。结论3种IL-15基因转染均有使NCI—H446细胞增殖明显减慢的作用,强度依次为改型〉成熟肽〉原型;这种作用与降低NCI-H446细胞cyclinE的表达有关（r=0．953,P〈0．05）,与cyclin D1的表达无关（r=0．155,P〉0．05）。     

经体外预处理人胎儿骨髓间充质干细胞的潜在自身成瘤性

目的评价经体外预处理、启动免疫保护功能的人胎儿骨髓间充质干细胞（hfBMSCs）的潜在自身成瘤性。方法采用流式细胞术检测细胞表型及细胞周期,染色体核型分析检测遗传稳定性,裸鼠皮下接种检测体内成瘤性。结果体外预处理的hfBMSCs呈正常间充质干细胞表型,可通过阻滞细胞周期于G0-G1期抑制hfBMSCs生长增殖（P〈0.05）,对染色体核型无影响,不具备体内成瘤性。结论经体外预处理的人胎儿骨髓间充质干细胞不具有自身成瘤性。     

不同IL-15转染对NCI-H446 HLA-Ⅰ和HLA-Ⅱ表达及NK敏感性的影响

目的探讨不同形式IL-15基因转染对人小细胞肺癌细胞株NCI-H446细胞HLA的Ⅰ类和Ⅱ类分子表达及NK杀伤敏感性的影响。方法在本室已构建的3种细胞模型（转染IL-15成熟肽基因的NCI-H446／IL-15mp细胞、转染原型IL-15基因的NCI-H446／IL-15细胞和转染以IL-2信号肽替代IL-15信号肽的改型IL-15基因的NCI-H446／IL-2sp-IL-15mp细胞）基础上,以野生株细胞为对照,流式细胞分析仪（Fluorescence-activated cell Sorter,FACS）分析这3种细胞HLA的Ⅰ类和Ⅱ类分子表达,四甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定它们对NK杀伤的敏感性。结果野生株NCI-446细胞表面阳性表达HLA的Ⅰ类和Ⅱ类分子;转染IL-15成熟肽基因或改型IL-15基因后,这两种分子的表达均被抑制为阴性;转染原型IL-15基因后,这两种分子的表达均被显著上调。5名不同健康志愿者的外周血单个核细胞（PBMC）对野生株NCI-H446细胞的平均NK杀伤率最低,对NCI-H446／IL-15、NCI-H446／IL-15mp和NCI-H446／IL-2sp-IL-15mp细胞的平均NK杀伤率依次升高。结论转染不同形式IL-15基因对NCI-H446细胞的免疫生物学特性影响不同。转染IL-15成熟肽基因或改型IL-15基因,抑制NCI-H446细胞表面HLA的Ⅰ类和Ⅱ类分子表达;转染原型IL-15基因,上调这两种分子的表达;转染不同形式IL-15基因均可增强NCI-H446细胞对NK杀伤的敏感性,但程度不同;以改型IL-15者最高,IL-15成熟肽者次之,原型IL-15者最低。     

抗肿瘤中药制剂逆转结直肠癌NK细胞免疫抑制的靶分子探讨

目的探讨抗瘤中药制剂逆转结直肠癌所致自然杀伤(NK)细胞免疫抑制的作用靶分子机制。方法分别制备三氧化二砷(As2O3)、川芎嗪(LHC)、黄芪(AMB)、氧化苦参碱(MOX)、猪苓多糖(PUPS)、青蒿琥酯(ART)6种中药制剂作用后的小鼠结直肠癌细胞Colon26再培养上清液,MTT法检测中药制剂对Colon26所致小鼠脾细胞NK杀伤抑制的影响,流式细胞仪直接免疫荧光法检测对小鼠脾细胞CD3ε-ζ+表达抑制的影响;ELISA测定上清液中转化生长因子(TGF)β1、血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素(IL)4、IL-6、IL-10和前列腺素(PG)E2含量;多元相关分析中药制剂逆转结直肠癌NK细胞免疫抑制的相应靶分子。结果 AMB对NK杀伤抑制的逆转作用最强;LHC对CD3ε-ζ+表达抑制的逆转作用最强。对NK杀伤抑制的逆转,As2O3、AMB、PUPS和ART的靶分子为TGF-β1,LHC的靶分子为TGF-β1和IL-10;对CD3ε-ζ+表达抑制的逆转,AMB和MOX的靶分子为IL-10。结论通过抑制免疫抑制分子分泌逆转肿瘤细胞产生的NK免疫抑制,应是中药制剂抗瘤效应机制之一。临床可考虑联合使用不同...     

中药黄芪抗肿瘤研究进展

通过系统查阅近年来的相关文献,对中药黄芪的抗肿瘤活性成分以及其抗肿瘤作用研究、作用机理探讨等进行了较为系统的归纳和综述,以期为该药物进一步的研究和开发提供参考.     

关于食管癌组织浸润淋巴细胞的研究——Ⅰ T淋巴细胞及其酯酶活性

本文研究了食管癌组织中浸润的淋巴细胞类型及酯酶染色反应。共取22例外科手术切除的食管癌标本,测定其中淋巴细胞的自然E玫瑰花成花率,结果E玫瑰花阳性细胞平均占总淋巴细胞的60％以上。酯酶染色结果显示81.5±10.9％酯酶阳性淋巴细胞形成E玫瑰花。但E玫瑰花阳性细胞中仅44.0±14.3％为酯酶阳性。说明酯酶阳性淋巴细胞绝大多数是T细胞,但癌组织中的T细胞仅部分为酯酶阳性,所以癌组织中的酯酶阳性细胞不能代表全部T淋巴细胞。     

DHPLC方法对中国人iNOS基因Tsp多态性的发现与初步证实

目的: 探讨中国人iNOS基因是否存在单核苷酸多态性及其在中国人中的频率.方法:DHPLC方法结合直接测序和PCR-RF LP技术,在有代表性的中国人中进行筛查.结果:在iNOS基因全部被测外显子中,有6 个外显子发现可疑双峰图型,可能存在杂合突变,对其测序后在iNOS基因第16外显子发现C→T突变 (称为Tsp多态性),使编码的氨基酸由丝氨酸 (serine,Ser)改变为亮氨酸 (leucine,Leu),设计PCR-RFLP方法并监测全部测序样本,PCR -RFLP与测序结果一致.在有代表性的43例中国人中,Ser和Leu等位基因频率分别为75.58% (65/86)和24.4 2% ( 21/86);三种基因型观察频率分别潍 Ser/Ser:62.79%; Ser/Leu:25.58%; Leu/Leu:1 1.63%, 与期望频率(分别为57.12%, 36.91%和5.96%)差异无显著性(P>0.05),说明符合H ardy -Weinberg遗传平衡定律.结论:中国人群中存在iNOS基因Ts p多态性,且频率较高.     

成人骨髓来源间充质干细胞对伴刀豆球蛋白A诱导小鼠免疫性肝损伤的影响

间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是一群来自中胚层的具有强大自我更新和分化潜能的成体干细胞,因其兼具可跨越个体及种属的免疫调节特性,而在组织再生及免疫损伤修复领域被视为重要的种子细胞[1].     

重症肌无力患者T细胞亚群和TNF—α检测及其临床意义

目的：探讨重症肌无力（myasthenia gravis,MG)患者外周血T细胞亚群和血清肿瘤坏死因子（TNF－α）含量与疾病关系。方法：MTT法检测血清TNF－α含量，SAP法检测外周血T细胞亚群。结果：MG组血清TNF－α含量明显高于正常人（对照组）（P＜0．01）；与对照组相比，MG组外周血CD3^ 细胞百分率无明显改变，CD4^ 细胞百分率显著性增高，CD8^ 细胞百分率显著降低。结论：MG患者外周血T细胞亚群中CD4^ 和CD^ 细胞数量有较显著变化，血清中TNF－α含量显著增高。