幼年成骨细胞体外培养传代衰老与70岁以上老年人成骨细胞的生物学特性比较

目的通过对幼年人成骨细胞（osteoblasts，OB）体外培养传代衰老与70岁以上老年人成骨细胞的生物学特性比较，观察培养代数与年龄的相关性，拟建立幼年人成骨细胞体外培养传代模拟衰老模型。方法选取≤5岁（2例，男1，女1）和≥70岁（14例，男5，女9）两个年龄组的股骨颈松质骨进行成骨细胞体外培养，幼年组细胞自第二代开始每5～10d传代一次，至第17代终止。培养期间观察第2，5，10，15代细胞的形态、增殖能力与碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）活性，以及应用RT-PCR方法检测BGP，IGF-1，OPG，ODF基因mRNA表达，并与体外培养的70岁以上老年人成骨细胞进行比较。结果形态观察提示成骨细胞体外连续传代至第10-15代时，其胞体增大、折光性降低，呈塌陷状，细胞器稀少、糖原增多、溶酶体增多，与70岁以上老年人成骨细胞相似。MTT相对比值随传代次数增加而降低，第10-15代细胞明显低于第2-5代细胞，而与70岁以上老年人成骨细胞相似；ALP活性于10-15代时增高，与70岁以上老年人成骨细胞相似。幼年成骨细胞骨钙素（bone gla-protein／osteocalcin，BGP）、胰岛素样生长因子-1（insulin-like growth factor-1，IGF-1）、破骨细胞分化抑制因子（osteoprotegerin，OPG）、破骨细胞分化因子（osteoclast differentiation factor，ODF）、OPG／ODFmRNA表达随传代次数增加呈降低趋势，第10与15代细胞其表达量低于第2代细胞，也低于70岁以上老年人成骨细胞。结论幼年成骨细胞体外连续传代培养10-15代时，其形态结构、增殖能力与某些基因mRNA表达与体外培养第二代70岁以上老年人成骨细胞有相似性，有希望作为体外培养模拟衰老模型。     

大鼠骨髓间充质干细胞定向诱导分化为脂肪细胞的实验研究

骨髓中除了造血干细胞外，还有一类来源于中胚层未分化的骨髓间充质干细胞（marrow mesenchymal stemcells，BMSCs），其体外培养增殖迅速，不同条件下可以分化为成骨细胞、软骨细胞、肌细胞、成纤维细胞、脂肪细胞等多种组织细胞。近来研究发现骨质疏松，激素性骨坏死等疾病中骨髓脂肪细胞形成增加，脂肪细胞来源于脂肪前体细胞，脂肪前体细胞又是由间充质干细胞分化而来。本研究建立体外诱导BMSCs分化为脂肪细胞方法，旨在为骨质疏松，激素性骨坏死，肥胖症等疾病的发病机制及防治药物研究提供细胞模型。     

补肾富钙中药对大鼠卵巢辐射损伤所致骨质疏松形态

目的 探讨补肾富钙中药对大鼠卵巢辐射损伤所致骨质疏松形态计量学的影响.方法 40只SD大鼠随机分为四组(n=10),分别为假手术组(灌服1%纤维素90 d)、模型组(以50 Gy γ射线局部照射大鼠卵巢建立卵巢辐射损伤模型,1%纤维素灌服90 d)、尼尔雌醇组(造模后给予尼尔雌醇灌胃90 d)和补肾富钙中药组(造模后给予补肾富钙中药灌胃90 d).各组大鼠于处死前第14天和第4天分别腹腔注射盐酸四环素(30 mg/kg)进行标记,处死后取右侧股骨组织和L4腰椎组织分别进行骨组织形态计量和扫描电镜观察.结果 与模型组比较,补肾富钙中药组和尼尔雌醇组的骨小梁体积显著增加,骨吸收表面减少;尼尔雌醇组的骨形成表面和矿化沉积率下降,但在补肾富钙中药组则无显著变化.扫描电镜观察显示,模型组骨小梁变细、中断、排列稀疏,而补肾富钙中药组和尼尔雌醇组上述变化较轻微.结论 补肾富钙中药可有效预防卵巢辐射损伤诱发的骨质疏松.     

尼莫地平对体外培养成骨细胞的影响

目的 观察尼莫地平对体外培养成骨细胞的作用.方法 在新生SD大鼠头颅骨第2继代成骨细胞(OB2)培养液中分别加入不同浓度(10-1～10 9g/L)尼莫地平,分别观察OB2的增殖功能(用波长570nm处OD值表示),分化功能(用碱性磷酸酶ALP活性表示)和矿化功能(用矿化结节数量/视野表示).结果 增殖功能OD值为0.12±0.01～0.41±0.04;ALP活性为0.09±0.01U/mg蛋白质;矿化结节数量/视野为1.3±0.9个.结论 与对照组比较,尼莫地平各浓度对OB2的增殖、分化和矿化功能作用各异.当尼莫地平浓度为10 6g/L时,对OB2的增殖和分化功能具有刺激作用,对OB2的矿化功能具有显著的抑制作用;当浓度升高(10-2g/L)时,对OB2的增殖功能具有明显的抑制作用;当浓度降低(10 8g/L)时,对OB2的增殖功能失去作用.     

富钙补肾中药对卵巢摘除大鼠骨质疏松的防治作用

目的研究补肾中药何首乌、紫河车、珍珠对骨质疏松的改善作用。方法应用卵巢摘除方法，以骨量、骨抗弯力和骨病理形态计量学为指标，制作大鼠骨质疏松模型。结果骨钙含量明显高于不用药组，股骨骨密度和抗弯力增加，椎体和胫骨骨小梁面积明显增加。结论补肾中药何首乌、紫河车、珍珠对雌激素不足造成的骨质疏松有较好防治作用。     

由胎鼠头盖骨培养骨细胞的实验技术和细胞形态观察

应用Ⅱ型胶原酶,37℃振荡60min(2次)消化分离胎鼠头盖骨,可获得25×10~5细胞。每瓶接种1×10~5细胞,经10％FBS-EMEM在37℃,5％CO_2培养箱中培养,获得生长理想的成骨细胞。细胞形态呈三角形、多角形和立方形。细胞膜碱性磷酸酶反应阳性。电镜X线分析显示含有一定量的钙。     

破骨细胞体外培养生存数的观察与鳗鱼降钙素的影响

应用改良的Ｆｅｎｔｏｎ方法由出生２４小时内的新生Ｗｉｓｔａｒ大鼠分离破骨细胞（ＯＣ）培养于盖玻片与骨片上，并应用改良的ＶａｎＤｅＷｉｊｎｇａｅｒｔ和Ｍｏｓｔａｆａ方法对培养在骨片上的ＯＣ进行ＴＲＡＰ染色，观察体外培养ＯＣ的形态与生存时间。培养于骨片上的ＯＣ生存时间可长达２４０小时。１×１０（－９）ｍｏｌ／Ｌ鳗鱼降钙素能明显减少体外培养的多核ＯＣ生存数，但对单核前ＯＣ数没有明显影响     

基础与临床相结合，推进老年骨质疏松症防治的研究

随着世界人口结构的老龄化，骨质疏松症已成为全球公众关注的公共卫生热点。我国目前60岁以上老年人已有1．1亿多，并以3％的速度增长，是世界上老年人口最多的国家，占全世界老年人口的1／5，和亚洲老年人口的一半。上海是我国第一个进入老龄化的城市，预计到2025年每3人中就有一个老年人。在老龄社会中，骨质疏松症是威胁老年人健康长寿而需要特别重视的一种老年病，因为骨质疏松     

照射后全血血小板聚集功能的改变

本文介绍了用全m血小板聚集仪测定γ线6戈瑞照射后小鼠血小板聚集功能的改变.结果表明,照后4小时血小板聚集强度明显升高,第3天更为显著.照后第7、10天开始明显下降.照射后早期血小板聚集功能的增高可加重微循环功能障碍,聚集功能降低又是急性放射病出血综合征的原因之一.因而,早期抑制和后期改善血小板聚集功能有助于急性放射损伤的修复.