体重指数对体外受精反应参数及妊娠结局的影响

目的评估肥胖对体外受精(IVF)结局的影响,分析体重指数(BMI)、年龄、窦卵泡数之间的相互作用。方法本研究包含596例患者,根据BMI将其分为4组,即Ⅰ组(BMI<18.5kg/m2),Ⅱ组(18.5kg/m2≤BMI<25kg/m2),Ⅲ组(25kg/m2≤BMI<30kg/m2),Ⅳ组(BMI≥30kg/m2)。妊娠结局指标、患者反应参数、IVF助孕结局的相关指标采用ANOVA、卡方、Logistic回归等统计学方法进行分析。结果 BMI对临床妊娠结局存在重要的影响,Ⅱ组的临床妊娠率为66.5%,显著高于其他三组。在年龄、BMI、基础窦卵泡数目的相互影响方面,BMI与年龄之间的相互作用有统计学意义(P<0.01),其他因素之间的相互作用无统计学意义。在患者的反应以及IVF反应指标方面,超重组及肥胖组的启动剂量分别为(264.1±4.2)IU,(276.5±11)IU,远高于正常体重组(234.8±2.2)IU,其他指标无明显统计学差异。结论 BMI是不良妊娠结局的独立危险因素。     

miR-210靶基因HBVSP2的鉴定

目的：构建miR-210的过表达载体,利用双荧光蛋白报告基因分析系统验证miR-210的靶基因HBVSP2。方法：构建含有miR-210前体序列的miR-210的过表达质粒pcDNA3.1(+)/pri-miR-210;选取表达绿色荧光蛋白(EGFP)的质粒 pcDNA3/EGFP,将miR-210在HBVSP2上靶位点的一段特异性序列插入该质粒中,构建EGFP报告载体pcDNA3/EGFP-HBVSP2,并与miR-210ASO或者pcDNA3.1(+)/pri-miR-210及表达红色荧光蛋白质(RFP)的pDsRed2 -N1共同转染HEK293以及HepG2 2215细胞,用荧光分光光度计定量检测转染后提取的蛋白样品的荧光值。结果：共同转染pcDNA3/pri-miR-210 和pcDNA3/ EGFP-HBVSP2质粒后,EGFP/RFP的表达量明显低于pcDNA3和pcDNA3/ EGFP-HBVSP2共转染组,差异具有统计学意义(P<0.05)。pcDNA3/pri-miR-210和pcDNA3/EGFP-HBVSP2组EGFP/RFP低于pcDNA3和pcDNA3/EGFP-HBVSP2共转染组(P<0.05)。共转染miR-210ASO和pcDNA3/EGFP-HBVSP2组EGFP/RFP的表达量高于共转染LacZ和pcDNA3/EGFP-HBVSP2组,差异具有统计学意义(P<0.05)。LacZ和pcDNA3/EGFP-HBVSP2组EGFP/RFP低于LacZ和pcDNA3/EGFP组(P<0.05)。结论：成功构建miR-210的过表达质粒pcDNA3.1(+)/pri-miR-210和含有miR-210靶位点的pcDNA3/ EGFP-HBVSP2,HBVSP2 可能是miR-210的直接靶基因。     

红景天苷对胃癌细胞NU-GC-3凋亡及TGFβ1蛋白表达的影响

[目的]研究红景天苷对胃癌细胞NU-GC-3增殖的影响。[方法]细胞计数法、MTT法、流式细胞术检测分析不同浓度红景天苷对胃癌细胞NU-GC-3增殖的抑制作用,相差显微镜下观察形态学改变。RT-PCR、WesternBlot法分别检测加药组(20μg/ml红景天苷)和不加药组TGFβ1mRNA以及蛋白的表达水平。[结果]加药组细胞S期、G2/M期细胞数、增殖指数PI显著低于对照组,而细胞凋亡百分比、G0/G1期细胞数则显著高于不加药组。加药组TGFβ1mRNA以及TGFβ1蛋白的表达水平均高于不加药组。[结论]红景天苷对胃癌细胞NU-GC-3具有抑制其增殖并诱导其凋亡的作用。红景天苷作用于NU-GC-3细胞后明显促进了TGFβ1mRNA以及TGFβ1蛋白的表达。     

miR-663通过靶向TGFB1对肺癌细胞A549增殖的调控

目的利用双荧光蛋白报告基因分析系统,验证miR-663的直接靶基因TGFB1,探讨miR-663促进肺癌细胞A549增殖的可能机制。方法实时定量RT-PCR检测10对肺癌组织和正常肺组织中miR-663的表达水平;利用细胞计数和集落形成实验来验证细胞转染miR-663 ASO后的A549细胞增殖。选取表达绿色荧光蛋白的质粒pcDNA3/EGFP,将TGFB1 3′UTR的一段特异性序列插入该质粒中,并与miR-663及表达红色荧光蛋白质pDsRed2-N1共同转染肺癌细胞系A549,转染后细胞提取的蛋白样品,荧光分光光度计进行定性和定量检测。结果 miR-663在肺癌组织中的表达高于在正常肺组织中的表达;miR-663表达明显促进了细胞A549的增殖;共转miR-663和pcDNA3/EGFP-TGFB13′UTR质粒后,绿色荧光蛋白的表达量明显低于pcDNA3和pcDNA3/EGFP-TGFB13′UTR共转组。结论 miR-663可能通过靶定靶基因TGFB1,促进了肺癌细胞A549的增殖。     

miRNA与肝纤维化的研究进展

肝纤维化的治疗一直是临床研究的重点内容,如何预防肝纤维化的发生是肝纤维化治疗的重要前提,本文从发生肝纤维化的肝星状细胞,mi RNA,m RNA切入,探究可以用来作为监测肝脏纤维化疾病进展,潜在的预后标记或作为肝脏纤维化的潜在治疗物靶点的mi RNA及其靶定基因。     

封闭内源性miR-23a对人胃腺癌细胞系MGC803增殖及侵袭的影响

目的设计并合成miR-23a ASO (ASO-23a),封闭内源性miR-23a的功能后,检测人胃腺癌细胞系MGC803增殖及侵袭能
力的改变。方法首先设计并合成ASO-23a,经脂质体方法转染MGC803 细胞,实时定量PCR 检测转染细胞MGC803 中
miR-23a的表达水平;经MTT实验、平板克隆形成实验、软琼脂克隆形成实验、TUNEL实验及transwell实验,观察细胞内源性
miR-23a功能被封闭后对MGC803细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响。结果实时定量PCR结果表明ASO-23a能够有效封闭细
胞中内源性miR-23a;MTT、平板克隆形成及软琼脂克隆形成实验结果显示,封闭内源性miR-23a后可抑制MGC803细胞活性;
TUNEL实验结果显示,ASO-23a可以促进MGC803细胞凋亡的发生;Transwell实验结果显示,ASO-23a可以抑制MGC803细
胞的侵袭能力。结论设计并合成的ASO-23a在人胃腺癌细胞系MGC803中有效封闭内源性miR-23a,能够抑制细胞活性及侵
袭能力,并能促进细胞凋亡的发生。
     

输卵管手术与卵巢功能的关系

输卵管手术对卵巢功能的影响一直存在争议，随着异位妊娠发病率的增多，因异位妊娠而行输卵管手术的患者亦增多，或者因输卵管积水导致不孕为改善体外受精-胚胎移植（IVF-ET）结果而行预防性的输卵管切除术，以及输卵管绝育术的实施，上述患者多数年轻且有生育要求或关注术后卵巢功能，因此有必要探讨输卵管手术与卵巢功能的关系。     

GATA-3短发夹状RNA逆转录病毒载体的构建及鉴定

目的构建GATA-3特异性短发夹状RNA(shRNA)逆转录病毒表达载体。方法设计、合成两对GATA-3编码基因的反向重复序列,中间插入9个碱基的短发夹,经退火形成互补双链,再克隆至逆转录病毒载体RNA i-Ready pSIREN-RetroQ。结果构建的重组逆转录病毒载体可以被限制性内切酶BamH I,EcoR I切开,电泳可显示相应条带,经测序其序列与设计的一致。结论成功构建GATA-3特异性shRNA逆转录病毒载体RetroQ/GATA-3/shRNA,为进一步进行肿瘤细胞GATA-3基因沉默的研究奠定了基础。     

结核杆菌L-型感染与肺癌组织类型的关系

目的调查肺癌组织中结核分枝杆菌L-型的感染状况,以分析结核分枝杆菌L-型感染相关肺癌的临床病理学特征。方法采用原位分子杂交技术检测结核分枝杆菌L-型MPB64基因片段的存在及定位。同时,用IK抗酸染色法检测标本中的结核分枝杆菌L-型。结果原位分子杂交检测石蜡包埋73例肺癌组织中MPB64基因片段在肺鳞癌、肺腺癌、细支气管肺泡癌、小细胞未分化癌中的阳性率分别为85.0%、73.5%、81.8%和87.5%,差异无统计学意义(P>0.05)。IK抗酸染色检测结核分枝杆菌L-型在肺鳞癌、肺腺癌、细支气管肺泡癌、小细胞未分化癌中的阳性率分别为70.0%、64.7%、63.6%和75.0%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论结核分枝杆菌L-型感染在肺癌的形成过程中可能起到一定的作用,但是与癌组织的病理学类型无关。