MLH1、MSH2基因 mRNA突变分析与遗传性非息肉性结直肠癌的基因诊断

目的检测胚系MLH1和MSH2基因mRNA突变，确立遗传性非息肉性结直肠癌（hereditary nonpolyposis colorectal cancer，HNPCC）家系。方法收集符合Amsterdam标准Ⅱ的12个家系14名家庭成员外周血，用特异引物和耐热性逆转录酶特异地逆转录MLH1和MSH2的RNA；利用长模板PCR扩增酶扩增逆转录产物（cDNA）；测序分析扩增产物。提取外周血的DNA，设计与利用上述方法检测出突变对应外显子的特异性引物，利用Taq DNA聚合酶扩增测序，以检测上述方法的有效性。结果利用基于外周血mRNA的方法，在6个家系中检出6个胚系突变，4个MLH1突变和2个MSH2突变，MLH1突变分别位于第8、12、16和第19外显子；MSH2突变分别位于第1和第2外显子。利用基于外周血DNA的方法，上述突变均在MLH1和MSH2相应的外显子中得到验证。突变类型为4个错义突变、1个同义突变和1个非编码区突变；其中5个突变国际上尚未报道；6个突变中有5个为病理性，分布于5个不同家系，该5个家系被确诊为HNPCC家系。结论基于外周血MLH1和MSH2 mRNA异常的检测能确诊HNPCC家系；该方法敏感、省时、节约成本。     

胃丛状纤维黏液瘤临床病理学分析北大核心CSCD

目的探讨胃丛状纤维黏液瘤（plexiform fibromyxoma,PF）的临床病理学待征、诊断及鉴别诊断。方法收集郑州大学第二附属医院及郑州大学第一附属医院2006年6月至2017年6月期间8例手术病例胃PF的临床病理资料及随访资料,光镜下观察HE切片、免疫组织化学染色（EnVision法）、荧光原位杂交（FISH）方法检测GLI1基因易位情况,Sanger测序法检测CKIT基因（第9、11、13和17号外显子）及PDGFRA基因（第12、14和18号外显子）的突变状态,并结合文献进行分析。结果男性4例,女性4例;年龄26～72岁（平均年龄51岁）;胃窦6例,胃底2例;肿瘤最大径1．2～7．0cm,平均3．1cm;肉眼观肿瘤边界较清,切面灰黄色或灰白色,质韧。低倍镜下肿瘤呈丛状或多结节状,浸润性生长;间质富含薄壁小血管及黏液样基质。高倍镜下肿瘤呈束状、席纹状及编织状排列,瘤细胞梭形或卵圆形,未见肿瘤性坏死,核分裂象（0～2）／50HPF。免疫组织化学显示,波形蛋白（8／8）、平滑肌肌动蛋白（SMA,8／8）均阳性,CD10（4／8）、结蛋白（3／8）、H—caldesmon（5／8）、孕激素受体（PR,5／8）部分阳性,CD117、DOG1、CD34、间变性淋巴瘤激酶、雌激素受体及S-100蛋白均阴性。分子检测结果：3例检测到GLI1基因易位（3／8）,4例行CKIT及PDGFRA基因突变检测均为野生型。7例获得随访资料,随访时间24～95个月（平均50个月）,均无瘤生存。结论胃PF是一种伴有肌样分化的间叶源性肿瘤,主要发生于胃窦部,目前的随访证据表明其生物学行为呈惰性临床经过．诊断时需与胃肠道间质瘤等多种间叶源性肿瘤鉴别。综合考虑肿瘤的丛状生长方式及免疫组织化学染色表达SMA、PR及CD10对胃PF的诊断与鉴别诊断有较大价值,GLI1基因易位检测亦可作为重要的辅助诊断手段。     

低度恶性中央性骨肉瘤的病理诊断与鉴别诊断

目的 探讨低度恶性中央性骨肉瘤(LGCOS)诊断与鉴别诊断要点.方法 收集9例LGCOS(均为会诊病例),对其临床、病理组织学和影像学进行观察和分析,并复习相关文献.结果 临床特点:9例患者中男性3例,女性6例,平均年龄约31岁.影像学均表现为成骨和溶骨混合性骨质破坏,边界不清,5例伴软组织影,3例有骨膜反应.9例均有局部疼痛和(或)肿胀,4例发生在股骨,胫骨、腓骨、颈椎、腰椎、上颌骨各1例.均行手术切除,术后未予放疗等辅助治疗,随访时间2～43个月,其中4例分别于术后25、18、8和13个月复发.病理检查:(1)大体检查:5例为碎组织,4例为块状切除标本,切面质地较韧,有不同程度的沙砾感,均无鱼肉样外观.(2)镜下观察:肿瘤由两种基本成分,即纤维成分和新生编织骨;纤维细胞密度较低,轻度异形,9例中均查见个别核分裂象;新生骨小梁均为编织骨,6例骨小梁宽大,有平行排列倾向,3例骨小梁较小,骨小梁周边均缺乏骨母细胞围绕;纤维成分和编织骨比例不一,两种成分有移行现象.病变呈浸润性生长,9例均有髓腔侵犯,3例伴有邻近软组织侵犯.结论 LGCOS细胞异形不明显、肿瘤性骨小梁较宽大成熟,易漏诊,诊断时应充分做到临床、影像学和病理三结合.临床特点:病程较长,局部缺少特征性表现.影像学:成骨和溶骨混合性病变,边界不清,骨皮质破坏或伴有邻近软组织影.病理形态:大体上缺少鱼肉样外观;镜下肿瘤性纤维成分轻度异形,可见核分裂象,肿瘤性骨小梁周边缺乏骨母细胞围绕,有平行排列倾向,纤维性成分和新生骨型小梁有直接移行现象;病变呈浸润性生长.     

Survivin在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的：探讨Survivin在乳腺癌组织中的表达与凋亡指数（apoptosis index,AI）以及临床指标的相关性和预后的意义.方法：免疫组化法检测63例乳腺癌标本中Survivin的表达;TUNEL法检测乳腺癌组织中的AI.结果：Surviyin在乳腺癌组织中的表达阳性率为63.5%.Survivin与AI呈负相关,P=0.000 0.Survivin与肿块直径、肿瘤分期、雌激素受体状态无关,而与腋窝淋巴结转移呈正相关,P=0.000 0.单因素分析显示,Survivin是乳腺癌的一个预后指标,P=0.0115.结论：Survivin是一种有效的凋亡抑制蛋白,在肿瘤的发生过程中起一定作用.检测Survivin对乳腺癌的预后分析和进一步治疗具有指导作用.     

Maffucci综合征伴右腓骨内生性软骨瘤恶变1例报道并文献复习

目的 探讨Maffucci综合征伴发内生性软骨瘤恶变的临床病理学特点.方法 对1例Maffucci综合征伴发内生性软骨瘤恶变的临床资料、影像学表现和病理学形态进行回顾性分析,并复习相关文献.结果 患者为55岁女性,因右小腿疼痛、肿胀,活动受限1年半就诊.X线检查显示右侧肱骨、尺骨和桡骨,双侧股骨、胫骨和腓骨,以及双侧手足短状骨内多发性内生性软骨瘤(Ollier病),其中右腓骨中下段可见巨大块影,伴有骨皮质破坏,周界不清,内有不规则钙化.左肘关节和左跗关节畸形.另于患者的左足背和足趾,右前臂、右小腿和右臀部皮下可见7个直径为1～3 cm的暗紫色结节.临床行右小腿截肢术.镜下显示右腓骨中下段肿块为中-低分化软骨肉瘤,右小腿暗红色结节为海绵状血管瘤,伴静脉石形成.术后随访17个月,未见复发和转移.结论 Maffucci综合征是一种少见的非遗传性软骨发育异常综合征,表现为Ollier病伴发软组织血管瘤.Maffucci综合征常常在早期发生恶变,多为内生性软骨瘤恶变为软骨肉瘤,而血瘤发生恶变者极为罕见.Maffucci综合征伴有恶变的诊断需要临床、影像和病理学三者相结合.     

猫抓病性淋巴结炎的病理诊断与鉴别诊断——附38例报告

目的 加深对猫抓病性淋巴结炎的认识,提高其诊断水平。方法 对38例猫抓病性淋巴结炎作回顾性临床病理分析,并作Warthin-Starry银染色。结果 发病年龄：4－56岁,平均20．8;发病部位：上肢及腋窝淋巴结16例（42．1％）、下肢及腹股沟淋巴结13例（34．2％）、颈部淋巴结9例（23．7％）;发病季节：28例（73．7％）发生于6－10月份（夏秋季）、10例（26．3％）,发生于其它月份;组织学特点：淋巴结皮髓质内肉芽肿形成,部分肉芽肿中微脓肿形成;Warthin-Starry 银色染色：38例中有33例（86．8％）阳性。结论 本病常有一定好发部位及高发季节性,并常有猫抓史或与猫密切接触史。将淋巴结形态学特点与临床病史结合,是提高本病诊断水平的关键。     

Smad4基因对胰腺癌细胞E-cadherin、β-catenin表达及增殖的影响

目的探讨Smad4基因对人胰腺癌细胞BxPC3 E-cadherin、β-catenin表达及细胞增殖的影响,为试图运用Smad4对胰腺癌进行基因治疗提供实验依据。方法经脂质体介导将含有Smad4重组表达质粒转染人胰腺癌细胞Bx-PC3,用G418筛选及RT-PCR、Western blot鉴定;分别采用RT-PCR和Western blot检测转染阳性细胞克隆E-cadherin、β-catenin表达改变;又分别采用噻唑盐（MTT）比色法及5-溴-2-脱氧尿苷（BrdU）掺入法检测阳性细胞克隆的增殖活性。结果成功建立表达Smad4的阳性BxPC3克隆（S4-8,S4-23）,并证实其E-cadherin、β-catenin mRNA及蛋白表达均明显升高。MTT法和BrdU掺入法显示,S4-8与S4-23细胞克隆增殖显著降低。结论 Smad4可增加胰腺癌细胞E-cadherin及β-catenin的表达并抑制其增殖,Smad4可能对胰腺癌具有基因治疗的效果。     

基于癌症基因图谱挖掘前列腺癌不同Gleason分级癌组织相关基因分析

目的：运用生物信息学探究不同Gleason分级（Gleason Pattern,GP）前列腺癌组织间的分子表达差异及其基因间的相互影响。方法：下载癌症基因图谱（the cancer genome atlas,TCGA）前列腺癌患者的转录组数据及GP资料,运用生物信息学分析GP 4级与GP 3级前列腺癌组织间的基因表达差异,进而通过基因本体（gene ontology, GO）、京都基因和基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes, KEGG）信号通路富集及蛋白相互作用网络（protein protein interaction network, PPI）,探究不同GP的前列腺癌组织间差异表达基因的相互作用及影响的生物学过程。结果：生信分析共鉴定出312个差异表达基因,且相较于GP 3级癌组织,GP 4级前列腺癌组织中存在157个基因表达上调,155个基因表达下调。生信分析显示,在基因相互作用网络中富集到的22个显著相关基因主要参与的生物学过程为细胞周期及有丝分裂。结论：GP 4级前列腺癌组织内的肿瘤细胞有丝分裂更为活跃,临床可通过检测细胞周期相关蛋白,协助对前列腺癌患者作出更合理的疾病风险及预后评估;同时,针对Gleason积分（Gleason score,GS）≥7分的患者,细胞周期相关蛋白有望成为其有效的治疗靶点。     

十二指肠型滤泡性淋巴瘤17例临床病理特征及预后分析

目的：探讨十二指肠型滤泡性淋巴瘤（duodenal-type follicular lymphoma, DFL）的临床病理学特征及预后。方法：回顾性分析17例DFL患者的临床特点、内镜表现、病理学特征及治疗方案,并进行随访。结果：17例DFL患者中,男性8例,女性9例,男女比为1∶1.125,中位年龄为58岁（33～67岁）,其中13例DFL患者是在常规体检中发现,内镜下多表现为颗粒状增生。DFL发生在十二指肠者有15例（88.2%）,且全部位于十二指肠降段;单发病灶15例,多发病灶2例。内镜下,见病变位于黏膜层或黏膜下层,呈清楚或隐约的“膨胀性”生长,可见滤泡样结节,结节内由中心细胞样细胞和散在中心母细胞样细胞组成,相当于经典型滤泡性淋巴瘤的1级或2级。肿瘤细胞表达CD20、CD79a、CD10、BCL6及BCL2,9例患者的CD21染色显示滤泡树突网在肿瘤性滤泡周边密集、浓染,而在中央淡染、稀疏,Ki-67低表达。4例患者行第二代基因测序检测,其中3例共同检测到CREBBP基因变异。14例患者未经任何治疗,疾病无进展;1例行局部肠段切除,术后未行化疗和放疗,未复发;1例接受化疗加利...     

非小细胞肺癌微血管密度的研究

目的: 探讨非小细胞肺癌组织中微血管密度(microvessel density,MVD)与肺癌临床病理特征的关系。方法: 采用S-P免疫组化法,检测57例肺癌组织MVD,研究微血管表达与非小细胞肺癌病理分型、临床分期及淋巴结转移的关系。结果: MVD与肺癌淋巴结转移状态、分期、细胞分化程度等均有密切关系(P<0.01),而与肺癌患者性别、组织学类型、原发肿瘤大小等均无明显关系(P>0.05)。结论: MVD在肺癌的发生、发展、转移中起重要作用,可以作为评价非小细胞肺癌预后指标之一。