去甲肾上腺素对血管平滑肌细胞增殖和骨架蛋白表达的影响

目的:研究去甲肾上腺素(NE)对血管平滑肌细胞(VSMC)骨架蛋白表达与增殖之间的关系,探讨神经因素对VSMC的调控作用.方法:体外培养大鼠主动脉VSMC,用BrdU标记增殖的细胞;免疫荧光方法检测细胞骨架蛋白SM α-actin、β-tubulin和desmin的表达.结果:血清培养对VSMC有明显促增殖作用,而血清饥饿则能可逆性抑制VSMC增殖;NE能明显促VSMC增殖和下调SM22α的表达;随血清培养SM α-actin表达减少,血清饥饿培养可使SM α-actin表达可逆性上调;β-tubulin和desmin随血清培养其表达减少更明显,第6代基本不表达,而血清饥饿也不能上调其表达,NE对SM α-actin、β-tubulin和desmin的表达有下调作用.结论:NE可促进VSMC增殖和下调SM α-actin、β-tubulin和Desmin骨架蛋白的表达作用.     

毛葡萄叶水提物对大鼠脑缺血再灌注的保护作用

目的探讨毛葡萄叶水提物对SD大鼠脑栓塞后缺血再灌注的脑保护作用及其可能作用机制。方法连续灌胃给药8d后建立SD大鼠脑栓塞模型,作TTC脑染色,观察脑梗死面积;HE染色观察脑梗死区的形态学变化;用免疫细胞化学检测脑组织相关凋亡基因bcl-2及caspase-3的表达变化;并检测大鼠血浆丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)及乳酸脱氢酶(LDH)水平变化。结果毛葡萄叶水提物能明显减小大鼠脑栓塞模型的梗死面积,明显提高bcl-2的表达和下调caspase-3的表达,并有降低血浆MDA水平和升高LDH、NO水平的作用,且毛葡萄叶水提物组的效果优于阳性药物对照组。结论毛葡萄叶水提物有明显抗脑梗死形成作用,其机制可能与抑制细胞凋亡和抗氧化作用有关。     

人精浆免疫抑制因子的分离、提取及生物活性测定

目的从人精浆中分离提取精浆免疫抑制因子(SP IF).方法取常规检测正常精液50份, 离心分离精子和精浆,将精浆低温高速离心,取上清液,经Sephadex G-100层析, 收集第1峰, 作DEAE纤维素离子交换层析, 收集第2峰, 浓缩, 经SDS-PAGE分析呈单带.在体外对其生物活性进行了测定,并以其为抗原经ELISA间接法对100例不育男子和50例生育男子精浆中抗SPIF IgG和IgA进行了测定.结果测定分子量为52kd.当浓度分别为50、100、200μg/ml时,对PHA诱导的人外周血淋巴细胞转化抑制率、NK细胞活性抑制率分别为27.1%、33.9%、66.9%和23 .7%、32.4%、57.4%.ELISA结果, 不育组与生育组间抗SPIF IgG和IgA分别为38%、26% 和6%、2%.结论该实验提取的52kd的蛋白达到电泳纯且在体外具有一定的生物活性.ELISA间接法结果显示,不育组与生育组间存在显著性差异(P＜0.05).     

淀粉样β蛋白42在正常大鼠视网膜节细胞中的发育及表达

目的:探讨淀粉样β蛋白42(Aβ42)在正常大鼠视网膜节细胞巾的发育及表达.方法:SD大鼠分为正常见光组和避光饲养组.眼球做冷冻切片和视网膜裱片,采用免疫细胞化学方法检测Aβ42的表达.结果:出生后3、6、13 d组大鼠视网膜节细胞未见Aβ42表达,15 d(见光后)以后开始有表达,并逐渐增多,90 d组表达最多.其中15 d和25 d组在避光饲养下未见表达.结论:Aβ42在正常大鼠出生后第15日开始表达,并逐渐上调;在15 d后避光饲养动物的视网膜节细胞中未见表达,提示该蛋白在视网膜视觉功能的发育中可能发挥了重要作用.     

OX-LDL诱导内皮细胞的条件培养基对内皮细胞LPO、NO和iNOS的影响

为了探讨受损内皮细胞的自分泌和旁分泌对受损内皮细胞本身的影响 ,本文收集正常内皮细胞条件培养基和用氧化型低密度脂蛋白 (OX-L DL )诱导内皮细胞的条件培养基分别作用于正常内皮细胞和氧化受损内皮细胞 ,检测其脂质过氧化物和一氧化氮代谢及诱导型一氧化氮合酶表达的变化。得到的结果是 :(1)正常内皮细胞的条件培养基和 OX-LDL 诱导的内皮细胞条件培养基对正常内皮细胞和受损内皮细胞脂质过氧化代谢有明显下调作用 (P<0 .0 5 ) ,但 OX-LDL 诱导的内皮细胞条件培养基的下调作用更为明显 (P<0 .0 1)。 (2 )正常内皮细胞的条件培养基和 OX-LDL 诱导的内皮细胞条件培养基对正常内皮细胞 NO的代谢表现为抑制作用 (P>0 .0 5 ) ,而对受损内皮细胞有轻微上调作用 (P>0 .0 5 )。 (3 )正常内皮细胞的条件培养基和 OX-L DL诱导的内皮细胞条件培养基对正常内皮细胞诱导型一氧化氮合酶的表达表现出抑制作用 ,而对受损内皮细胞诱导型一氧化氮合酶的表达有上调作用 (P>0 .0 5 )。本文结果提示 :正常和受到氧化损伤内皮细胞的自分泌和旁分泌作用对正常和受损内皮细胞的脂质过氧化物的代谢均有下调作用 ,对 NO的代谢和诱导型一氧化氮合酶的表达则起抑制作用 ,而对受损内皮细胞有轻微上调作用。这种调节作用可能是内皮     

人精子包被抗原的提取法研究

人精子经TritonX－100处理，冷冻高速离心后，制成人精子膜蛋白粗制品，经SephadexG－75抗人精浆亲和层析柱提取精子膜蛋白，经SDS－PAGE电泳呈单一区带，分子最为52ku。用其免疫新西兰兔产生具有精子凝集和制动活性的特异性抗血清。以其作为抗原，经ELISA间接法测定不育男子精浆中抗精抗体。结果，20例生育男子组和50例不育男子级精浆中抗精抗体IgG、IgA分别为10％，5％和38％，30％。两组有显著性差异（P＜0．05）。表明，本法提取的精子包被抗原具有较高的特异性和免疫原性。     

不育男子精浆中抗精浆免疫抑制因子IgG和IgA的相关性分析及临床意义

目的：研究抗人精浆免疫抑制因子（SPIF）IgG和IgA对男性不育的影响。方法：ELISA间接法对74例不育男子和37例生育男子精浆中抗SPIF IgG和IgA进行测定。结果：不育组与生育组中抗SPIF IgG和IgA的阳性率分别为35.2%、27.3%和5.4%、2.1%。结论：不育组抗SPIF IgG和IgA阳性率显著高于生育组（P＜0．01），而不育组间抗SPIF IgG和IgA两者阳性率无显著性差异，亦无相关关系。     

交感神经系统内一氧化氮合酶对血管平滑肌增殖的影响

目的探讨交感神经系统中的一氧化氮合酶(NOS)对血管平滑肌增殖的影响及调控。方法用三氯化铁(FeCl3)损伤颈总动脉建立大鼠平滑肌增殖模型,实验分为假手术组、术后存活1d组、5d组,在5d组中加设注射抑制剂N-硝基-L精氨酸(LNNA)组,每组6只大鼠,采用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸黄递酶(NADPH-d)组织化学染色和荧光金(FG)逆向追踪双标,观察颈交感神经节和脊髓中间外侧核神经细胞一氧化氮合酶的变化;苏木素-伊红(HE)染色观察血管平滑肌增殖变化。结果血管损伤后1d、5d组的颈交感神经节中有较多NADPH-d染色阳性细胞表达,尤其5d组更明显;手术侧的T1～T3脊髓侧角NADPH-d阳性细胞数也增多,而抑制剂组的NADPH-d阳性细胞数明显减少;HE染色可见血管损伤后有平滑肌增殖,而抑制剂组增殖更明显。结论损伤颈总动脉后颈交感神经节和T1～T3脊髓侧角内的NOS活性增强,可能参与血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的调控。     

心肌桥与壁冠状动脉形态学变化的相关性分析

目的观测心肌桥与壁冠状动脉形态学变化,探讨心肌桥与壁冠状动脉病变的关系。方法收集40例尸体心脏标本,观测心肌桥的出现率;测量心肌桥的长、宽、厚度;取心肌桥前、桥下、桥后的冠状动脉,分别石蜡包埋,切片,HE染色,观察各部位血管壁结构的变化。结果在40例心脏标本中,发现心肌桥23处,出现率为56%。其中左冠状动脉及分支上出现心肌桥为18例（占45%）,右冠状动脉及分支上发现心肌桥为5例（占12.5%）。心肌桥平均长、宽、厚度分别（1.49±0.135）cm、（0.39±0.036）cm、（0.18±0.050）cm。心肌桥冠状动脉内膜测量,桥前段较桥下、桥后段有明显不规则增厚,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论心肌桥的出现以单一前室间支为主。心肌桥宽度、长度对桥前壁冠状动脉内膜厚度影响较小,心肌桥的厚度与桥前冠状动脉内膜增厚呈正相关。心肌桥的厚度对冠状动脉病变可能有重要关系。