胶原-壳聚糖支架与软骨细胞的生长

背景:目前软骨支架材料的种类比较多,但还没有一种材料能完全符合软骨修复的要求。目的:观察在混合材料胶原-壳聚糖支架中软骨细胞的生长情况。方法:采用冷冻干燥法将质量分数为2%胶原与3%壳聚糖混合制备胶原-壳聚糖多孔支架。将分离培养的第2代兔软骨细胞接种到胶原-壳聚糖支架上,对照组将软骨细胞接种到无支架的培养板中。观察支架的孔隙率、吸水性及内部形态结构,MTT法检测软骨细胞在支架上的增殖情况,组织切片苏木精-伊红染色,扫描电镜观察细胞在支架的生长、贴附情况,RT-PCR检测细胞支架复合物蛋白聚糖和Ⅱ型胶原mRNA表达情况。结果与结论:胶原-壳聚糖支架的吸水性为(80.0±0.55)%,孔隙率为(88.5±1.5)%,孔径为100～150μm,复合细胞培养2周后,细胞增殖活力高,软骨细胞分泌的蛋白聚糖和Ⅱ型胶原mRNA表达明显高于对照组。说明质量分数为2%胶原与3%壳聚糖的混合支架适合软骨细胞生长和快速增殖,是一种良好的修复和重建软骨载体。     

胶原-壳聚糖支架与软骨细胞的生长

背景：目前软骨支架材料的种类比较多,但还没有一种材料能完全符合软骨修复的要求。 目的：观察在混合材料胶原-壳聚糖支架中软骨细胞的生长情况。 方法：采用冷冻干燥法将质量分数为2%胶原与3%壳聚糖混合制备胶原-壳聚糖多孔支架。将分离培养的第2代兔软骨细胞接种到胶原-壳聚糖支架上,对照组将软骨细胞接种到无支架的培养板中。观察支架的孔隙率、吸水性及内部形态结构,MTT法检测软骨细胞在支架上的增殖情况,组织切片苏木精-伊红染色,扫描电镜观察细胞在支架的生长、贴附情况,RT-PCR检测细胞支架复合物蛋白聚糖和Ⅱ型胶原mRNA表达情况。 结果与结论：胶原-壳聚糖支架的吸水性为(80.0±0.55)%,孔隙率为(88.5±1.5)%,孔径为100~150 μm,复合细胞培养2周后,细胞增殖活力高,软骨细胞分泌的蛋白聚糖和Ⅱ型胶原mRNA表达明显高于对照组。说明质量分数为2%胶原与3%壳聚糖的混合支架适合软骨细胞生长和快速增殖,是一种良好的修复和重建软骨载体。     

细胞共培养在组织工程研究中的应用及价值*

背景：细胞共培养即最大程度地模拟机体内环境,在体外观察细胞与细胞之间的相互作用,是组织工程研究的热点。 目的：总结并讨论细胞共培养研究在组织工程研究的应用及价值。 方法：由第一作者用计算机检索中国期刊全文数据库(CNKI：2000/2010)和Medline数据库(2000/2010),检索词分别为“细胞共培养,骨髓间充质干细胞,神经干细胞,软骨细胞,组织工程”和“Cells co-culture,Bone marrow stem cells,Neural stem cells,Cartilage”,语言分别设定为中文和英文。从细胞共培养在骨髓间充值干细胞、神经干细胞和软骨细胞3方面进行总结,对细胞共培养在组织工程研究及应用方面进行介绍。 结果与结论：共检索到182篇文章,按纳入和排除标准对文献进行筛选,共纳入30篇文章。结果表明大量细胞共培养的研究,都围绕着最大程度地模拟体内环境、维持体内性状,观察细胞与细胞之间相互作用,很多体外细胞共培养的研究结果和进展对于深入了解共培养有重要的指导和参考价值,但有关共培养的新方法新技术,研究结果,最新动向和研究热点但仍需进一步分析和总结。     

极度旋前复位桡骨头半脱位的基础与临床研究

目的结合解剖学研究和临床对比极度旋前、旋后两种复位桡骨头半脱位的效果。方法解剖20例婴幼儿肘关节标本,测量桡骨头、颈矢状径和横径、环状韧带上下缘周长。140例桡骨头半脱位患儿分别采用极度旋前(n=70)、旋后(n=70)复位法进行治疗,比较其复位率和MOPS评分。结果桡骨头矢状径大于桡骨颈矢状径(P<0.05),桡骨头横径大于桡骨颈横径(P<0.05),而环状韧带上下缘周长接近。旋前复位组与旋后复位组在男女、左右手比例上差异无统计学意义(P>0.05)。旋前复位组首次复位率(95.7%)显著高于旋后复位组的82.9%(P<0.05)。旋前法MOPS评分低于旋后法[(4.17±1.35)分比(7.05±1.60)分,P<0.05]。结论环状韧带及关节囊嵌顿于肱桡关节间隙是桡骨头半脱位的解剖机制,在首次复位率、减轻疼痛方面极度旋前法优于旋后法。     

兔骨髓间充质干细胞/壳聚糖-胶原支架复合体构建软骨组织工程支架

背景:软骨组织工程的核心是利用少量的细胞经体外培养、扩增后,在一定环境下附着在三维多孔支架上,再将细胞/支架复合体移植到体内形成新的组织.目的:拟构建兔骨髓间充质干细胞/壳聚糖-胶原支架复合体,探讨该支架作为软骨组织工程支架的可行性.设计、时间及地点:细胞-支架学体外观察,于2008-03/2009-02在武警医学院生物化学教研室完成.材料:日本大耳白兔6只用于分离培养骨髓间充质干细胞.医用壳聚糖粉末为山东奥康生物科技有限公司产品.Ⅰ型胶原为Sigma公司产品.方法:取3%的壳聚糖和2%的胶原混合的醋酸溶液,倒入72孔板内,-20℃预冷冻10 h,冻干机冷冻抽干24 h制作成壳聚糖-胶原支架.取第3代兔骨髓间充质干细胞,以1×109L-1密度接种于支架内,构建细胞/支架复合体.主要观察指标:傅里叶红外光谱、扫描电镜、液体置换法测定支架的理化性质,观察三维培养后细胞在支架上的生长情况.结果:壳聚糖-胶原支架孔径为160～380 μm,平均为270 μm,孔相通性好,支架孔隙率为(86.00±5.12)%.傅里叶红外光谱仪测定数据表明复合支架组成物有典型的壳聚糖、胶原峰,未发现有聚乙二醇峰.细胞/支架共培养24,48,72 h后,骨髓间充质干细胞可渗入支架多孔结构内,并黏附在支架上成簇生长,部分细胞已与支架融合.结论:壳聚糖-胶原支架基本符合软骨组织工程支架要求,能够作为种子细胞的承载体.     

兔关节软骨损伤生物标志物的蛋白质组学检测*

背景：采用蛋白质组学的方法可以检测出关节、血液、尿液等体液中一些能反映关节软骨损伤程度的特异性标志物的水平。 目的：进一步验证采用生物芯片技术发现兔关节软骨损伤生物标志物。 方法：采用改良的Hulth方法建立兔关节软骨损伤模型,建模后自由活动,不固定伤肢。30 min/d分2次驱赶,连续12周。以不做任何处理兔膝关节为正常对照。并在造模后0,4,8,12周时采取部分标本(血清、关节液),验证观察关节软骨的损伤程度;各个时间点的动物关节液、血清样本放入采用PBSⅡ-C型蛋白质芯片阅读机,采用CM10芯片检测。 结果与结论：改良的Hulth造模方法建立膝关节软骨损伤模型,比较全面地反映了关节软骨损伤从早、中、晚、失代偿各期的变化。与正常对照组相比,血清学样品：模型组3 475 蛋白表达下调,7 558,15 475,33 665蛋白表达上调;关节液样品：模型组7 558,33 278蛋白表达下调,3 950,16 055蛋白表达上调;质核比3 475,7 558,16 884为血清学和关节液样本共有差异蛋白质谱波峰显著蛋白。结果提示样本中出现的部分差异蛋白质可能为关节软骨损伤的生物标志物。      

细胞共培养在组织工程研究中的应用及价值

背景：细胞共培养即最大程度地模拟机体内环境,在体外观察细胞与细胞之间的相互作用,是组织工程研究的热点。 目的：总结并讨论细胞共培养研究在组织工程研究的应用及价值。 方法：由第一作者用计算机检索中国期刊全文数据库(CNKI：2000/2010)和Medline数据库(2000/2010),检索词分别为“细胞共培养,骨髓间充质干细胞,神经干细胞,软骨细胞,组织工程”和“Cells co-culture,Bone marrow stem cells,Neural stem cells,Cartilage”,语言分别设定为中文和英文。从细胞共培养在骨髓间充值干细胞、神经干细胞和软骨细胞3方面进行总结,对细胞共培养在组织工程研究及应用方面进行介绍。 结果与结论：共检索到182篇文章,按纳入和排除标准对文献进行筛选,共纳入30篇文章。结果表明大量细胞共培养的研究,都围绕着最大程度地模拟体内环境、维持体内性状,观察细胞与细胞之间相互作用,很多体外细胞共培养的研究结果和进展对于深入了解共培养有重要的指导和参考价值,但有关共培养的新方法新技术,研究结果,最新动向和研究热点但仍需进一步分析和总结。     

胶原-壳聚糖支架与软骨细胞的生长

背景：目前软骨支架材料的种类比较多,但还没有一种材料能完全符合软骨修复的要求。 目的：观察在混合材料胶原-壳聚糖支架中软骨细胞的生长情况。 方法：采用冷冻干燥法将质量分数为2%胶原与3%壳聚糖混合制备胶原-壳聚糖多孔支架。将分离培养的第2代兔软骨细胞接种到胶原-壳聚糖支架上,对照组将软骨细胞接种到无支架的培养板中。观察支架的孔隙率、吸水性及内部形态结构,MTT法检测软骨细胞在支架上的增殖情况,组织切片苏木精-伊红染色,扫描电镜观察细胞在支架的生长、贴附情况,RT-PCR检测细胞支架复合物蛋白聚糖和Ⅱ型胶原mRNA表达情况。 结果与结论：胶原-壳聚糖支架的吸水性为(80.0±0.55)%,孔隙率为(88.5±1.5)%,孔径为100~150 μm,复合细胞培养2周后,细胞增殖活力高,软骨细胞分泌的蛋白聚糖和Ⅱ型胶原mRNA表达明显高于对照组。说明质量分数为2%胶原与3%壳聚糖的混合支架适合软骨细胞生长和快速增殖,是一种良好的修复和重建软骨载体。     

脂肪间充质干细胞在组织工程中的应用

背景:脂肪间充质干细胞与骨髓间充质干细胞具有相似的形态学及生物学特性,可作为组织工程的种子细胞来源.目的:深入认识脂肪间充质干细胞的生物学特性,对其在组织工程中的研究进展及临床应用、基础研究前景进行探讨.方法:以adipose tissue-derived stem cell,tissue engineering,stem cells为检索词,检索Pubmed数据库(1999-01/2009-06).以脂肪间充质干细胞,组织工程为检索词,检索CNKI期刊全文数据库(1999-01,2008-12).文献检索语种限制为英文和中文.以脂肪间充质干细胞成骨和软骨的能力以及脂肪间充质干细胞和基因转染技术联合治疗疾病的效果为评价指标.纳入大鼠脂肪和骨髓来源间充质干细胞成骨分化比较的体外研究,排除重复性研究及目的与本文不相关的研究.结果与结论:脂肪间充质干细胞取材方便,来源丰富,可在体外稳定增殖传代,与骨髓间充质干细胞具有相似的形态学及生物学特性,在一定诱导条件作用下可以定向分化为中胚层及内、外胚层组织细胞.脂肪间充质干细胞联合组织工程学支架在一定程度上可以修复骨、关节软骨的缺损,但新生软骨的质量与周围软骨的连接、生物力学强度、未来退化等都与正常的软骨有一定差距,尚需深入研究.随着人们对成体间充质干细胞研究的不断深入,发现因间充质干细胞具有自我扩增和分化潜能,使导入的"外源基因"能够有效扩散;获取和体外扩增比较容易,可在体外对其进行基因改造和修饰,且其易被外源基因转染.因此,脂肪来源的间充质干细胞可以结合基因工程学,应用于基因治疗.但是在当前研究方面,尚存在基因载体潜在致癌性,转染后对人体及干细胞是否产生不良影响等问题尚未阐明.     

颈舒散外敷治疗神经根型颈椎病60例临床观察

目的观察颈舒散外敷治疗神经根型颈椎病的临床疗效。方法采用回顾性分析的方法,对我院2014年1月至2014年9月收治的60例神经根型颈椎病患者,随机分成2组,对照组30例采用常规针刺进行治疗,治疗组30例在对照组针刺治疗的基础上应用颈舒散外敷。结果对照组有效率为90%,治疗组有效率100%,2组疗效分析,差异具有统计学意义。结论颈舒散外敷治疗神经根型颈椎病有较好疗效。