葛根散等3首解酒方对急性酒精性肝损伤小鼠肝细胞凋亡的影响

目的:比较葛根散等3首方剂对急性酒精性肝损伤小鼠肝细胞凋亡的干预效果,探讨3首方剂防治酒伤的部分作用机制。方法:将小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、各给药大、中、小剂量组,制备急性酒精性肝损伤模型,给药组以中药水煎剂灌胃,对照组代以蒸馏水,检测肝组织病理学改变、肝细胞凋亡指数、Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果:与正常对照组比较,模型对照组小鼠肝组织脂肪变性、肝细胞凋亡指数及肝细胞Bax阳性表达均明显升高(P<0.01),肝细胞Bcl-2阳性表达明显降低(P<0.01)。与模型对照组比较,葛根散和葛花解酲汤在一定剂量下都能显著减少小鼠肝组织脂肪变性、肝脏凋亡指数和Bax蛋白的表达(P<0.01),显著增加小鼠肝细胞Bcl-2蛋白的表达(P<0.01);石膏汤在一定剂量下能显著减轻小鼠肝组织脂肪变性(P<0.01),但对小鼠肝脏凋亡指数及Bcl-2、Bax的表达无影响,与葛根散比较具有显著差异(P<0.05)。结论:葛根散和葛花解酲汤能减轻肝细胞的变性、坏死,减少细胞凋亡,可能与其解酒机制有关。     

葛根散等3首解酒方对乙醇致小鼠急性肝损伤的保护作用

目的:考察并比较葛根散等3首解酒方剂对乙醇致小鼠急性肝损伤的保护作用,为进一步研发与应用提供依据。方法:制备醉酒小鼠模型,采用各方剂大、中、小剂量灌胃干预,以蒸馏水为对照,检测实验动物TBA、ALT、AST、GSH、MDA、肝脏系数等指标,并比较分析各方对乙醇致急性肝损伤的保护效果。结果:与正常对照组比较,模型对照组小鼠各项指标有显著改变(P<0.01);与模型对照组比较,葛根散、葛花解酲汤、石膏汤能明显改善小鼠血清TBA、ALT、AST和小鼠肝组织GSH、MDA水平(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,只有葛根散大剂量组小鼠肝脏系数明显降低(P<0.01);各项指标改善幅度最大的情况集中在葛花解酲汤或葛根散,其TBA、ALT、GSH等指标与石膏汤比较具有显著差异(P<0.01)。结论:酒精可导致小鼠细胞破坏和脏器肿胀明显,3首方剂对稳定肝细胞,减少肝细胞破坏具有重要作用,葛花解酲汤和葛根散对乙醇导致小鼠急性肝损伤的保护作用比石膏汤强。     

中性红法检测巨噬细胞吞噬功能的实验条件的优化

目的:优化中性红法检测巨噬细胞(Mψ)吞噬功能的实验条件,为快速筛选Mψ吞噬功能调节成分提供更为稳定的细胞模型.方法:以小鼠腹腔Mψ吞噬中性红的能力作为模型检测指标,考察细胞收集方法、细胞浓度、贴壁孵育时问、培养时间、LPS浓度、中性红浓度、检测波长等因素对检测结果的影响,优化中性红法检测Mψ吞噬功能的实验条件.结果:本实验条件下,PBS等三种清洗液收集小鼠腹腔Mψ的效率没有显著性差异(P>0.05);Mψ贴壁孵育时间以3h为宜;Mψ加样浓度可选择在2～8×106/ml范围内;LPS在30μg/ml时达到最佳刺激效应;中性红浓度选择0.09%能够满足检测要求;加入中性红后的反应时间以3h的OD值最高:检测波长以520nm时OD值最高.结论:优化中性红法检测Mψ吞噬功能,对快速筛选Mψ吞噬功能调节成分具有实用价值.     

病原生物与免疫学教学基本功训练的实践与探索

病原生物与免疫学是本院临床与护理专业必修的一门专业基础课,包括免疫学、微生物学、寄生虫学3部分。在学习过程中,学生普遍反映免疫学抽象难懂,微生物学与寄生虫学琐碎难记。为进一步提高教学质量,调动学生学习的主动性和积极性,激发学生学习课程的兴趣和热情,近年来本教研室结合实际,不断加强教师教学基本功历练,从课前准备、课堂讲授、课后反思等方面对此进行了不断的实践和探索,收到了较好的效果,现总结如下。     

诱导型神经干细胞移植对颅脑创伤后神经营养因子分泌的影响

目的研究诱导型神经干细胞（iNSCs）移植对颅脑创伤（TBI）后神经营养因子分泌的影响。 方法采用自由落体脑打击装置制备雄性成年C57BL/6小鼠TBI模型，将神经功能缺损评分（NSS）4~8分者纳入TBI组，按照随机数字表法分为iNSCs移植组（12只）和磷酸盐缓冲液（PBS）处理组（9只）。同时设置假手术（sham）组（9只）。于TBI后12 h，用脑立体定向仪将含1×10⁶个iNSCs单细胞悬液或等体积PBS分别移植到TBI小鼠脑内，于移植后7 d处死动物。分别取脑组织mRNA（3只/组）行逆转录定量实时聚合酶链反应（RT-qPCR）和蛋白（6只/组）行酶联免疫吸附测定（ELISA），检测脑源性神经营养因子（BDNF）和胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）表达量；取iNSCs移植组（3只）动物脑组织行免疫荧光染色，观察iNSCs移植物分泌BDNF和GDNF。 结果RT-qPCR示：相比sham组，TBI小鼠脑组织中Bdnf和Gdnf基因转录水平明显降低；相比PBS处理组，iNSCs移植组TBI小鼠脑组织中Bdnf和Gdnf基因转录水平明显升高，差异具有统计学意义（P<0.05）。ELISA示：相比sham组，TBI小鼠脑组织中BDNF和GDNF蛋白表达水平明显降低；相比PBS处理组，iNSCs移植组TBI小鼠脑组织中BDNF和GDNF蛋白表达水平明显升高，差异具有统计学意义（P<0.05）。免疫荧光染色示iNSCs移植组TBI小鼠脑内可见绿色荧光蛋白标记的iNSCs移植物迁移到达脑损伤区并表达BDNF和GDNF。 结论经脑立体定向移植iNSCs可在TBI后脑组织中合成分泌神经营养因子BDNF和GDNF，发挥神经营养作用。     

偏最小二乘法建立三磷酸腺苷二钠注射液近红外快速定量模型

目的:建立可用于现场快速筛查、监督药品质量的三磷酸腺苷二钠(ATP-2Na)注射液的快速定量分析模型。方法:收集全国16家生产企业共73批ATP-2Na注射液样品,采集近红外光谱图,利用化学计量学偏最小二乘法(PLS)将光谱信息与含量数据关联,建立通用型定量分析模型,并进行方法学验证。结果:全部样品经聚类分析分为Ⅰ类、Ⅱ类,分开建立两组均质样本定量模型。建立的模型(Ⅰ)交叉验证均方根误差(RMSECV)为1.73%,相关系数为0.951 2;模型(Ⅱ)RMSECV为1.55%,相关系数为0.943 1。模型验证试验中,经配对t检验,两种模型分别对18批和14批样品的预测值与真实值比较,差异无统计学意义。结论:建立的模型能够快速、准确地预测不同生产企业ATP-2Na注射液中ATP-2Na的含量,并能对不合格样品进行预测,达到现场监督快速测定样品含量的目的。     

蠲痹汤对类风湿关节炎大鼠模型细胞因子的影响

目的:观察蠲痹汤对类风湿关节炎大鼠关节炎指数(AI)、血清细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-4、IL-10水平的影响,探讨蠲痹汤治疗类风湿关节炎的免疫机制。方法:将大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、甲氨喋呤对照组、蠲痹汤高/低剂量组,制备类风湿关节炎大鼠模型,给药组以不同剂量蠲痹汤灌胃,对照组代以生理盐水,检测AI、血清细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-4、IL-10的表达。结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠血清TNF-α、IL-1β水平明显上升,IL-10、IL-4水平明显下降(P0.01);与模型对照组比较,蠲痹汤高、低剂量均能明显降低实验大鼠AI和血清TNF-α、IL-1β水平(P0.05或P0.01),对IL-4水平无影响(P0.05),蠲痹汤高剂量组能显著升高模型大鼠IL-10水平(P0.01)。结论:蠲痹汤对类风湿关节炎模型大鼠TNF-α等炎症因子具有干预作用,提示蠲痹汤可通过抑制炎性细胞因子TNF-α、IL-1的表达,促进抗炎细胞因子IL-10的分泌,从而达到治疗RA的效果。     

房水流动粒子图像测速测试中跟随性示踪粒子选择的实验研究

目的 在房水流动粒子图像测速(particle image velocimetry,PIV)测试中,选择最佳跟随性示踪粒子是展示真实流场的必要前提.本文探讨眼球房水慢流PIV测试中不同粒子的跟随性并选择最佳显影效果的示踪粒子.方法 依据几何相似性原理,设计并加工5倍于真实人眼大小的眼球模型;分别选择10μm空心玻璃珠,以及1μm、3μm、7μm和20～50μm粒径荧光粒子作为示踪粒子,运用PIV系统在眼球模型上进行流场测试,比较粒子的空间分布规律探讨粒子跟随性问题,确定可用于房水流场测试的最佳示踪粒子.结果 荧光粒子的粒径越大,沉淀的速度越快,则沉淀量越多.1μm的荧光粒子跟随性好,但显影效果不佳.3μm荧光粒子随着测量时间的增加,沉淀最不明显,跟随性和显影效果最佳.结论 示踪粒子直径对其在眼球房水流动中的跟随性和显影效果具有显著影响.基于当前的PIV设备,3μm荧光粒子是房水流场测试最佳的示踪粒子.本研究可为采用PIV技术进行体外房水流场测量提供一定的实验基础.