乙肝病毒基因型及病毒变异对慢性肝病进展的影响

目的进一步研究HBV基因型及病毒变异与慢性肝病进展的关系。方法用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）以及部分PCR产物测序的方法对401例慢性HBV感染者，包括112例HCC患者（HCC组）。129例无症状携带者（ASC组），70例肝硬化患者（LC组）和90例慢性肝炎患者（CH组）进行HBV基因分型以及BCP和PC变异检测。结果401例慢性HBV感染者中181例发生B基因型感染，220例发生C型感染。HCC组中C型分布高于其他3个疾病组；C基因型感染者BCP变异多于B基因型；B基因型感染者PC变异多于C基因型：同时BCP变异发生率随着病程进展而递增：在ASC组、CH组、LC组和HCC组里的BCP变异阳性率分别为22．4％、35．0％、50．0％、74．1％。C1与C2亚型相比，C1有较高BCP变异阳性率，而C2有较高PC变异发生率。结论BCP变异与肝病进程存在依从关系，因此BCP变异的检测对慢性HBV感染的疾病进展和临床结局的评估有重要意义。     

中国乙肝病毒B基因亚型的分布

目的调查乙肝病毒B基因亚型在我国的分布情况。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法并结合测序法,对来自全国7个中心的共511份B基因型感染血清样本进行了检测。结果511份B基因型样本经亚型分析,确定全部为Ba亚型,未发现Bj亚型的存在。结论流行于我国南方及北方地区的乙肝病毒B基因型毒株绝大部分为Ba亚型,Bj亚型非常罕见。     

乙型肝炎病毒基因型S基因PCR-RFLP分型方法的建立

目的 建立乙型肝炎病毒（HBV）S基因聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）的基因型分型方法并验证其准确性。方法 比较GenBank中HBV223株各基因型全序列的S基因氨基酸及核苷酸序列,设计限制性内切酶BsrⅠ、StyⅠ、DpnⅠ和HpaⅡ鉴别HBVA-F基因型的方法,选择经前SPCR-PFLP的方法已鉴定出的HBVB、C和D基因型标本各30例,用此方法鉴定验证,并随机对HBVB、C和D基因型各3株标本进行S基因测序证实。结果 两种PCR-RFLP及S基因测序鉴定HBV基因型结果一致。结论 S基因PCR-RFLP的方法能够准确鉴定HBV基因型,此方法灵敏性高,特异性强,且酶切图谱简明单一,易于识别,适宜于HBＶ基因型的流行病学调查。     

乙型肝炎e抗体阳性的无症状携带与慢性活动性肝炎的乙型肝炎病毒X及前C基因变异

抗 ＨＢｅ阳性的ＨＢＶ感染者存在两种临床现象 ,即表现为ＨＢＶ低复制水平的无症状携带 (ＡｓＣ)和ＨＢＶ高复制水平的慢性活动性肝炎 (ＣＡＨ)。两者均可存在ＨＢＶ前Ｃ终止密码的变异[1] 。可能在ＨＢＶ基因中 ,存在其他重要变异而导致此两种不同的临床现象。本研究旨对抗 ＨＢｅ阳性的ＡｓＣ和ＣＡＨ各 14例ＨＢＶＸ区序列测定 ,研究Ｘ基因变异与病变活动的关系。一、资料与方法1.病人 :14例ＡｓＣ和 14例ＣＡＨ均为我院 1998～ 1999年门诊或住院收治的病人 (表 1)。ＡｓＣ和ＣＡＨ组病例均为ＨＢｓＡｇ( )、抗 ＨＢｅ( )。诊断符…     

乙型肝炎病毒基因型及e抗原状态对聚乙二醇干扰素抗病毒疗效的影响

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)不同基因型及乙型肝炎e抗原(HBeAg)对聚乙二醇干扰素治疗慢性乙型肝炎(CHB)应答率的影响。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP) 方法,分析42例用聚乙二醇干扰素治疗的CHB患者基因型及HBeAg不同状态时对抗病毒治疗的影响。结果不同基因型对聚乙二醇干扰素的应笞率不同,B基因型的持续应答率为66.7%(12/18),C基因型持续应答率为27.3%(3/11)。HBeAg阴性患者的持续应答率为87.5%(7/8),HBeAg阳性患者为38.1%(8/21), P<0.05。结论HBV基因型及HBeAg的不同状态是预测聚乙二醇干扰素疗效的重要因素,且后者比前者的意义更大。     

新疆维吾尔族慢性乙型肝炎病毒感染者病毒基因型及亚型分布特点

目的 了解新疆维吾尔自治区(简称新疆)维吾尔族慢性HBV感染者基因型、基因亚型分布情况及其与预后的关系.方法 采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性分析方法,分析109例新疆维吾尔族慢性HBV感染者感染病毒的基因型及基因亚型.多标本均数比较采用单向方差分析.结果 109例新疆维吾尔族慢性HBV感染者,其中慢性乙型肝炎88例,乙型肝炎肝硬化17例,肝癌4例.13基因型HBV感染者9例,占8.3%,C基因型感染者50例,占45.9%,C/D基因型重组体32例,占29.4%,D基因型感染者18例,占16.5%,C基因型、C/D基因型重组体为主要基因型.经过聚合酶链反应限制性片段长度多态性分析及测序检测,鉴定9份B基因型HBV,均为Ba亚型.50例C基因型HBV感染者病毒基因亚型分布情况:Cl亚型27例,占54%,C2亚型23例,Cl亚型比C2亚型感染者多.在慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化、肝癌患者中,HBV Ba基因亚型感染者分别为8例(9.1%)、1例(5.8%)和0例;C2基因亚型感染者分别为17例(19.3%)、8例(47.5%)和2例(50%);C/D基因型感染者分别为29例(33.0%)、2例(11.9%)和1例(25%),随着病情加重,Ba基因亚型和C/D基因型感染者所占比例呈下降趋势,C2基因亚型感染者所占比例增加.结论 新疆地区维吾尔族慢性HBV感染者以Cl基因亚型为主,新疆维吾尔族慢性HBV感染者存在C/D基因型重组体.C2基因亚型HBV感染预示病情严重,预后差.     

乙型肝炎病毒C/D重组体毒株的三种鉴定方法

目的针对HBV C/D重组体在我国西部地区尤其是藏族人群中广泛流行,基因分型时易被错分为D基因型等问题,建立相对准确的鉴定C/D重组体的方法。方法以来自西部地区的25例HBV感染者为例,分别通过PCR片段长度法、S和前C/C基因序列进化树分析法、全基因序列精细分析法对C/D重组体进行鉴定比较。结果 D基因型存在33 bp缺失,在S基因区酶切或测序的基础上,通过跨缺失区段的PCR产物长度可区分D与C/D重组体,该法简单易操作,适于大样本初筛;S和前C/C基因序列进化树分析法可明确鉴定C/D重组体,准确度高;全基因序列精细分析法可对重组类型和重组位点进行精确分析,结果最为可靠。结论根据研究目的不同,应综合考虑运用几种C/D重组体鉴定方法,提高研究的效率和结果的可靠性。     

快速检测乙型肝炎病毒C基因启动子联合点突变

研究滞酶链反应－限制性片段长度多态性分析法检测乙型肝炎病毒Ｃ基因启动子区Ｔ１７６２／Ａ１７６４联合点突变的有效性。方法将４４例慢性乙型肝炎患者的血清ＰＣＲ－ＲＦＬＰ结果同测序结果进行综合分析。结果４４份忆性乙型肝炎患者的血清中,有１２份血清ＰＣＲ－ＲＦＬＰ的结果为单纯突变株感染;１０份为突变株与野生株混合感染;２２份在单纯野生株感染与测序结果相吻合。结论ＰＣＲ－ＲＦＬＰ检测ＨＢＶ／Ｃ基因启动子区Ｔ     

广州戊型病毒性肝炎暴发株和散发株部分序列比较

目的了解广州某部新兵连戊型病毒性肝炎（戊型肝炎）暴发流行的分子病毒学特征,并与当地散发毒株比较,以查找病原可能来源.方法用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法,对抗HEV-IgM阳性的34例暴发性戊型肝炎及46例散发性戊型肝炎患者的血清和粪便标本进行HEV RNA检测,并对HEV RNA阳性标本的基因开放读码框（ORF）2部分片段进行克隆测序分析.结果 34例暴发流行病例标本中检测出12株病毒,46例散发病例标本中检到2株.经克隆测序分析,各暴发毒株的核苷酸同源性为95.3%～100%;氨基酸同源性为94.0%～100%.且暴发毒株和散发毒株的核苷酸及氨基酸的同源性也较高,分别为95.3%～99.3%和94.0%～100%;暴发毒株和散发毒株与各型中的标准株相比,与Japl株同源性最高,其核苷酸同源性为92.0%～95.3%,氨基酸同源性为96.0%～100.0%.进化树分析提示本次戊型肝炎暴发流行病毒株与戊型肝炎病毒基因Ⅳ型距离最近.结论 本次戊型肝炎暴发流行的病原可能来于广州本地;广州地区戊型肝炎流行毒株属戊型肝炎基因型Ⅳ型.     

HBV基因型和S基因序列特点与慢性乙型肝炎患者HBsAg/抗-HBs共存关系

目的探讨HBV基因型及S基因序列特点与慢性乙型肝炎（CHB）患者HBsAg和抗-HBs共存的内在相关性以及HBsAg＋/抗-HBs＋的发生机制及意义。方法共收集49例HBsAg＋/抗-HBs＋CHB患者的血清HBVDNA样本,采用PCR-RFLP及测序法鉴定其基因型,并与267例HBsAg＋/抗-HBs-CHB患者的HBV基因型分布进行比较。对6例HBsAg＋/抗-HBs＋CHB患者（Ⅰ组）的HBVS基因进行克隆测序,并与HBsAg＋/抗-HBs-CHB患者（Ⅱ组）进行对比,分析变异种类及频率等的差异。结果 HBsAg＋/抗-HBs＋CHB患者HBV基因型B、C及B/C混合感染的构成比分别为63.3%（31/49）、26.5%（13/49）、10.2%（5/49）,而对照组上述构成比分别为52.8%（141/267）、46.1%（123/267）、1.1%（3/267）,两组构成比差异有统计学意义（P〈0.01）。Ⅰ组HBsAg各区段,特别是主要亲水区（MHR）的变异位点明显多于Ⅱ组;发现了若干新变异、少见的W196和C69终止突变,1例患者检测到G145R变异。某些患者HBsAgMHR-2（包含a决定簇）并未发现变异。结论 HBV基因型的差异及HBsAg变异增多可能是部分CHB患者出现HBsAg＋/抗-HBs＋的原因之一;基因型B或B/C混合感染相对更易出现HBsAg＋/抗-HBs＋。HBsAg变异增多是CHB患者出现HBsAg＋/抗-HBs＋的重要机制之一。某些患者HBsAgMHR-2并无变异,提示HBsAg/抗-HBs共存还存在其他机制。