沉默核干因子基因表达对HL-60白血病细胞凋亡的影响

本研究探讨靶向沉默白血病细胞的核干因子（nucleostemin,NS）基因对HL-60白血病细胞凋亡的影响。用T7启动子介导体外合成两条短发夹状干扰RNA（NS-shRNA）,以其中沉默NS基因作用强的一条NS-shRNA转染HL-60细胞,同时以与NS基因序列无关小干扰RNA转染HL-60细胞作对照,应用RT-PCR检测被转染的HL-60细胞NS-mRNA抑制效果,倒置显微镜下观察活体细胞形态变化,Wright-Giemsa染色观察细胞胞体和细胞核形态学变化,以流式细胞仪（FCM）和TdT介导的dUTP缺口末端标记技术（TUNEL）测定凋亡细胞数并计算凋亡阳性率。结果表明：HL-60细胞被NS-shRNA转染48小时后NS-inRNA阻断率达到74．94％,凋亡率分别为（25．32±3．06）％和（27．3±3．21）％,对照组仅（3．12±0．38）％和（3．30±1．52）％,转染组与对照组比较差异显著（P〈0．01）。Wright-Giemsa染色显示细胞发生核碎裂并出现“凋亡小体”。结论：靶向沉默NS基因表达可诱发和促进HL-60白血病细胞发生凋亡,为NS基因作为恶性肿瘤治疗的候选靶基因奠定了理论基础。     

脂联素与胰岛素抵抗相关疾病的研究

目的 了解各胰岛素抵抗相关疾病患者血清脂联素水平的变化,并探讨其与各疾病的胰岛素抵抗指数的相互影响.方法 以2型糖尿病(DM)、冠状动脉粥样硬化(AS)和代谢综合征(MS)为例,筛选符合各组条件的患者,以及符合条件的健康体检者作为对照,检测人体测量参数和生活指标,并测定空腹血糖、空腹胰岛素和各项生化指标.用放免法测定脂联素.用最小稳态模型计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),计算公式为:空腹血糖(mmol/L)×空腹胰岛素(mU/L)/22.5.结果 DM、AS和MS组的胰岛素抵抗指数明显高于正常对照组,而脂联素水平明显降低.并且各组的两个指标呈显著的负相关.结论 血浆脂联素与DM、AS和MS的发生可能有密切关系.     

葡激酶对非酒精性脂肪性肝病大鼠的治疗作用观察

目的 探讨葡激酶对高脂饲料喂养所致大鼠脂肪肝的治疗作用.方法 Wistar大鼠36只,随机均分为正常喂养(NC)组、高脂喂养模型(FL)组、高脂喂养治疗(TFL)组.后两组采用高脂饲料喂养法建立非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠模型,TFL组在高脂饲养90d后.在继续高脂饲养的同时隔天尾静脉注射葡激酶0.5mg/kg,20d后处死大鼠.测定各组血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、丙二醛(MDA)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平;计算肝脏指数(肝湿重/体重),测定肝组织过氧化物酶增殖体激活受体α(PPAR-α)mRNA表达情况并行组织病理学检查.结果 FL组肝脏指数(3.77±0.27)明显高于TFL组(3.48±0.29,P<0.05)和NC组(2.57±0.14,P<0.01),TFL组明显高于NC组(P<0.01).与NC组比较,FL组大鼠血清TG、TC、LDL、AST水平明显升高(P<0.05或P<0.01),肝组织PPAR-α mRNA表达明显减少(P<0.01).与FL组比较,TFL组大鼠血清TG、TC、LDL、MDA、AST水平明显降低P<0.05或P<0.01,肝组织PPAR-α mRNA表达明显增加(P<0.05).TFL组肝脏指数为3.48±0.29,明显高于FL组(3.77±0.27,P<0.05)和NC组(2.57±0.14,P<0.01),FL组明显高于NC组(P<0.01).结论 葡激酶能够缓解高脂饲养大鼠的脂肪肝症状,其作用机制可能与上调肝脏PPAR-α基因表达水平有关.     

内镜金属钛夹在消化道恶性肿瘤定位中的应用

目的 探讨经内镜金属钛夹定位早期消化道恶性肿瘤及由恶性肿瘤引起的肠梗阻的患者在放置金属支架中的应用.方法 对在内镜下发现的33例早期消化道恶性肿瘤患者及3例由恶性肿瘤引起的肠梗阻患者,经内镜将安装好的金属钛夹放置器经操作孔送入肿瘤旁的正常组织,释放金属钛夹以达到定位的目的 ,必要时拍腹部平片检查定位情况.结果 36例患者放置金属钛夹均成功,成功率100%.金属钛夹能有效准确的对消化道恶性肿瘤予以定位.结论 内镜下放置金属钛夹定位能确保手术部位及放置肠梗阻支架准确到位.     

沉默核干细胞因子基因对HL-60白血病细胞形态学和细胞化学影响的检测

目的探讨体外沉默白血病细胞核干细胞因子(NS)基因转染后细胞形态学和细胞化学特征改变与细胞生物学行为的关系。方法体外合成NS特异性短发夹状RNA(shRNA)转染HL-60白血病细胞,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹法评价NS基因沉默和NS蛋白合成抑制效果,倒置显微镜观察活体细胞形态,Wright-Giemsa染色观察细胞形态学改变,血液分析仪测定细胞大小、粒度和均一性变化,髓过氧化物酶(MPO)、α-乙酸萘酯酶(α-NAE)和过碘酸-雪夫反应(PAS)测定反映细胞化学特征变化。结果沉默NS基因导致HL-60白血病细胞发生了形态学变化,细胞核和细胞质出现了进一步分化和成熟特征,Wright-Giemsa染色观察到细胞核碎裂现象,血液分析仪发现细胞变得大小不均并有较多核碎裂和无核的细胞碎片存在,细胞内定MPO、α-NAE酶活性和PAS反应增强。结论沉默NS基因表达能促使HL-60细胞进一步分化、成熟,细胞形态学和细胞化学特征发生相应改变,这些形态学变化可以作为研究细胞生物学行为改变的依据之一。     

内镜金属钛夹在消化道恶性肿瘤定位中的应用

目的 探讨经内镜金属钛夹定位早期消化道恶性肿瘤及由恶性肿瘤引起的肠梗阻的患者在放置金属支架中的应用.方法 对在内镜下发现的33例早期消化道恶性肿瘤患者及3例由恶性肿瘤引起的肠梗阻患者,经内镜将安装好的金属钛夹放置器经操作孔送入肿瘤旁的正常组织,释放金属钛夹以达到定位的目的 ,必要时拍腹部平片检查定位情况.结果 36例患者放置金属钛夹均成功,成功率100%.金属钛夹能有效准确的对消化道恶性肿瘤予以定位.结论 内镜下放置金属钛夹定位能确保手术部位及放置肠梗阻支架准确到位.     

肿节风药材采收部位与最佳采收期的研究

目的确定肿节风药材的采收部位与最佳采收期。方法分别将采得的不同季节肿节风药材分为根、茎、叶3部分,以60％乙醇为溶剂回流提取。采用高效液相色谱法测定不同季节肿节风药材各部位中反丁烯二酸和异嗪皮啶的含量;以紫外分光光度法测定其总黄酮的含量。结果肿节风药材叶中总黄酮含量最高,茎中反丁烯二酸含量最高,根中异嗪皮啶含量最高,综合考虑3种有效成分,以6月、8月含量最高。结论6月、8月份为肿节风药材的最佳采收期,以全株采收为宜。     

卡介菌多糖核酸辅助左氧氟沙星治疗老年呼吸道衣原体感染的临床疗效

目的 观察卡介菌多糖核酸辅助左氧氟沙星治疗老年呼吸道衣原体感染的临床疗效及其对患者外周血Treg/Th17、炎症因子的影响。方法 选取老年呼吸道衣原体感染患者108例,随机分为左氧氟沙星组、免疫疗法和联合组,每组36例。三组均给予常规治疗,左氧氟沙星组给予左氧氟沙星静滴后口服,200 mg/次,2次/天;免疫疗法组给予卡介菌多糖核酸肌内注射,1 mL/次,隔日1次;联合组参照上法给予左氧氟沙星联合卡介菌多糖核酸肌内注射;三组均连续治疗14 d。比较三组的临床疗效,呼吸困难、体温、咳嗽、肺部啰音改善时间,外周血Treg、Th17细胞比例及Treg/Th17,血清白细胞介素17(IL-17)、白细胞介素6(IL-6)、转化生长因子β(TGF-β)水平,并记录三组不良反应发生情况。结果 左氧氟沙星组痊愈5例、显效10例、有效8例、无效13例,总有效率63.89%(23/36),免疫疗法组分别为6、11、7、12例及66.67%(24/36),联合组分别为11、12、11、2例及94.44%(34/36);联合组总有效率明显高于左氧氟沙星组和免疫疗法组（P均<0.05）。联合组呼吸困难、...     

超声特征联合免疫组化构建列线图预测早期乳腺癌前哨淋巴结转移

目的探讨联合原发病灶的超声特征及免疫组化指标构建列线图预测早期乳腺癌前哨淋巴结转移(SLNM)的临床意义。方法回顾性纳入577例早期乳腺癌患者作为训练组及内部验证组,纳入183例早期乳腺癌患者作为外部验证组。分析原发灶超声特征及免疫组化特征,筛选预测早期乳腺癌SLNM的独立预测变量,基于上述独立预测变量绘制列线图,并进行内部验证和外部验证。结果病灶大小、位置、边缘及HER-2为SLNM的独立预测变量。基于上述四个变量绘制列线图及ROC曲线,AUC为0.856,根据约登指数确定截断值为0.76(对应总分约208分)。内部验证和外部验证均显示列线图具有较高的预测能力。结论基于原发病灶的超声特征及免疫组化指标构建列线图术前评估早期乳腺癌SLNM的状态在一定程度上可指导早期乳腺癌患者的个体化治疗。     

基于现代学徒制的高职护理专业人才培养模式实践研究

目的 探索现代学徒制背景下校院深度融合的护理专业人才培养的新路径。方法 结合医院护理岗位要求进行课程体系模块化重构,应用临床新技术、新规范更新课程标准及课程内容,打造优势互补、双向服务的现代学徒制导师团队,加强校院深度融合下的 “医院病房+校内实训室”“双基地”建设。结果 构建了“三方联动、四共切入、五双育人”的1.5年学校学习+1.5年医院在岗培养”的人才培养模式,形成了“1+1+N”（1名医院导师+1名学校教师+3~5名学生）的校院交替训教、在岗培养的双元育人教学模式。结论 基于现代学徒制的高职护理专业人才培养模式探索实践,构建了较为完善的技术应用人才培养模式,形成了完善的课程体系,强化了教师能力建设,建设了校院深度融合的实训基地,实现双主体育人的人才培养模式创新。