伤寒沙门菌细胞壁缺陷突变株16SrRNA基因的检测与分析

目的 探讨伤寒沙门菌细胞壁缺陷突变株的菌种相关性或亲缘性.方法 分离提取伤寒沙门菌细胞壁缺陷突变株及其亲代细菌型的染色体DNA,采用16SrRNA基因引物进行PCR扩增,对扩增的16SrDNA产物进行琼脂糖凝胶电泳和碱基序列测定.结果 经PCR扩增后伤寒沙门菌细胞壁缺陷突变株及其亲代细菌型均获得了大小约230 bp的特异性片段,其产物经琼脂糖凝胶电泳可见在230 bp处出现与其亲代细菌型一致的DNA条带,碱基序列测定显示具有同其亲代细菌型一致的核苷酸序列.结论 伤寒沙门菌的细胞壁缺陷突变株虽然丧失了常规细菌学可检测的绝大多数表型特征,但检测16SrRNA基因能快速、灵敏地对其进行菌种相关性或亲缘性的分析与鉴定,并且也有利于对各种不能自发返祖的细菌稳定L型进行菌种相关性或亲缘性的分析与鉴定.     

药食同源中药在心血管疾病预防中的应用探析

目的 了解药食同源中药在心血管疾病治疗中的应用现状,以期为心血管疾病的健康管理及预防提供参考。方法 以2018年卫健委公布的110种药食同源中药名单为依据,检索中国知网数据库中发表的关于中药治疗心血管疾病的临床研究文献,对其中涉及的应用频率较高的药食同源中药进行分析。结果 研究共纳入698篇文献,涉及药食同源中药51味。其中应用频数排在前5的药食同源中药依次为人参、黄芪、姜黄、葛根、山楂。结论 药食同源中药人参、黄芪、姜黄、葛根、山楂在心血管疾病防治中具有较好的药效作用,在心血管疾病的健康管理与防治中具有开发利用价值。     

ANKRD13A在肝癌组织中的表达及对其生物学行为的影响

目的 检测锚蛋白重复结构域13A蛋白(ankyrin repeat domain protein 13A)在肝癌患者肝组织中的表达情况,并探究其对肝癌细胞增殖和迁移能力的影响及可能的分子机制。方法 利用免疫组织化学、Western blot法以及实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)检测肝癌患者癌组织和癌旁组织中ANKRD13A的表达水平,并分析其表达水平与患者临床病理参数的相关性;在肝癌细胞系SMMC-7721中,转染目标质粒或空载质粒,通过嘌呤霉素筛选,建立稳定过表达ANKRD13A或空载质粒的细胞系。在体外,分别利用细胞迁移实验、划痕愈合实验以及CCK-8细胞增殖实验,检测过表达ANKRD13A对细胞迁移和增殖能力的影响;在体内,通过裸鼠皮下成瘤实验,进一步验证ANKRD13A对肝癌细胞增殖能力的影响;最后通过信号通路分析,探究ANKRD13A调控肝癌细胞生物学行为可能的分子机制。结果 ANKRD13A在肝癌组织中的表达显著低于对应的癌旁组织,并且其表达水平与患者的BCLC分期...     

结核分枝杆菌稳定L型利福平耐药性基因的研究

目的探讨细胞壁缺陷结核分枝杆菌形成利福平耐药性的分子机制。方法将结核分枝杆菌分别接种于含利福平与不含利福平的非高渗透压液体培养基内培养,逐日在倒置显微镜下观察L型的形成情况。L型形成和生长后,滤过培养物分离L型,在不含诱导剂的非高渗液体培养基内传代培养获得L型纯培养物。用结核分枝杆菌利福平耐药性相关基因(rpoB基因)引物分别对自发形成的稳定L型及诱导形成的稳定L型的染色体DNA进行PCR扩增,扩增产物分别以琼脂糖凝胶电泳及PCR-DS方法进行检测和分析。结果结核分枝杆菌既可在非高渗透压培养基内自发形成细胞壁缺陷细菌并成为稳定L型,也可在最低抑菌浓度的利福平作用下发生细胞壁缺陷并成为稳定L型。PCR扩增产物琼脂糖凝胶电泳可见自发形成和诱导形成的稳定L型均形成与其亲代细菌型一致的DNA条带,序列分析显示具有与其亲代细菌型相同的碱基序列。结论结核分枝杆菌在非高渗透压培养基内既可以自发地形成L型,也可以被利福平诱导形成L型。结核分枝杆菌稳定L型具有明显的利福平耐药性,但其相关rpoB基因并没有发生突变。提示结核分枝杆菌的利福平耐药性变异不一定同rpoB基因突变有关,细胞壁缺陷也是导致结核分枝杆菌形成利福平耐药性的一个重要机制。     

会议论文文摘

GBE50预处理对急性心肌缺血大鼠心功能和钙调控蛋白表达的影响 目的：观察银杏酮酯（GBE50）对急性心肌缺血大鼠心功能和钙调控蛋白表达的影响,探讨GBE50抗心肌缺血的作用及机制。方法：随机将36只SD大鼠分成4组：假手术组,缺血模型组,GBE50组[100 mg/（kg.d）×7],丹参组。采用左前降支冠状动脉结扎造急性心肌缺血模型;左心室插管记录心功能;     

髂动脉支架植入联合股-腘动脉转流术治疗Ⅲ型Leriche综合征

2007年3月至2008年11月,我院采取术中同时行髂动脉腔内成形和支架植入联合股-腘动脉转流术,治疗Ⅲ型Leriche综合征老年病人11例,均取得了较好的效果. 1 资料与方法 1.1 一般资料本组男性9例,女性2例,年龄71～88岁,平均76岁;11条肢体均严重缺血.主要临床症状:间歇性跛行4例(跛行距离＜50 m),静息痛7例(其中2例合并肢端溃疡).主要伴发病:5例同时伴有高血压、冠心病和糖尿病;2例同时伴有高血压、脑梗死和糖尿病、冠心病;2例伴有冠心病;1例伴有脑梗死,1例伴有糖尿病.术前腹主动脉、双下肢动脉CTA显示:右侧髂、股动脉病变8例;左侧髂、股动脉病变3例.     

盐酸纳络酮治疗II型呼吸衰竭疗效观察

我院2003年以来共收治COPD急性加重并Ⅱ型呼吸衰竭患者44例,随机分为两组,治疗组23例,对照组21例,在积极抗感染、平喘、吸氧、扩血管、维持水电解质及酸碱平衡,激素应用等综合治疗基础上,治疗组用盐酸纳络酮0.8mg静注后2.4mg+5%GS 300m l静滴,每日1次,伴肺脑或缺氧严重者每日2次;对照组用尼可刹米0.75~1.5和洛贝林9~15mg+5%GS500m l静滴,每日1次,两组疗程均为5天,分别观察治疗后症状体征及24小时血气分析。结果,治疗组症状体征好转快,肺脑患者神志恢复时间短,24小时PH、PaO2明显上升,PaCO2明显下降,故认为纳络酮可作为一种新型的呼吸兴奋剂应用于临床。     

卵黄抗流感病毒抗体的制备

<正> 据文献报道,用抗原免疫鸡,可从其所产的鸡蛋卵黄中制取相应特异性的IgG抗体,其含量高于血清IgG抗体。我们参考类似的方法,成功地制取特异性流感病毒抗体,并对其活性进行了分析。 材料和方法 一、流感病毒抗原:为本教研室传代保藏的FM_1鼠肺适应株。用常规方法接种鸡胚尿囊腔传代,至病毒血凝滴度达1:320以     

诺如病毒衣壳蛋白重组人3型腺病毒的构建

目的 制备表达诺如病毒衣壳蛋白的重组人3型腺病毒.方法 将诺如病毒衣壳蛋白基因(Noro-orf2)克隆到腺病毒穿梭载体pBSE3CMV-egfp上,与线性化人3型腺病毒骨架质粒pBRAdv3共电转化感受态大肠杆菌BJ5183,使其在细菌内发生同源重组,带Noro-orf2基因的表达框置换腺病毒E3区,PCR及酶切筛选得到重组腺病毒质粒,将重组腺病毒质粒转染Hep-2细胞进行包装,获得感染性的重组腺病毒粒子,免疫组化分析重组腺病毒中诺如病毒衣壳蛋白的表达.结果 同源重组后经酶切和PCR鉴定证明插入Noro-orf2基因的重组腺病毒质粒pBRAdv3E3dNor成功构建,并经转染包装得到高滴度的重组腺病毒Adv3E3dNor,免疫组化证明诺如病毒衣壳蛋白得到表达.结论 成功构建表达诺如病毒衣壳蛋白的重组3型腺病毒Adv3E3dNor,为研制人3型腺病毒-诺如病毒双价疫苗奠定了基础.     

广州检出星状病毒4型的全基因组序列测定及分析

目的 探讨广州地区儿童感染的星状病毒基因组分子结构特点和基因型.方法 参考GenBank上的星状病毒基因组设计分段扩增引物,进行RT-PCR分段扩增星状病毒基因组,克隆于T载体上,序列测定,用Clustal W和DNAStar软件分析基因组序列.结果 星状病毒HASTVgz01全基因组为6721 bp,提交到GenBank上的序列号为DQ344027,其中5＇端非编码区（5＇UTR）长82bp,3＇端非编码区末端长81 bp,病毒基因组编码区全长6558个核苷酸,分别编码ORF1a、ORF1b、ORF2,ORF1a基因长2763 bp（83～2845 nt）,ORF1b基因长1557bp（2785～4332 nt）,其中ORF1a、ORF1b两基因有71个核苷酸的重叠区;ORF2全长2316 nt,位于基因组中4325～6640 nt.ASTVgz01与GenBank中8种基因型星状病毒的ORF2基因氨基酸序列同源性比较发现,HASTVgz01与4型的同源性为93%,其他的同源性在61%～70%之间.结论 广州地区儿童腹泻感染的星状病毒HASTVgz01全基因组为6721bp,GenBank序列号为DQ344027,HASTVgz01与4型星状病毒的ORF2基因氨基酸序列比较同源性为最高,确认HASTVgz01是4型星状病毒.