冷诱导RNA结合蛋白在亚低温下的神经保护作用研究

目的研究亚低温下冷诱导RNA结合蛋白(CIRP)对受损海马神经元的保护作用机制。方法将原代培养的海马神经元分为3组:对照组、损伤组和治疗组。氧糖剥夺55min制作海马神经元损伤模型,损伤组和治疗组在氧糖剥夺55min后分别置于37℃和32℃培养24h。收集各组细胞,MTT检测各组细胞的存活率,荧光定量PCR和Western blot检测CIRP的mRNA和蛋白的表达水平,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blot检测Caspase-3蛋白表达水平。结果与对照组比较,损伤组细胞生存率明显下降[(43.3±8.1)%vs(100.0±12.7)%,P<0.05],治疗组细胞生存率明显升高[(71.8±13.6)%vs(43.3±8.1)%,P<0.05],与损伤组比较,治疗组细胞凋亡率下降[(19.5±0.6)%vs(30.7±2.5)%],CIRP的mRNA蛋白表达明显升高,Caspase-3蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论亚低温下CIRP表达水平升高,通过抑制细胞凋亡发挥神经元保护作用,是亚低温脑保护作用途径之一。     

RECIST1.0和mRECIST在原发性肝癌TACE术后疗效评价中的对比研究

目的：对原发性肝癌患者经皮肝动脉化疗栓塞（TACE）术前、术后采用RECIST1.0和mRECIST测量比较,为原发性肝癌患者TACE术后提供更准确的疗效评价方法。方法：70例确诊为原发性肝癌患者至少做过3次化疗栓塞术,并于TACE术前1周内、术后1月、3月内行CT四期扫描,至少两名放射科医生参与阅片,根据RECIST1.0和mRECIST评价标准评估治疗的缓解程度。两种方法评价缓解率的比较采用χ^2检验。结果：采用RECIST1.0标准评价的完全缓解（CR）为0例、部分缓解（PR）为9例、疾病稳定（SD）为38例、疾病进展（PD）为23例,缓解率为12.86%;采用mRECIST标准评价原发性肝癌TACE术后CR为12例、PR为15例、SD为22例、PD为21例,缓解率为38.57%,经χ^2检验,P〈0.05,二者有显著性统计学差异。结论：采用mRECIST标准对原发性肝癌TACE作疗效评价,强调治疗后动脉期强化的存活肿瘤测量,对判断后续治疗有一定的指导意义。     

缺血后适应对兔楔形心肌块缺血再灌注模型室性心律失常的影响

目的:观察缺血后适应对家兔左室楔形心肌块缺血再灌注模型室性心律失常诱发率的影响,并探讨其维持电生理稳定的机制。方法:将30只家兔随机分为对照组、缺血再灌注组和缺血后适应组,每组10只。缺血再灌注组和缺血后适应组在建立好楔形心肌块模型稳定1h后,停止台氏液灌注45min,缺血再灌注组继续灌注台氏液2h;缺血后适应组复灌初期采用复灌10s、停灌10s方案,重复6次后,恢复台氏液灌注2h。记录心肌块内、外膜心肌细胞跨壁动作电位、跨壁心电图、有效不应期(ERP)等电生理参数以及室性心律失常诱发率。实验结束后利用免疫荧光方法检测去磷酸化缝隙连接蛋白43(NP-Cx43)。结果:①对照组、缺血再灌注组、缺血后适应组的室性心动过速(VT)诱发率分别为0、80%(8/10)、10%(1/10),两两比较均差异有统计学意义(均P<0.05)。②与缺血再灌注组比较,缺血后适应组的跨室壁离散度、ERP等电生理参数得到改善,均差异有统计学意义(均P<0.05)。③免疫荧光显示对照组心肌NP-Cx43分布量极少;缺血再灌注组NP-Cx43含量增加且多分布在心肌细胞端端连接处;缺血后适应组NP-Cx43与缺血再灌注组相比含量要明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:缺血后适应可显著降低室性心律失常诱发率,改善缝隙连接蛋白重构可能是其维持心脏电生理稳定的机制之一。     

结核分枝杆菌鼠李糖基转移酶基因(wbbL)的克隆和表达

[目的 ]从结核分枝杆菌基因组DNA中克隆鼠李糖基转移酶基因 (rhamnosyltransferase ,wbbL) ,并利用 pET16b表达载体在大肠杆菌BL2 1(DE3)菌株中高效表达wbbL基因产物 -鼠李糖基转移酶。 [方法 ]利用PCR方法从结核分枝杆菌H 37Rv菌株的基因组DNA中扩增出wbbL基因 (90 6bp)并克隆到 pMD18-T克隆载体中 ,经DNA序列测定证实为正确的基因后 ,将其亚克隆到表达载体 pET16b中并在大肠杆菌BL2 1(DE3)中表达wbbL基因产物。 [结果 ]1)从结核分枝杆菌H37Rv菌株的基因组DNA中PCR扩增出正确的wbbL基因 ;2 )经IPTG诱导wbbL基因在BL2 1(DE3)中高效表达出wbbL基因产物。 [结论 ]1)用具高保真性的LATaqDNA聚合酶所扩增的结核分枝杆菌的wbbL基因经BLAST分析与结核分枝杆菌基因组数据库 (http :/ /www .sanger .ac .uk)中所公布的序列完全一致 ;2 )从大肠杆菌BL2 1(DE3)所获得的大量鼠李糖基转移酶 ,为进一步纯化该酶并研究其酶促反应动力学特性提供了物质保障。     

参附方对颅脑损伤大鼠亚低温治疗期并发肺水肿的影响

目的:研究参附方对颅脑损伤(TBI)大鼠亚低温(MH)治疗期肺水肿的发生率、严重程度及相应炎性因子的影响。方法:将120只大鼠进行颅脑损伤造模后,按随机数字表法将其分为模型组、亚低温组、中药组、亚低温加中药组,每组30只。模型组大鼠尾静脉注射生理盐水,亚低温组大鼠尾静脉注射生理盐水并给予亚低温治疗,中药组大鼠尾静脉注射参附注射液,亚低温加中药组大鼠尾静脉注射参附注射液并给予亚低温治疗,每天1次,连用3天。观察4组大鼠出现肺水肿的数量、肺水肿的严重程度,并测定肺水肿大鼠的肺组织湿干比,检测肺组织白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。结果:与模型组比较,亚低温组大鼠肺水肿发生率、肺湿重、肺湿干重比、肺组织中IL-6、TNF-ɑ含量显著升高,差异均有统计学意义(P0.05)。与亚低温组比较,中药组和亚低温加中药组大鼠肺水肿发生率、肺湿重、肺湿干重比、肺组织中IL-6、TNF-ɑ含量显著降低,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:参附方可降低TBI大鼠MH治疗期肺水肿的发生率及其严重程度,其作用机制可能是参附方通过自身温阳益气作用拮抗了MH治疗时的阴寒凝滞,提高机体的免疫力,从而减轻肺水肿。     

新型骶髂拉力钉生物力学性能评价

目的 研究一种具有螺旋刀片结构新型骶髂拉力钉的生物力学性能。 方法 用临床中常用的骶髂经皮拉力钉作为对照。使用聚氨酯材料模拟松质骨,利用Instron力学试验机测试对比抗拔出性能。然后使用骨盆标本,以正常骨盆、单侧骶髂关节损伤骨盆、骶髂经皮拉力钉-单钉修复、骶髂经皮拉力钉-双钉修复骶髂关节损伤为对照,分析新型骶髂拉力钉修复正常站立姿态骶髂关节损伤的静态刚度和动态稳定性。 结果 新型骶髂拉力钉组拉力钉拔出后的聚氨酯材料破坏更小。新型骶髂拉力钉抗拔出的有效把持位移显著大于骶髂经皮拉力钉（P﹤0.05）。但骶髂经皮拉力的最大抗拔出力显著大于新型骶髂拉力钉（P﹤0.05）。骶髂关节损伤修复后,采用1枚骶髂新型骶髂拉力钉刚度显著高于骶髂经皮拉力钉-双钉修复组（P﹤0.05）。骶髂关节损伤组的位移振幅最大,其次为正常组;其余组别的位移振幅较为接近,但差异具有统计学意义（P﹤0.05）。新型骶髂拉力钉修复的动态稳定性最优,略优于骶髂经皮拉力钉-双钉修复组,骶髂关节损伤组的稳定性最差。新型骶髂拉力钉能有效修复骶髂关节损伤。结论 骶髂新型骶髂拉力钉能更有效地把持松质骨,具有一定的临床实用性。     

新型磺酰胺类肿瘤抑制剂DHW-51诱导宫颈癌细胞HeLa凋亡的作用机制

目的从新合成的甲磺酰胺类化合物库中筛选出一种新型肿瘤抑制剂DHW-51,初步探讨DHW-51对宫颈癌细胞HeLa凋亡的影响及其作用机制。方法采用细胞增殖抑制实验检测DHW-51作用HeLa细胞12、24和48h时的细胞存活率,分为对照组和10、15、20、25、30μmol/L实验组共6组;流式细胞术检测不同浓度DHW-51诱导HeLa细胞的凋亡率及细胞周期;检测细胞内Caspase 3、Caspase 8和Caspase 9活性及细胞凋亡相关蛋白pro-Caspase 3、pro-Caspase8和poly ADP-ribose polymerase-DNA修复酶(PARP)的表达,分析DHW-51的作用机制。结果DHW-51对HeLa细胞的增殖具有良好抑制作用。当DHW-51浓度为25μmol/L作用时间为24h时,HeLa细胞的存活率仅为(27.34±1.891)%,与对照组相比差异有统计学意义,F=1.369,P<0.001;随着浓度增加,作用时间延长细胞存活率更低。DHW-51能够有效诱导HeLa细胞凋亡,呈浓度和时间依赖关系;当DHW-51浓度为25μmol/L作用时间为24h时,细胞凋亡率为(92.10±1.683)%,与对照组相比差异有统计学意义,t=43.715,P<0.001;随着时间的延长,晚期凋亡的比例逐步增加,而对细胞周期则没有影响。当DHW-51浓度为20μmol/L时,Caspase 3[(1.87±0.063)%,t=12.43,P<0.001]和Caspase 9[(2.0±0.069)%,t=9.519,P<0.05]的活性增加,与对照组相比,差异有统计学意义;Caspase 8的活性无变化。蛋白质印迹结果显示,当DHW-51浓度为20μmol/L时,pro-Caspase 3[(0.33±0.005)%,t=-89.334,P<0.001]和pro-Caspase 9[(0.19±0.009)%,t=-48.308,P<0.001]蛋白表达量下调,pro-Caspase 8蛋白表达无变化,PARP[(0.35±0.012)%,t=14.961,P<0.001]出现断裂带。结论新型磺酰胺类化合物DHW-51可以诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡。作用机制初步推测主要是通过由线粒体介导的Caspase依赖途径诱导HeLa细胞凋亡,进而实现抑制肿瘤细胞生长,这一过程与细胞周期阻滞无关。     

关节镜下髌骨外侧支持带松解联合微骨折术治疗髌股关节炎

目的 探讨关节镜下髌骨外侧支持带松解联合微骨折术治疗髌股关节炎的临床疗效。方法 选取2018年1月至2021年1月期间徐州市中医院骨伤科收治的20例髌股关节炎患者,采用关节镜下髌骨外侧支持带松解联合微骨折术治疗,其中男9例,女11例;年龄为47～66岁,平均(55.14±7.56)岁。结果 20例患者均获随访,随访时间为6～12个月,平均(8.32±1.92)个月,均无神经血管损伤、切口感染等情况发生。术后疼痛视觉模拟评分、Lysholm评分和Kujala评分均较术前有显著提高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 关节镜下髌骨外侧支持带松解联合微骨折术是治疗髌股关节炎的有效保膝治疗方法之一,创伤小、恢复快,值得临床推广应用。     

不同扫描方案联合不同锐利卷积核对冠状动脉支架显示的影响

目的 探讨不同扫描方案联合不同锐利卷积核在辐射剂量上的差异和对冠状动脉支架图像显示的影响.方法 将60例经皮冠状动脉介入治疗术后患者随机分成前瞻性心电门控合并以患者体质量指数?(BMI)?为分类标准的低电压低剂量对比剂扫描模式组?(新扫描模式组)?和回顾性心电门控合并固定剂量对比剂扫描模式组?(常规扫描模式组),每组3...     

颅内血肿微创清除术治疗老年高血压脑出血的疗效

目的探讨颅内血肿微创清除术对老年高血压脑出血的应用价值。方法按照随机分组的方法将85例患者分为观察组(接受颅内血肿微创清除术治疗)和对照组(保守治疗),观察两组临床治疗有效率,统计比较两组并发症的发生情况。结果观察组治疗总有效率高于对照组,两组比较差异有统计学意义(93.3%vs82.5%,P<0.05);观察组并发症总发生率低于对照组,两组比较差异有统计学意义(20.0%vs 47.5%,0.05)。结论颅内血肿微创清除术具有操作迅速、手术疗效好、安全性高等优点,值得临床推广应用。