高氧肺损伤中肺细胞凋亡及JNK信号通路调控机制

目的:观察高氧暴露下肺组织细胞凋亡和磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)蛋白表达的变化,并探讨JNK信号转导通路对高氧诱导的肺细胞凋亡的调控机制.方法: 48只3 wk龄Wistar大鼠随机分为空气对照组、高氧暴露3,7,14d组、空气 JNK抑制剂干预组、高氧暴露7 d JNK抑制剂干预组.光镜下观察肺组织病理学改变,末端标记法(TUNEL)分析肺组织细胞凋亡的变化,免疫组化检测肺组织p-JNK的表达分布,Western Blot检测肺组织p-JNK蛋白质的表达含量.结果: 与空气对照组比较,高氧暴露各时间点组肺组织出现典型急、慢性肺损伤的病理学改变,肺组织细胞凋亡指数和p-JNK蛋白表达含量均显著增加(P<0.05),肺组织p-JNK阳性细胞明显增多.JNK抑制剂SP600125在空气和高氧暴露下均能明显阻断JNK的激活(P<0.05),SP600125干预后高氧暴露肺组织细胞凋亡指数显著减少(P<0.05).结论: 细胞凋亡是高氧肺损伤的一个重要病理组织学特点.JNK信号转导通路在高氧肺损伤中被激活,可能发挥促细胞凋亡效应.     

白藜芦醇苷对大鼠局灶性脑缺血的保护作用

目的 研究白藜芦醇苷(PD)对大鼠局灶性脑缺血的保护机制。方法 采用改良的线栓法制作大鼠大脑中动脉栓塞模型(MCAO)。将健康成年大鼠随机分为3组：假手术组、缺血模型组、缺血前PD处理组。测定脑组织含水量、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—Px)、过氧化氢酶(CAT)及一氧化氮合酶(NOS)活性，并进行病理组织学检查。结果 PD能明显提高缺血脑组织中SOD、GSH—Px、CAT活性，降低MDA含量，减轻脑水肿，并有降低缺血脑组织中NOS活性的趋势，病理组织学检查显示，PD能改善脑缺血造成的大鼠脑组织损伤。结论 PD对大鼠局灶性脑缺血有明显的保护作用，其机制可能是通过有效的拮抗自由基损伤，提高脑组织抗氧化能力来实现的。     

小儿呼吸衰竭时血循环内皮细胞检测及其意义

检测１６例呼吸衰竭（呼衰）患儿血中循环内皮细胞（ＣＥＣ）含量。结果：呼衰急性期ＣＥＣ为（１１．８１±０．２２）×１０６／Ｌ，恢复期为（５．１７±１．４０）×１０６／Ｌ，正常对照组为（４．１０±１．０９）×１０６／Ｌ，急性期与恢复期及对照组比较均有显著性差别（Ｐ均＜０．０１）。作者认为血管内皮细胞（ＶＥＣ）损伤参与了呼衰的发生发展；ＣＥＣ可作为呼衰治疗效果及预后判断的预警信号；进一步探索保护、稳定肺ＶＥＣ免遭致病因子损伤的药物，在呼衰救治中将有十分重要的意义     

急性缺血性脑损伤后脑组织磷脂酶A2活性和脑细胞游离钙离子浓度变化及尼莫地平的保护作用

背景：磷脂酶A2能被Ca^2＋激活，而被激活的磷脂酶A2又能使Ca^2＋内流或细胞内Ca^2＋释放，形成恶性循环，使神经细胞游离Ca^2＋浓度持续增加，导致神经细胞严重损伤。目的：探讨尼莫地平对磷脂酶A2激活致急性缺血性脑损伤中的保护作用。设计：完全随机对照实验。单位：重庆医科大学儿童医院ICU。材料：实验于2001—01／2003—10在重庆医科大学儿科研究所完成，选择30只雄性Wistar大鼠，随机分为假手术组、缺血组、尼莫地平干预组，每组10只。方法：假手术组：大鼠仪在麻醉状态下分离右侧颈总动脉，不予阻断血流。缺血组：腑缺血前30min，每只大鼠腹腔注射2mL生理盐水。尼莫地平干预组：脑缺血前30min，每只大鼠腹腔注射0．2g／L的尼莫地平2mg／kg。3组大鼠自缺血开始至处死的时间均为120min。大鼠在麻醉状态下断头处死，取脑组织检测磷脂酶A2活性、脑细胞游离Ca^2＋浓度、脑组织水含量及检测脑组织中Ⅱ类A型分泌型磷脂酶A2和Ⅳ类胞浆型磷脂酶A2mRNA表达的改变。主要观察指标：①各组大鼠脑组织磷脂酶A2活性。②各组大鼠脑细胞游离Ca^2＋浓度。⑧各组大鼠腑含水量。④各组大鼠脑组织中Ⅱ类A型分泌型磷脂酶A2和胞浆型磷脂酶A2表达情况。结果：30只大鼠均进入结果分析。①各组大鼠脑组织磷脂酶A2活性：缺血组、尼莫地平干预组均高于假手术组[（57．8&;#177;7．2），（42．5&;#177;6．1），（17．1&;#177;5．3）％，P〈0．05-0．01]，尼莫地平干预组低于缺血组（P〈0．05）。②各组大鼠脑细胞游离Ca^2＋浓度：缺血组、尼莫地平干预组均高于假手术组[（775．8&;#177;105．5），（497．2&;#177;45．9），（103．8&;#177;10．3）μmol／L，P〈0．05～0．01]，尼莫地平干预组低于缺血组（P〈0．01）。⑧各组大鼠脑含水量：缺血组、尼莫地平干预组均高于假手术组[（82．9&;#177;0．5），（80．0&;#177;1．1），（72．1&;#177;0．01）％，P〈0．05-0．01]，尼莫地平干预组低于缺血组（P〈0．05）。④假手术组脑组织中无明显Ⅱ类A型分泌型磷脂酶A2mRNA表达，胞浆型磷脂酶A2mRNA表达水半很低。缺血后120min后脑组织中出现Ⅱ类A型分泌型磷脂酶A2mRNA表达，胞浆型磷脂酶A2mRNA表达水平明显增强。尼莫地平干预组与缺血组比较，Ⅱ类A型分泌型磷脂酶A2mRNA表达水平无明显降低，胞浆璎磷脂酶A2mRNA表达水平有所降低。结论：尼莫地平可降低缺血后脑细胞游离Ca^2＋浓度，脑组织中磷脂酶A2的活性和脑含水量，但不能明显抑制脑缺血后Ⅱ类A型分泌型磷脂酶A2mRNA及胞浆型磷脂酶A2mRNA的表达。     

小儿肺炎支原体肺炎120例临床分析

目的 探讨小儿肺炎支原体肺炎(MPP)的临床特点、治疗方法 及疗效,以提高临床诊治水平.方法 回顾性分析重庆市南川区人民医院2009至2012年收治的120例MPP患儿的临床资料.结果 在120例患儿中,男66例,女54例;5岁以下患儿占36.7%(44例);常见的临床症状为:咳嗽占85.0%(102例)、发热占83.3%(100例),年龄较小的患儿更容易出现喘息;体征:双肺呼吸音增粗或减低占40.0%(48例),湿性啰音占22.5%(27例),喘息占8.3%(10例);肺外系统受累占64.2%(77例),心血管系统受累占36.7%(44例),消化系统受累占26.7%(32例);胸片以小斑片或扇形浸润、节段性实变浸润最常见;血清肺炎支原体IgM检测占98.3%(118例).患儿经阿奇霉素序贯治疗均预后良好.结论 儿童MPP临床表现复杂,且易累及肺外系统,但及时准确诊断及合理治疗多数预后良好.     

窒息新生儿尿中炎症细胞因子改变与肾小管损伤的关系

目的 :探讨炎症细胞因子在新生儿窒息后肾损伤中的作用。方法 :采用酶联免疫吸附 (EL ISA)法检测窒息患儿尿中白介素 8(IL 8)、IL 6、肿瘤坏死因子 α(TNFα)水平 ,并同时测定尿中反应肾小管损伤的指标 β2 微球蛋白 (β2 MG)、N 乙酰 β D 氨基葡萄糖苷酶 (NAG)和 γ 谷胺酰转肽酶 (γ GT)水平。结果 :IL 8、IL 6、TNFα、β2 MG、NAG、γ GT在轻度窒息组和重度窒息组较正常对照组以及重度窒息组较轻度窒息组均显著升高 (P均 <0 .0 5 ) ;在窒息组内 ,尿中各炎症因子水平与肾小管各损伤指标之间均呈显著正相关关系 (P均 <0 .0 5 )。结论 :窒息可诱导机体发生全身炎症反应综合征 ,进而导致窒息后肾损伤的发生。尿中炎症细胞因子水平的测定是判断窒息程度及肾损伤的重要指标。     

铜绿假单胞菌XN-1随机重组子文库的构建及其在疫苗抗原筛选中的应用研究

目的构建铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)XN-1的全基因组文库,筛选铜绿假单胞菌新的疫苗候选抗原。方法提取我国分离的临床PA XN-1菌株全基因组,Sau3AⅠ酶切成随机片段后经连接至Bam HⅠ酶切后的pMal-c5x载体,转化至X-blue获得随机重组子。随机重组子经IPTG诱导后使用溶菌酶裂解,收集含有融合的麦芽糖结合蛋白(MBP)的随机重组子的裂解上清,制成含有PA全基因组的蛋白随机文库。通过ELISA方法分别检测单个随机文库蛋白的免疫反应性。将经典的PA强反应抗原PcrV做为参照,分别计算单个随机抗原的相对反应强度并进行比较。提取反应较强的重组子的质粒,测定DNA序列后进行翻译和比对,得到整个强反应性抗原的氨基酸信息。结果成功构建PA XN-1的全基因组文库,筛选到强反应性抗原13个,其中4个抗原的反应强度超过PcrV,分别为Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase D、Phosphoenolpyruvate-protein phosphotransferase(PtsP)、Phosphate-starvation-inducible E和Very short patch repair endonuclease。结论基于高效表达系统的PA全基因组文库构建成功,可用于PA及其它病原的疫苗候选抗原的筛选研究。     

休克患儿磷脂酶A_2及细胞因子作用研究

目的探讨血清磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）及细胞因子在休克发生发展中的作用及意义。方法采用ＥＬＩＳＡ法检测１６例休克患儿及２０例健康儿童血清ＰＬＡ２、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－ａ）及白细胞介素（ＩＬ～６）含量,并作临床脏器功能监测、血乳酸、血糖、动脉血气分析及血小板计数。结果休克患儿血清ＰＬＡ２（０．８９±０．６３ｍｐ／Ｌ）、ＴＮＦ－ａ（０、６３±０．２５ｍｇ／Ｌ）及ＩＬ－６（６．８４±１９７ｍｇ／Ｌ）浓度均较正常对照组（０．１７±０．０２ｍｇ／Ｌ、０．０８±０．０１ｍｇ／Ｌ、２．３２±０．６２ｍｇ／Ｌ）明显升高（Ｐ＜０．００１）;多器官功能衰竭组（ＭＳＯＦ）上述３项指标（ＰＬＡ２１．１７±０．７０ｍｇ／Ｌ、ＴＮＦ－ａ０．９１±０．２７ｍｐ／Ｌ、ＩＬ－６７．７０±１．４０ｍｇ／Ｌ）均显著高于单器官功能衰竭组（ＳＯＦ）（ＰＬＡ２０．４８±０．０７ｍｇ／Ｌ、ＴＮＦ－ａ０．４７±０．０５ｍｇ／Ｌ、ＩＬ－６５．５５±０．７０ｍｇ／Ｌ）,死亡组明显高于治愈组。结论ＰＬＡ２水平与病情轻重有关,可作为早期预测ＭＳＯＦ发生的参数、评估治疗效果及预后。选择性投用ＰＬＡ２抑制剂可能成为治疗休克的有效方法。     

持续供氧经鼻气管内插管法的临床应用及分析

目的解决经鼻气管内插管过程中导管下鼻困难、咽后壁损伤及缺氧等问题。方法将氧气管置入气管导管内作引导导芯,在持续供氧下行经鼻气管内插管。结果４７例患儿气管导管均顺利地通过咽后壁插入气管内,避免了插管损伤;操作过程中患儿心率稳定,氧饱和度较插管前明显提高。结论经鼻气管内插管操作简单,效果良好,适用于初学插管者和估计插管困难病例。     

核转录因子κB与脑缺血再灌注损伤

脑缺血再灌注损伤(CIRI)是由兴奋性(氨基酸)中毒、氧化应激、细胞内钙超载、炎症反应和细胞凋亡(AP)等多种因素参与的病理过程[1].以往对CIRI机制的研究主要集中在氧化应激、兴奋性(氨基酸)中毒、细胞内钙超载等方面,近年来随着分子生物学的发展,发现CIRI与炎症反应和细胞凋亡也有着密切的关系.