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微生物组合生物合成药物的研究进展与趋势 总被引:1,自引:0,他引:1
50年来抗生素在人类疾病治疗中发挥了重要作用,今后的几十年里它们也将是关键的治疗剂。尽管在过去的20年中通过靶向筛选发现了一些微生物药物,但是这种筛选方法很难发现新类型药物。组合生物合成可以弥补这种不足,通过基因工程方法改造微生物基因和酶,产生新的抗生素,发现那些在自然界中不能发现的药物。 相似文献
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探讨航天技术对必特霉素基因工程菌的育种效果。我国返回式搭载卫星对基因工程必特霉素菌种进行了航天育种,共搭载4个菌株以沙土、甘油、斜面等不同方式,经受航天环境条件处理后计算其孢子存活率、营养缺陷型出现率及菌株的发酵效价。在本实验条件下菌株的存活率均很低,尤其是沙土方式的致死率为100%,甘油及斜面孢子的致死率分别为99.79%~100%和99.81%~100%。营养缺陷型出现率为1.65%。存活菌株的负突变率高于正突变率。经筛选从408株正突变株获得了发酵效价提高11.3%~14.5%的菌株。航天技术有可能应用于基因工程必特霉素的育种,但适于其育种的空间条件必须经过详尽而细致的研究和控制。 相似文献
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糖多孢红霉菌表达载体pZMW的构建 总被引:8,自引:5,他引:3
目的:构建能够在糖多孢红霉菌中稳定存在的表达性载体。方法:用PCR方法从糖多孢红霉菌染色体上扩增红霉素抗性基因启动子PermE作为表达载体的启动子,并利用pSET152质粒上链霉菌染色体整合位点(attP)和安普霉素抗性基因,构建了染色体整合型糖多孢红霉菌表达载体pZW。结果:pZMW表达载体能够整合到链霉菌和糖多孢红霉菌染色体上,并能够在链霉菌和糖多孢红霉菌体内表达硫链丝菌素抗性基因tsr。结论:pZMW表达载体能够在糖多孢红霉菌中表达外源基因。 相似文献
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(下简称KM),是从一株放线菌4281号菌丝中分离到的复合物,属于蒽环类的抗肿瘤抗菌素,但它和所有已知的蒽环类抗肿瘤抗菌素又有所区别。产生菌的分离和鉴别:产生菌4281号是将土壤悬液接种到含有链霉素的特定培养基中分离而得,在琼脂中对革兰氏阳性细菌有抑制作用,对大肠杆菌也有微弱作用;从菌丝中分离的抗菌素,经证明属于蒽环类化合物,具有抗肿瘤作用。 4281号的气生菌丝白色至玫瑰色,孢子链短,呈单轴排列,孢子链通常卷曲成圈或 相似文献
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就近年链霉菌分子遗传学研究中以A因子(A-factor)为代表的自调节物质对链霉菌形态发育、抗生素产生的调控的分子机制及双组分调节系统的研究等方面作简要概述。A因子调节链霉素产生的级联反应的关键环节已全部解析,双组分调节系统的研究逐渐揭示链霉菌与真核生物基因调控相似的复杂性和精密性。 相似文献
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目的建立一种对苯安莎类抗生素特异的颜色反应早期鉴别方法。方法根据碱性处理苯安莎类抗生素,使其安莎链与苯环连接的酰胺键开裂后化合物呈紫色的原理,建立了将发酵液粗提品进行薄层色谱层析后采用2.0mol/LNaOH溶液喷涂显色的早期鉴别方法;以格尔德霉素为例,在硅胶板上的检测灵敏度为4μg。结论采用该颜色鉴别反应方法:①对两株确证为新的格尔德霉素产生菌Streptomyces sp.4-4以及Streptomyces sp.3-57进行了佐证;②对吸水链霉菌Streptomyces hygroscopicus 17997的一株格尔德霉素生物合成后修饰基因阻断变株CT-1中产生的格尔德霉素前体物及其类似物,在硅胶板上进行了快速定位和初步鉴别。 相似文献
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从北京医院临床分离的铜绿假单胞菌,经药敏试验确证对头孢唑林及氨苄西林耐药的菌株691中,提取总DNA,分别用BamHⅠ和Sau3AⅠ部分酶切后,与BamHⅠ酶工的载体pACYC184(CP^R,TC^R,4.2kb)连接,转化大肠杆菌HB101,在含氯霉素(CP)50μg/ml和ABPC100μg/ml的选择性LB琼脂平板上筛选,获得了稳定性耐ABPC的菌落,从中提取质粒DNA,并经酶切分析,证明 相似文献
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目的 从700多株海洋沉积物分离得到的细菌中筛选安莎类抗生素和6-脱氧己糖(6DOH)糖基化修饰的次级代谢产物产生菌.方法 以3-氨基-5-羟基苯甲酸(AHBA)合酶基因和dTDP-葡萄糖-4,6-脱水酶基因为靶标,分别进行安莎类抗生素和6DOH糖基化修饰的次级代谢产物产生菌的分子筛选.对AHBA合酶及dTDP-葡萄糖-4,6-脱水酶基因阳性的菌株发酵液及提取物进行抗菌、抗肿瘤、抗病毒活性分析.采用利福霉素抗性及氢氧化钠显色初步鉴定安莎类化合物;采用α-萘酚硫酸显色初步鉴定6DOH糖基化修饰的化合物.利用16S rRNA序列对部分阳性菌株进行系统发育分析.结果 共获得39株AHBA合酶基因阳性和10株dTDP-葡萄糖-4,6-脱水酶基因阳性菌株.阳性菌株中,78%具有不同程度的生物活性.化学初步鉴定结果表明:49%的AHBA合酶基因阳性菌株产生安莎类化合物:50%的dTDP-葡萄糖-4,6-脱水酶基因阳性菌株产生6DOH糖基化修饰的化合物.系统发育分析表明,大多数阳性菌株属于放线菌中的链霉菌属.结论 基因探针筛选可作为一种合理、有效的方法从海洋细菌中发现活性代谢产物. 相似文献
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基因工程丙酰螺旋霉素 总被引:1,自引:1,他引:0
以碳霉素4"异戊酰基转移酶基因(CarE)为探针,从麦迪霉素产生菌基因文库中,经菌落杂交获得阳性菌落pCN10F5。经分子杂交证明pCN10F5DNA的BamHI-BamHI8.0kb片段与CarE基因同源。将pCN10F5 BamHI8.0kb片段分别克隆到pIJ680、pWHM3,pWHM601质粒载体上,获得重组质粒p6F5,pWF5和PGF5。含上述重组质粒的螺旋霉素产生菌克隆菌株均产生与 相似文献