重组葡萄球菌肠毒素B突变体蛋白D9N的表达、纯化及生物学活性的研究

 目的表达、纯化重组葡萄球菌肠毒素B突变体蛋白D9N(rSEB-D9N),了解表达产物rSEB-D9N的细胞毒性、促淋巴细胞增殖和肿瘤生长抑制作用。方法不同浓度IPTG诱导SEB-D9N突变体原核表达系统pET32a-SEB-D9N-E.coliBL21DE3表达rSEB-D9N,经Ni-NTA亲和层析法纯化rSEB-D9N,10%SDS-PAGE和高效液相色谱检测其纯度。以Vero细胞为靶细胞,进行rSEB-D9N的细胞毒性作用,并计算TCID₅₀值。采用MTT法分别检测不同浓度的rSEB-D9N促人淋巴细胞增殖及抑制KB及MCF-7癌细胞株生长的作用。流式细胞术检测rSEB-D9N刺激人淋巴细胞后CD3、CD4、CD8的表达。结果rSEB-D9N表达产量约占细菌总蛋白30%,纯化后获得纯度为90.48%的rSEB-D9N。rSEB和rSEB-D9N对Vero细胞的TCID₅₀值分别为3.12,8.85μg,10.0,20.0mg·L^-1的rSEB-D9N具有显著的促PBMC增殖的作用(P<0.05),且主要上调CD3,CD4和CD8的表达。5.0～20.0mg·L^-1rSEB-D9N作用的PBMC上清对KB和MCF-7细胞生长均可产生明显抑制作用(P<0.05)。结论获得并纯化了重组葡萄球菌肠毒素B突变体蛋白(rSEB-D9N),其细胞毒性作用有所降低,但促人淋巴细胞增殖和抑制肿瘤细胞生长作用仍较强,可作为研制升白细胞、抗肿瘤相关药物的候选突变体。     

HIV-1慢性感染Jurkat细胞系的建立及其特性研究

目的建立艾滋病病毒Ⅰ型（HIV-1）慢性感染Jurkat细胞系,研究其生物学特性。方法参照文献方法改良,建立HIV-1ⅢB慢性感染Jurkat细胞系。其细胞系特性采用以下方法检测：光学显微镜观察细胞形态;流式细胞仪检测HIV-1ⅢB感染细胞的阳性率;噻唑蓝（MTT）法检测抗病毒药物对慢性感染细胞的毒性作用;酶联免疫吸附试验（ELISA）检测药物对慢性感染细胞中病毒复制的影响;合胞体形成方法检测药物对HIV-1ⅢB慢性感染细胞与正常细胞融合的阻断作用。结果成功建立了HIV-1慢性感染Jurkat细胞系（Jurkat/HIV-1ⅢB）,感染细胞阳性率〉90%。检测影响病毒复制各周期的抗病毒药物对Jurkat/HIV-1ⅢB细胞的作用,发现Jurkat/HIV-1ⅢB细胞具有HIV-1慢性感染细胞的生物学特征。结论成功建立Jurkat/HIV-1ⅢB细胞系,为抗HIV-1药物的研发和病毒感染机制研究提供了新的工具。     

胸腺癌11例

胸腺癌１１例王云华，黄锦胸腺癌临床少见。截至１９９０年止，国外仅约１５９例报道，而国内罕见报道。复习我院１０４例胸腺肿瘤资料，符合胸腺癌诊断者１１例，仅占１０．６％，现予以分析报道。临床资料１１例中，男６例，女５例。年龄２８～６９岁，平均４７岁。主要...     

smart跟踪软件技术在CT主动脉造影中的对比研究

目的探讨smart跟踪技术在主动脉CTA中的应用价值。方法对26例采用smart跟踪技术组与23例未采用smart跟踪技术组的主动脉造影图像效果进行对照比较。结果采用smart跟踪技术的组主动脉造影成功率高于未采用smart跟踪技术组。结论对于主动脉造影常规采用smart跟踪软件技术可提高主动脉造影的成功率。利于主动脉病变的诊断。     

介绍一种紫菀的薄层鉴别方法

紫菀（AstertataricusLf．）为常用中草药,有关紫菀的鉴别方法较少,已发表的方法一般均以紫菀酮等为对照品．作对照鉴别或用显色法观察斑点．而且大多数是鉴定药材的报导。笔者介绍一种以紧菀药材为对照品,于紫外灯（365nm）下观察荧光斑点的含紫菀药材制剂的鉴别方法。本法简便易行．为含紫菀的制剂中鉴定紫菀的可行方法。1对照品与供试品①对照药材：市售紫美药材。②供试品：含紫竞药材的样品制剂。③阴性对照品：不含紫免药材的样品制剂。2实验材料R方法①薄层极的制备：取青岛海洋化工厂生产的薄层用硅胶G加O．3％CMC－Na溶液自…     

股骨头缺血性坏死148例中西医结合治疗报告

目的　提高股骨头无菌性坏死的疗效 ,缩短疗程。并探讨中西医结合治疗股骨头缺血性坏死的作用机制。方法　采用中西医结合、内外合治的六联疗法对 1998年 6月至 2 0 0 2年 11月收治的 14 8例患者进行综合治疗。采用 95丹东成人股骨头缺血性坏死疗效评价标准及曾氏报导综合疗效评价参考标准。并用治疗前及治疗后 8周 ,分别对其中94例患者进行血液流变学、血脂的检测。结果　本疗法治愈 2 4例 ,治愈率 16 2 % ,显效 80例 ,有效 40例 ,无效 4例 ,总有效率达 97 3 %。全血高、中、低切粘度、血浆粘度、甘油三酯、总胆固醇 ,治疗前与治疗后有显著差异 (P <0 0 1)。结论　中西结合 ,内外合治的六联综合疗法 ,可以降低血脂 ,改善血液循环 ,促进坏死骨修复和新生骨再生。实践证明本疗法是切实可行 ,尤其是Ⅲ、Ⅳ期患者 ,可望提高疗效 ,缩短疗程。     

血必净注射液在老年人下肢骨折围手术期中的应用

目的 探讨血必净注射液(红花黄色素A、川芎嗪、丹参素、阿魏酸、芍药苷等)在老年性下肢骨折围手术期中的应用效果.方法 将90例纳入患者随机分为对照组和治疗组各45例.两组患者均予综合治疗,治疗组加用血必净注射液50 mL+生理盐水100 mL静脉滴注,2次/d,连用7d.分别检测2组治疗前及治疗后3d、7d的白细胞计数(WBC)、C-反应蛋白(CRP)、血小板计数(PLT)、凝血常规及肝肾功能.结果 治疗后7d患者的WBC、CRP、D二聚体、肝肾功能等主要检测指标均显著低于治疗前(P＜0.01),治疗组显著低于对照组(P＜0.01).结论 血必净注射液对老年性下肢骨折患者的白细胞计数、C-反应蛋白、血小板、凝血功能及肝肾功能异常有积极的改善作用,从而降低手术风险.     

骨内腱鞘囊肿的影像学表现

目的:探讨骨内腱鞘囊肿的影像学表现及诊断与鉴别诊断.方法:回顾性分析经手术证实的20例骨内腱鞘囊肿的临床及影像资料,均行X线、CT检查,2例行MRI检查.结果:X线、CT表现为邻近关节面的类圆形囊样透亮区,边界清晰,18例有完整硬化边,10例病灶内见粗细不均的条状骨性间隔,3个病灶通过裂隙与关节腔相通,CT值20～60 HU,MRI在T2WI和脂肪抑制序列均表现为高信号.结论:骨内腱鞘囊肿的X线、CT典型表现为骨内邻近关节面的囊状破坏,边界清晰硬化,MRI在T2WI和脂肪抑制序列均表现为高信号,结合发病部位和临床症状及影像学表现,对本病可作出正确诊断.     

多色荧光原位杂交技术的临床应用

目的 检测来源不明的额外标记染色体和衍生染色体。方法 用多色荧光原位杂交技术结合G显带技术和NOR技术,对1例47,XY,inv（9）（p11q13）,＋mar和1例46,XY,t（5;？）核型进行诊断。结果 病例1的额外标记染色体片段来源于15号染色体,患者核型为47,XY,inv（9）（p11q13）,＋SMC（15）。病例2的核型为46,XY,der（5）t（4,5）（q27;q35）。在此基础上对患者的核型—表型进行了分析。结论 多色荧光原位杂交技术结合细胞遗传学核型分析,对于来源不明的标记染色体和衍生染色体的诊断是非常有帮助的。     

某高校大学生休学及体育免修病因调查分析

随着高校人数的增加,大学生的健康状况越来越成为人们关注的重点.为了探寻我校大学生休学及体育免修的病因,明确后期健康教育工作重点,笔者对我校2003年至2007年在册大学生休学和体育免修病因进行了回顾性调查分析.