血管内皮细胞间连接蛋白VE-cadherin和β-连环蛋白在颅内动脉瘤中的表达

目的 观察血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)和β-连环蛋白(β-catenin)在SD大鼠和人颅内动脉瘤壁中的表达,探讨血管内皮细胞连接受损与颅内动脉瘤形成的关系.方法 建立肾性高血压诱导的SD大鼠颅内动脉瘤模型,获取8个SD大鼠颅内动脉瘤.另取15例颅内动脉瘤组织标本,应用免疫组织化学方法检测VE-cadherin在大鼠脑动脉瘤壁中的表达,以及VE-cadherin和β-catenin在人脑动脉瘤壁的表达.按照Martina的方法对血管内皮层免疫反应强度进行评分.结果 正常SD大鼠和人的脑动脉血管壁上内皮层完整,VE-cadherin呈棕褐色线样均匀表达.SD大鼠颅内动脉瘤壁上VE-cadherin表达减少,呈间断性非均匀分布.正常SD大鼠脑动脉血管壁和颅内动脉瘤壁免疫反应强度评分分别为2.40 ±0.55和1.38±0.51,两组间差异有统计学意义(t=3.41,P＜0.01).人颅内动脉瘤壁内皮排列紊乱,VE-cadherin和β-catenin表达也明显减少,分布不均匀或表达缺失.正常脑动脉与颅内动脉瘤VE-cadherin和β-catenin免疫反应强度评分分别为2.60±0.54/1.33±0.49和2.80±0.45/1.33±0.49,VE-cadherin和β-catenin在两者间差异均有统计学意义(t分别为4.88和5.91;P＜0.01).结论 颅内动脉瘤的形成过程中存在内皮细胞连接受损.

Abstract：

Objective To verify whether vascular endothelial intercellular gap injury takes part in the formation of intracranial aneurysms by assaying the expression of vascular endothelial intercellular gap proteins VE-cadherin and β-catenin in the rat experimental intracranial aneurysms and human intracranial aneurysms. Methods Twenty Sprague-Dawley rats were used for establishing a model of hypertension-induced experimental intracranial aneurysm. Eight aneurysmal changes were found in the junction of the anterior cerebralartery (ACA) and the olfactort artery (OA) of rats, and immunohistochemistry was performed to detect the expression level of VE-cadherin. The expression of VE-cadherin and β-catenin was also assayed by using immunohistochemistry in fifteen human intracranial aneurysms. Results The VE-cadherin expression was reduced obviously in the intracranial aneurysms of rats as compared with the nomal cerebral artery ( 1.38 ±0. 51 vs 2.40 ±0. 55 ,P ＜0. 01 ). In human intracranial aneurysms, the expression of VE-cadherin was lower than that in the human superficial temporal artery ( 1.33 ± 0. 49 vs 2. 60 ± 0. 54, P ＜0. 01 ). And the expression of β-catenin was also reduced obviously as compared with the controls ( 1.33 ±0. 49 vs 2. 80 ± 0. 45 ,P ＜0. 01 ). Conclusion Vascular endothelial intercellular gap injury may involve in the formation of intracranial aneurysms.     

免疫组化染色中某些抗体最佳修复方式探讨

目的 以存梢蜡块,选择最佳抗原修复液,而进行抗原修复,使抗原决定簇暴露,达到最理想染色结果 .方法 用柠檬酸缓冲液(pH 6.0)、EDTA缓冲液(pH 9.0),及高压加热法,胰蛋白酶消化对CD68、lysozyme,α-AT和S-100不同的抗体进行修复.消化,观杏抗原决定簇暴露.结果 3种抗原修复法的免疫组化切片,胰蛋白酶修复法阳性率显著高于高压加热法与微波加热法且染色背景清晰,高压加热法与微波加热法非特异性着色较深,阳性率低.结论 对不同的抗体选用不同的修复方法 可以达到最佳效果.     

免疫组化染色中某些抗体最佳修复方式探讨

目的以存档蜡块,选择最佳抗原修复液,而进行抗原修复,使抗原决定簇暴露,达到最理想染色结果。方法用柠檬酸缓冲液（pH6．0）、EDTA缓冲液（pH9．0）,及高胝加热法,胰蛋白酶消化对CD68、lysozyme、α—AT和S-100不同的抗体进行修复。消化,规合抗原决定簇暴露。,结果3种抗原修复法的免疫组化切片,胰蛋白酶修复法阳性率显著高于高胝加热法与微波加热法且染色背景清晰,高压加热法与微波加热法非特异性着色较深,阳性率低。结论对不同的抗体选用不同的修复方法可以达到最佳效果.     

清燥救肺汤对乌拉坦诱导肺癌模型鼠TGF-β1、Smad2和p38 MAPK的影响

目的:研究清燥救肺汤对乌拉坦诱导肺癌模型鼠TGF-β1、Smad2和p38 MAPK的影响。方法:选择清洁级KM小鼠,随机分为6组,即正常组、模型组、六味地黄丸4.6g/kg组、清燥救肺汤33.6g/kg、16.8g/kg、8.4g/kg组。除正常组外,其余各组小鼠腹腔注射乌拉坦800mg/kg,每周两次,连续五周,复制小鼠肺癌模型。给药与造模同时进行,1次/d,连续15周。清燥救肺汤33.6g/kg、16.8g/kg、8.4g/kg组、六味地黄丸4.6g/kg组分别给予等体积药物,正常组与模型组灌胃生理盐水。15周后,取肺脏检测。肉眼及镜下计数双肺小鼠肺肿瘤结节数,并计算小鼠肺肿瘤发生率;Western Blot测定肺组织TGF-β1、Smad2和p38 MAPK蛋白的表达;免疫组化检测肺组织TGF-β1、Smad2和p38 MAPK活性的表达。结果:清燥救肺汤(8.4、16.8、33.6g/kg)均能使肺肿瘤发生率从91.7%降至58.3~75.0%,平均肿瘤结节数从5降至3,明显降低肺癌模型鼠肺组织TGF-β1、Smad2和p38 MAPK蛋白的表达,并可使肺组织中TGF-β1、Smad2和p38 MAPK活性的表达也显著下降。结论:清燥救肺汤可能通过抑制TGF-β1、Smad2和p38 MAPK的过度表达,从而多靶点调控TGF-β1/Smad2及p38 MAPK等信号通路来实现延缓肺癌的发生发展及转移。     

二冬膏对急性肺损伤模型鼠TNF-α,IL-6含量及AQP-5蛋白表达的影响

目的:研究二冬膏对脂多糖(LPS)致急性肺损伤(ALI)模型鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白介素-6(IL-6)含量及水通道蛋白5(AQP-5)表达的影响。方法:将72只清洁级SD大鼠随机分为6组:正常组、模型组、二冬膏高、中、低剂量组、地塞米松组,每组12只。除正常组外,其余各组采用一次性尾静脉注射LPS 6 mg·kg-1复制ALI大鼠模型。首次给药在造模后0.5 h,1次/d,连续4 d。二冬膏高、中、低剂量组分别ig二冬膏10,5,2.5 g·kg-1;正常组与模型组ig生理盐水10 m L·kg-1,地塞米松组ip地塞米松0.01 g·kg-1。4 d后处死大鼠,取血清和肺组织检测。采用双抗体夹心-酶联免疫吸附(ABC-ELISA)法检测大鼠血清TNF-α,IL-6的含量,Western bloting测定大鼠肺组织AQP-5蛋白的表达,苏木素和伊红(HE)染色观察肺组织病理形态。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清TNF-α,IL-6含量明显升高(P0.01),肺组织AQP-5蛋白表达水平显著降低(P0.01)且肺部病理炎症增加。与模型组比较,二冬膏各组均能明显降低TNF-α,IL-6含量(P0.05,P0.01),显著升高肺组织AQP-5蛋白的表达(P0.05,P0.01)并且减轻肺部病理炎症。结论:二冬膏通过降低ALI模型鼠促炎因子TNF-α,IL-6含量,升高肺组织AQP-5蛋白的表达,改善肺部病理炎症,减轻肺水肿状态,从而有效防治急性肺损伤。     

低度恶性子宫内膜间质肉瘤临床病理分析

目的探讨低度恶性子宫内膜间质肉瘤（LESS）的临床病理学特征、诊断和鉴别诊断。方法分析16例LESS的临床病理特点,通过网状纤维染色、免疫组化染色研究其病理学特征。结果患者年龄26～68岁．平均42．5岁。LESS临床上主要表现为不规则的阴道流血。肿瘤组织成舌状浸润肌层,肿瘤细胞类似增殖期子宫内膜间质细胞。肿瘤内内有大量的似螺旋小动脉血管。网状纤维染色见网状纤维丰富,围绕瘤细胞生长。肿瘤细胞15例CD10阳性,14例ER阳性,15例PR阳性．5例actin阳性,CD34、CD117、Melan—A肿瘤细胞均阴性。结论LESS易误诊,确诊主要依靠组织病理学和免疫组织化学;病理形态上看似良好的低度恶性子宫内膜间质肉瘤．预后不一定好．