大鼠睾丸支持细胞的分离、纯化和鉴定

目的 培养高纯度的大鼠睾丸支持细胞,并应用检测ABP mRNA原位杂交方法加以鉴定.方法 选用18～22d龄SD雄性大鼠睾丸,采用0.25%胰蛋白酶、0.1%透明质酸酶、 0.1%胶原酶三酶依次消化法分离支持细胞,置于32℃ 5% CO2的培养箱培养,48h后用20mmol/L Tris-HCl低渗处理培养细胞.培养1周后应用伊红染色、吖啶橙荧光染色、Feulgen染色对所培养的支持细胞进行鉴定,同时应用原位杂交检测ABP mRNA方法鉴定分离培养的支持细胞.结果 培养1周后所获培养的支持细胞纯度达95%以上.分离培养的支持细胞ABP mRNA表达阳性,其形态结构特征与用其他方法鉴定为支持细胞的形态结构特征一致.结论 采用三酶连续消化及低渗处理法分离培养的支持细胞纯度高,而且应用原位杂交方法检测ABP mRNA是一种新的、特异、有效的鉴定支持细胞及其功能的方法.     

杜仲对糖尿病大鼠阴茎组织SOD活性和α-actin表达的影响

目的:研究杜仲水提物对培养糖尿病(DM)模型大鼠阴茎组织超氧化物歧化酶(SOD)和α平滑肌肌动蛋白(αactin)的作用。方法:采用四氧嘧啶两次给药法建立DM模型;随机选取10只DM大鼠和10只正常大鼠,每只大鼠的阴茎组织块均分为4等份,分配到杜仲共培养组(A组:1μg/ml组、10μg/ml组、100μg/ml组)和空白对照组(B组)进行培养。7d后,用比色法测定培养液中SOD活性,用免疫组化技术检测αactin的表达。结果:10、100μg/ml组的正常大鼠和DM大鼠阴茎组织培养液中SOD活性与B组比较显著升高(P<0.01),培养阴茎组织中αactin免疫反应阳性细胞数与B组比较显著增多(P<0.01)。结论:杜仲可增强DM大鼠阴茎组织中SOD活性和αactin表达。     

弱精子症动物模型中尿纤溶酶原激活因子的含量及表达情况研究

目的:利用奥硝唑所致弱精子症动物模型,采用免疫组化方法和RT-PCR技术,了解尿纤溶酶原激活因子(uPA)在弱精子症动物模型中的含量及表达情况,初步探讨奥硝唑所致弱精子症动物模型的机制及uPA作为预防或治疗弱精子症药物的可能性。方法:48只雄性SD大鼠随机分为1d用药组,5d用药组,10d用药组,15d用药组,20d用药组和对照组,每组8只,用药组每天给予奥硝唑200mg/kg,对照组给予0.5%羧甲基维素钠连续灌胃,用药组分别在给药第1、5、10、15、20d后24h内,麻醉处死动物取附睾和睾丸。低渗肿胀试验检测精子细胞膜完整性,免疫组化方法动态观察睾丸与附睾组织中uPA蛋白表达情况,RT-PCR检测睾丸组织中uPAmRNA含量。结果:奥硝唑持续给药构建弱精子症时,精子膜完整性下降发生在给药的第10d,并一直维持低值。与建立弱精子症模型同步的uPA在睾丸和附睾组织蛋白表达及mRNA含量下降在用药15d,下降趋势上是平行的,而显效性稍滞后。用药15d组与用药20d组uPA蛋白表达、mRNA水平分别与对照组比较有统计学意义(P<0.05)。结论:精子细胞膜受损、运动能力下降与uPA表达及含量下降平行,奥硝唑所致弱精子症模型形成可能是由于uPA含量及表达下降所致。弱精子症形成原因较复杂,uPA含量及表达的下降可认为是弱精子症形成因素之一,检测uPA含量可能有助于弱精子症的诊断和预防。     

Binl—b蛋白及其mRNA在少弱精子症模型大鼠附睾中的表达

目的:验证Binl—b蛋白及其mRNA在少弱精子症模型大鼠附睾中的表达,探讨Binl—b在病理状态下附睾中表达的改变。方法:取雄性大鼠30只,随机分为两组,模型组给予雷公藤(10mg/ kg/d)灌胃,连用8W成少弱精子症模型;对照组给予1%羧甲基纤维钠混悬液灌胃。采用免疫组化S—P法和原位杂交方法检测Binl—b蛋白和Binl—bmRNA在两组大鼠附睾组织中的表达情况。结果:Binl—b蛋白表达于对照组、模型组大鼠的附睾管腔上皮、主细胞、基细胞,但在模型组中表达明显增强(P<0.01)。Binl—bmRNA表达于模型组、对照组附睾管腔上皮、主细胞、基细胞,但其在模型组中的表达明显增强(P<0.01)。结论:Binl—b蛋白及其mRNA在少弱精子症大鼠附睾内表达较正常大鼠明显增强,提示Binl—b可能是病理状态下雄性大鼠生殖系统的内源性防御分子之一。     

高校学生避孕节育知识、服务利用及需求的调查研究

目的 了解高校学生对避孕节育知识的掌握程度和服务利用及需求情况,对开展高质量的生殖健康教育和避孕节育服务提供科学根据.方法 采用匿名问卷对按分层整群抽样方法抽取的南京市8所不同类型高校的10 942名学生进行调查.结果 大学生对避孕节育知识的掌握程度较低,有87.95%的学生认为自己有必要了解相关知识,学生认为获得相关知识的主要困难是没有好的教育形式和内容、学校不重视;在发生过性行为的学生中,有48.32%的人未采取避孕措施,避孕节育服务的利用较低;有91.93%的人认为有必要在大学开展避孕节育与生殖健康教育.结论 应采用好的教育形式和内容,开展学校生殖健康教育.学校、家庭和社区应共同努力,为学生提供良好的生殖健康教育和方便的避孕节育服务.     

两种单向复方口服避孕药对经前期综合征影响的研究

目的观察两种单向口服避孕药(OCs)优思明和妈富隆对育龄妇女经前期综合症(PMS)的影响。方法将自愿服用COC避孕的妇女随机分为两组,其中优思明(DRSP/EE)组47例,妈富隆(DSG/EE)组19例。两组均从月经周期第1天开始服药,1片/d,连续服用21天,之后停药7天。两组均连续服用6个周期(28天/周期)。两组对象在研究开始前及6个月经周期后各完成1份相同的经期不适问卷(MDQ)。计算服用避孕药前和服药6个周期后各组MDQ平均得分和平均得分的变化。结果①服药6个周期后,优思明组经前期水潴留和注意力损害评分、月经期水潴留评分比妈富隆组有显著性改善(P<0.05)。②优思明组服药6个周期后,经前期水潴留和消极情绪评分,月经期水潴留评分比服药前有显著性下降(P<0.05)。妈富隆组服药6个周期后,经前期消极情绪比服药前有显著性下降(P<0.05)。结论两种COC对PMS均有一定的改善作用;口服避孕药优思明比妈富隆对PMS的改善作用更加显著,这与DRSP抗盐皮质激素作用有关。     

人精子中尿激酶型纤溶酶原激活因子及其受体的分布

本文采用免疫组化和免疫电镜法研究了正常健康男子精子中尿激酶型纤溶酶原激活因子（ｕＰＡ）及其受体（ｕＰＡＲ）的分布。结果表明ｕＰＡ主要分布在顶体内外膜和头部浆膜上；精子尾部浆膜也含有ｕＰＡ；在ｕＰＡ出现的部位同时也发现有ｕＰＡＲ存在。推测结合在精子受体膜上的ｕＰＡ可能在精子的运行、精液的液化和受精过程中发挥重要的作用。     

生命的一半——精子正受到前所未有的冲击

生命的一半———精子正受到前所未有的冲击在封建社会里，人们受到男尊女卑思想的影响，把原本男女双方负有同等责任的生育问题，一古脑儿地推卸到女方，特别遇到生育麻烦时，大丈夫常以“不孝有三，无后为大”为由，休妻或纳妾。我们不能保证在现代男子身上这种思想完全...     

北京市大学生避孕知识、态度、行为现况调查

目的 了解北京市在校大学生避孕知识、态度、行为及影响因素.方法 采用定量研究方法,根据知情同意原则选择12 450名未婚大学生进行匿名问卷调查.结果 共回收12 129份有效问卷,其中女生的避孕相关知识知晓率高于男生,差异有统计学意义(P=0.000).赞成未婚同居及性解放的比率男生分别为81.9%和60.2%,女生分别为74.8%和54.3%;74.3%的男生和24.9%的女生有性自慰史,18.4%的男生和10.5%女生承认发生过婚前性行为;在有性行为的学生中,29.4%的男生曾导致性伴意外妊娠,23.1%的女生发生过意外妊娠;在对以上知识的态度和行为中男女生间的差异均有统计学意义(意外妊娠P=0.004,其余P=0.000).在首次性行为中使用避孕措施的男生和女生均为51.3%;没有使用避孕药具的主要原因是性行为没有计划而未备避孕药具,认为使用麻烦、影响情趣及认为偶尔性行为不会导致怀孕.结论 大学生未婚性行为发生率呈日益上升趋势,未婚性行为中避孕药具使用率低,意外妊娠发生率高,亟需在大学生中加强避孕知识的宣传.     

上皮细胞钠通道α亚基在大鼠和人睾丸、精子中的表达及其与精子活力的关系

目的:研究上皮细胞钠离子通道α亚基(ENaC-α)在大鼠和人的睾丸、精子上的表达及其与人精子活力之间的关系。方法:用western-blot检测ENaC-α在大鼠和人睾丸、精子上的表达,同时免疫荧光检测其在大鼠睾丸的分布特点。用计算机辅助精液分析检测ENaC-α的特异阻断剂EI-PA[5-(N-ethyl-N-isopropyl)-amiloride hydrochloride]对精子活力的影响。结果:ENaC-α亚基表达于大鼠睾丸精母细胞、精子细胞,以及大鼠成熟精子的鞭毛中段;它也存在于人睾丸和成熟精子的鞭毛中段。体外精子活力实验表明,获能过程中ENaC的阻滞,可以促进人精子活力的增加,差异有显著性意义(P<0.01)。结论:ENaC-α构成的离子通道在生精细胞中表达,最终局限分布于成熟精子的鞭毛中段的质膜中。而特异阻断剂EIPA可以抑制上皮细胞钠离子通道,从而提高精子活力。