PCR法鉴定单核细胞增生李斯特菌

单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes，Lm)是一种人畜共患病的病原菌。Lm是最重要的食源性病原体之一，主要污染肉类、乳制品和蔬菜等。Lm鉴定方法包括传统的分离鉴定法、免疫学鉴定方法等。分离培养鉴定法比较简单，但是操作烦琐、耗时长，不适合日常对于食品的检测。Lm免疫学检测操作简便，可在同一时间内检测大量样品，但由于菌体及鞭毛抗原交叉反应的存在，难以进行李斯特菌种间特异性鉴别。PCR法具有特异性强、灵敏度高和速度快等优点。     

重组流感病毒H1N1活菌疫苗的构建及其免疫效果的初步研究

目的获得两种流感病毒重组沙门氏菌X4550(asd-pVAX1-HA)和X4550(asd-pVAX1-NA)活菌疫苗,并对其免疫效果进行初步的研究。方法将本室已构建好的重组质粒pVAX1-HA及pVAX1-NA双酶切后得到HA、NA基因,将其克隆入asd-pVAX1构建重组的表达质粒。将重组质粒转染COS-7细胞,用免疫细胞化学方法鉴定重组质粒体外的表达。进一步将重组质粒转化减毒鼠伤寒沙门氏菌X4550,以2×109CFU/只的剂量三次口服免疫Balb/c小鼠。结果asd-pVAX1-HA和asd-pVAX1-NA均能在COS-7细胞中表达;免疫小鼠不仅可以检测到HA、NA特异性的血清IgG及IgA抗体;刺激黏膜免疫反应,产生sIgA抗体,而且能抵抗40LD50同型病毒滴鼻的攻击。结论H1N1流感病毒DNA疫苗的减毒沙门氏菌运送系统在体内能够成功释放所携带的质粒,并且能够刺激机体产生保护性免疫应答。     

γ-干扰素试验和皮试变态反应对检测奶牛结核病的比较

目的评价γ-干扰素试验、单纯颈部皮试变态反应和比较皮试变态反应检测在牛结核病检疫过程中的效果。方法在牛结核病检疫过程中,953头奶牛同时进行γ-干扰素试验和单纯颈部皮试变态反应检测,其中的190头奶牛进行了比较变态反应试验。结果在同步进行γ-干扰素试验和单纯颈部皮试变态反应检测的953头奶牛中,两者的阳性符合数为147头,阳性符合率为63.8%（294/461）,两者的阴性符合数为639头,阴性符合率为88.4%（1 278/1 445）;在进行比较皮试变态反应的190头奶牛中,γ-干扰素试验与比较皮试变态反应的阳性符合数为3头,阳性符合率为75%（6/8）,阴性符合数为185头,阴性符合率为99.5%（370/372）;单纯颈部皮试变态反应与比较皮试变态反应的阳性符合数为4头,阳性符合率为72.7%（8/11）,阴性符合数为183头,阴性符合率为99.2%（366/369）。结论单纯颈部皮试变态反应有较高的检出率;同单纯颈部皮试变态反应相比,比较皮试变态反应有较好的特异性;γ-干扰素试验在保持较高灵敏度的同时,具有较好的特异性。     

重组卡介苗表达的MalE蛋白T细胞表位的鉴定

目的 鉴定重组卡介苗表达的MalE蛋白T细胞表位。方法 用抗原提呈试验、T细胞增殖试验、ELISPOT试验和表位作图测试重组MalE蛋白的T细胞表位。结果 重组BCG.MalE功能性表达了MalE蛋白的4种H-2^d限制性T细胞表位。结论 在4种表位中，p68-82是重组MalE蛋白的主要T细胞表位，而其余3个为次要表位。     

沙门氏菌属特异性单克隆抗体在快速检测中的应用

本文应用两株沙门氏菌属特异性单克隆抗体CB8，de7，采用直接ELISA法，对人类样品进行检测，结果表明，本法对沙门氏菌属具有高度的特异性，而与所试的其他肠杆菌科细菌无交叉反应。对A－F群代表菌株的最小检出量为106个／L，在沙门氏菌与E.coli混合菌液中，E.Coli菌量100倍于沙门氏菌时，不经任何选择性培养，仅在M肉汤增菌6h便可检测出沙门氏菌。通过对1743份体检人员大便样品检测表明，本法的敏感性和特异性分别为100％和97％，在选择性增菌后6h，即可筛除97％以上的阴性样品，将为医疗、卫生防疫部门提供一种快速有效的筛检手段。     

沙门菌T3SS相关效应蛋白作用机制的研究进展

沙门菌是人兽共患病原菌,能感染宿主并导致严重的并发症和死亡。沙门菌的致病性主要是由沙门菌SPI-1和SPI-2编码的T3SS的效应蛋白相互作用的结果。本文主要对T3SS相关效应蛋白在沙门菌感染的不同阶段发挥的功能进行综述,以期为进一步了解沙门菌致病机理提供参考。     

结核分枝杆菌靶向宿主细胞蛋白逃逸免疫杀伤的研究进展

结核分枝杆菌是引发结核病的一种人兽共患病原菌,严重危害人类健康以及公共安全,作为一种兼性胞内感染菌,其引发结核病的关键是破坏宿主免疫防御机制以提高其在胞内生存能力。结核分枝杆菌感染宿主细胞的过程中,分枝杆菌效应蛋白通过与宿主靶蛋白的相互作用来影响细胞凋亡、炎性因子表达、抗原提呈等多种免疫效应,从而逃逸宿主细胞的杀伤,并在机体免疫状态低下时复发从而引起结核病。深入了解结核分枝杆菌效应蛋白和宿主靶蛋白的相互作用及分子机制,将为结核病的防治提供新的线索。     

单核细胞增生李斯特菌基于基因组学的分型和溯源技术研究北大核心CSCD

单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)是一种重要的食源性人兽共患病原菌,引起的李斯特菌病致死率较高,研究其分子流行病学规律有助于该病的预防与控制。近年来,随着多种分子分型方法的建立,特别是基于全基因组测序(WGS)的核心基因/全基因组多位点序列分型(cg/wgMLST)、单核苷酸多态性(SNP)分析,在LM分子流行病学研究中得到了应用,在细菌分子进化研究、风险评估和溯源调查中发挥了重要作用。本文对基于基因组学的LM分型和溯源技术相关文献进行综述,为LM的分子流行病学研究提供参考。     

结核分枝杆菌基因敲除技术的研究进展

结核分枝杆菌是十分重要的人兽共患病原菌,基因缺失株的构建在该菌致病与免疫机制、基因功能解析和防控技术中意义重大,而该菌特有的复杂结构和生理生化特性也给缺失株的构建带来难度,为此有关结核分枝杆菌基因敲除技术的研究一直是重要课题。本文重点介绍了结核分枝杆菌基于特异性转导噬菌体、线性DNA片段、反选择标记、CRISPR技术以及ORBIT系统的基因敲除方法,同时对分枝杆菌的分子遗传操作发展进行了展望。