血管钙化对血管组织内皮素表达的影响

通过观察血管钙化大鼠血管组织和钙化血管平滑肌细胞内皮素含量的变化 ,探讨血管钙化对血管组织内皮素表达的影响。用维生素D3加尼古丁诱导大鼠血管钙化模型 ,β 磷酸甘油制备钙化血管平滑肌细胞 ,采用VonKossa染色、钙含量测定、4 5Ca聚集及碱性磷酸酶活性测定判断钙化程度 ,放射免疫分析法测定血浆、血管和血管平滑肌细胞培养基中内皮素含量 ,用竞争性定量逆转录聚合酶链反应方法测定血管和血管平滑肌细胞中内皮素mRNA水平。结果发现 :钙化血管平滑肌细胞VonKossa染色见有大量黑色颗粒沉积 ,钙化细胞的钙含量、4 5Ca2 + 摄入及碱性磷酸酶活性分别较正常平滑肌细胞增加 1 1 8%、1 74 %和 7倍 (P均 <0 .0 1 ) ;钙化细胞培养基中内皮素含量较对照组增加 35 % (P <0 .0 5 ) ,内皮素mRNA水平较对照组高 1 2 0 % (P <0 .0 5 ) ;钙化组大鼠血管组织VonKossa染色见血管中层有大量黑色颗粒沉积 ,主动脉钙含量、4 5Ca2 + 沉积及碱性磷酸酶活性分别较对照组高 5 .0倍、1 .4倍和1 .4倍 (P均 <0 .0 1 ) ;钙化大鼠血浆和血管内皮素含量分别较对照组增加 1 0 2 %和 1 0 3% (P均 <0 .0 1 ) ;钙化血管内皮素mRNA水平较正常对照组高 2 2 % (P <0 .0 1 ) ;波生坦处理的大鼠血管钙含量、4 5Ca2 + 聚集及碱性磷酸酶活性较单     

Intermedin~(1-53)保护异丙基肾上腺素诱导的心肌损伤

目的在异丙基肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱导的大鼠急性心肌损伤的模型上探讨Intermedin153(IMD153)对心肌损伤的保护作用。方法用ISO建立大鼠缺血损伤模型,观察IMD153对心脏功能和心肌组织损伤影响;半定量RTPCR检测心室肌降钙素受体样受体(calcitoninreceptorlikereceptor,CL)、受体活性修饰蛋白(receptoractivitymodifyingprotein,RAMP)1/2/3的mRNA表达水平;放射免疫法测定心肌cAMP的含量和放射配基法测定心肌浆膜IMD受体结合位点。结果与对照组比较ISO组大鼠的左室内压变化速率(±LVdp/dtmax)分别降低23%和44%(均P<0.01),左室舒张末压(leftventricularenddiastolicpressure,LVEDP)增高7.8倍(P<0.01),心室肌CL、RAMP1/2/3的mRNA水平均明显上调(除RAMP2P<0.05,均P<0.01),ISO组心肌浆膜IMD受体Bmax值升高118%〔(83.05±5.75)vs(38.10±1.85)pmol·g-1Pro,P<0.01〕;与单纯ISO组比较,IMD可呈剂量依赖性减轻心内膜下心肌缺血损伤,改善心功能,高剂量Intermedin治疗组大鼠优于低剂量组。结论ISO诱导的缺血损伤心肌的IMD受体上调,而IMD153对心肌缺血损伤具有明显的保护作用。     

肾上腺髓质素抑制醛固酮促大鼠主动脉外膜增殖效应

目的观察醛固酮(ALDO)对血管外膜肾上腺髓质素(ADM)产生和分泌的影响以及ADM mRNA表达水平,以探讨ADM和ALDO之间相互联系。方法用放射免疫法测定ALDO刺激后ADM产生和分泌水平,用3H-THR掺入反映血管外膜增殖,半定量的RT-PCR测定ADM基因表达。结果ALDO呈浓度依赖的刺激大鼠血管外膜ADM分泌和mRNA表达,ADM抑制ALDO诱导的外膜增殖。ALDO活化外膜成纤维细胞丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs),明显增加其活性,该效应可被ADM抑制。结论ALDO促进血管外膜ADM的生成,而生成的ADM拮抗AL-DO诱导的血管外膜增殖。     

受体表型调节蛋白——受体活性修饰蛋白

细胞质膜受体识别配体的特异性 ,不仅决定于受体的结构 ,而且还与膜上某些调节蛋白的功能有关。最近发现的受体活性修饰蛋白 (RAMP)的I型膜蛋白家系 (RAMP1,RAMP2 ,RAMP3 )分别决定受体呈现不同的表型 ,如RAMP1与降钙素受体样受体 (CRLR)结合表现为降钙素基因相关肽 (CGRP)的功能性受体表型 ,RAMP2或RAMP3与CRLR结合表现为肾上腺髓质素 (ADM)的功能性受体表型。不同的配体CGRP家族成员与不同的受体表型结合 ,通过受体成分蛋白 (RCP)调节参与下游的信号转导 ,发挥不同的生物学效应。RAMPs还参与受体失敏与内化的过程 ,不同RAMPs之间存在相互作用 ,调节配体在病理生理过程中发挥作用。RAMPs对CGRP家族受体表型的调控具有重要的生理和病理意义     

败血症休克大鼠组织中性内肽酶与肾上腺髓质素的相关关系研究

目的:观察败血症休克大鼠组织肾上腺髓质素(ADM)含量和中性内肽酶(NEP)的活性及其表达水平,以探讨NEP的变化在休克时组织ADM水平变化中的意义。方法:盲肠结扎穿孔方法复制大鼠败血症性休克模型,采用放射免疫方法和荧光分光光度法分别检测血浆和组织的ADM含量和NEP的活性,用半定量RT-PCR和免疫组织化学法分别检测NEP的mRNA及其蛋白的组织分布。结果: ADM和NEP广泛分布于大鼠的血浆和组织。休克早期,大鼠各组织ADM含量普遍高于对照组,NEP活性在心脏和小肠低于对照组,在血浆中高于对照组,在肺、肾和主动脉无明显变化。免疫组化结果显示,休克早期NEP在大鼠心脏、主动脉内膜和中膜的分布低于对照组。休克晚期,除大鼠小肠的ADM含量低于休克早期,血浆和其余组织的ADM含量均高于休克早期;与休克早期比较, NEP的活性除在大鼠肾脏无明显变化外,在血浆和其余组织均明显降低。NEP的免疫组化结果显示,休克晚期,NEP在大鼠心脏、主动脉内膜和中膜、肺和肾的分布弱于休克早期,在主动脉外膜无明显变化。RT-PCR结果显示,休克晚期大鼠心脏、主动脉、肺脏和小肠的NEP mRNA 表达均显著低于对照组。 结论:NEP在大鼠败血症休克的不同时期和不同组织中的变化与ADM含量的变化不一致,提示休克过程中,不同组织局部的NEP对ADM含量的影响不同。     

Apelin激活大鼠主动脉一氧化氮系统的研究

目的研究Apelin对大鼠主动脉L-精氨酸转运、一氧化氮合酶(NOS)活性和NO生成的影响.方法体外血管薄片孵育,测定孵育液中亚硝酸盐(NO2-)含量、L-精氨酸转运及血管NOS活性.结果大鼠主动脉孵育3h后,Apelin(10-9～10-7mol/L)呈浓度依赖地刺激血管NO2-生成增加(33%、46%和69%,与对照组比较,均P＜0.01);血管总NOS活性呈浓度依赖性(total nitric oxide sythase,tNOS)增加,分别较对照组增加0.68、2.36和2.5倍(均P＜0.01),且以内皮型NOS(endothelialNOS,eNOS)活性升高(均为P＜0.01)为主,较对照组分别增加2、4.6和5.5倍,而诱导型NOS(inducible NOS,iNOS)活性并无明显改变.结论Apelin通过激活血管组织NOS/NO系统,增加血管L-精氨酸转运与NO生成,引起血管的扩张.     

Apelin激活大鼠主动脉阳离子氨基酸转运体的表达

目的研究Apelin对大鼠离体主动脉阳离子氨基酸转运体（CAT）和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）基因表达的影响.方法体外血管薄片孵育,测定孵育液中亚硝酸盐（NO2-）含量、RT-PCR方法测定阳离子氨基酸转运体CAT-1、CAT-2B和iNOS mRNA表达水平.结果大鼠主动脉孵育3h,Apelin（10^-9-10^-7mol/L）呈浓度依赖地刺激血管NO2-生成增加（33%、46%和69%,均P＜0.01）.Apelin刺激血管L-Arg转运体CAT-1和CAT-2BmRNA基因的表达上调,分别较对照组增加1.11倍和1.28倍（均P＜0.01）,而iNOS mRNA的表达并无明显改变（P＞0.05）.结论 Apelin激活血管组织阳离子氨基酸转运体CAT-1和CAT-2B基因表达,其变化可能参与了NO的释放从而引起血管的扩张.     

急性心力衰竭大鼠心肌intermedin受体的变化

目的 观察心肌浆膜上新发现的血管活性肽intermedin（IMD）受体在异丙肾上腺素诱导心肌缺血损伤中的变化及意义.方法 在异丙基肾上腺素（isoproterenol,ISO）诱导的大鼠心肌缺血损伤模型实验组和假手术对照组,采用Western blot方法检测IMD蛋白水平,放射性配基结合技术,测定大鼠心肌浆膜上IMD 受体的结合能力.结果 ISO处理大鼠心脏呈现广泛心内膜下心肌坏死;血浆LDH活性、心肌和血浆MDA含量比对照组明显增加（均P＜0.01）;心功能明显降低,呈现严重心衰表现;IMD蛋白表达降低4倍（P＜0.01）;受体数目（Bmax）上调118% （P＜0.01）,受体与配体解离常数（Kd）比对照组增加（P＜0.05）.结论 心肌缺血性损伤引起心肌浆膜IMD蛋白表达降低、受体增加,其变化可能参与心肌损伤的发病过程.     

内皮素参与溶血磷脂酸促血管平滑肌细胞的增殖

目的 :观察内皮素 (endothelin ,ET)对溶血磷脂酸 (lysophosphatidicacid ,LPA)诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的作用。方法 :离体培养的VSMCs经不同浓度的LPA孵育后测定 [3 H] 胸腺嘧啶 (3 H TdR)掺入 ,ETmRNA含量及ET的合成和释放量。结果 :LPA(5、10和 2 0 μmol·L-1)增加VSMCsETmRNA表达 ,VSMCsETmRNA含量分别较对照组高 16 %、2 1%和 2 3%。LPA亦以浓度依赖的方式增加VSMCsET的合成释放。 5～2 0 μmol·L-1LPA处理组细胞培养上清中ET含量较对照组高 14 0 %～ 2 0 0 % (P <0 .0 1)。 5～ 2 0 μmol·L-1LPA以浓度依赖的方式促进VSMCsDNA合成 ,非选择性的ETA 受体拮抗剂BQ12 3显著拮抗LPA刺激的VSMCs的DNA合成增加。结论 :LPA可促进VSMCs的ET产生 ,LPA的促VSMCs增殖效应部分是通过ET/ETA 受体途径介导。提示LPA和ET作为内源性活性物质相互协调发挥其生物学效应     

新发现的脂肪细胞分泌的激素——抵抗素

抵抗素是近年新发现的一种由脂肪组织分泌的活性多肽 ,含有独特的半胱氨酸结构。该肽可使糖耐量降低 ,产生胰岛素抵抗、抑制脂肪细胞分化等生物学效应 ,其合成和分泌受胰岛素、TNF α、脂肪酸等因子的调节。抵抗素与肥胖和 2型糖尿病的发病有密切关系