孕妇外周血浆中高甲基化RASSF-1A基因水平与自然流产的关系研究

目的通过检测孕早期发生先兆流产孕妇血浆中高甲基化RASSF．1A水平,并随访早期妊娠结局,评估利用孕妇血浆中高甲基化RASSF-1A预测孕早期出现先兆流产的孕妇发生自然流产的临床价值。方法该研究是一项前瞻性研究,最终共有孕早期（6～11．6周）孕妇1767名,根据妊娠结局分为三组：自然流产组（A组）、先兆流产但妊娠结局正常组（B组）、正常对照组（C组）。高甲基化RASSF。1A基因用来代表胎儿DNA,应用实时定量PCR方法检测上述各实验组孕妇血浆胎儿DNA的含量。结果正常孕妇在孕早期血浆中的高甲基化RASSF-1A水平随着孕周的增长而增高;自然流产组孕妇血浆高甲基化RASSF-1A的中位数倍值是正常对照组的4．64倍,有统计学差异（P〈0．01）,而在有先兆流产但妊娠结局正常组与正常对照组之间无统计学差异（P〉0．05）;若用高甲基化RASSF-1A的4．92MoMs来预测自然流产,灵敏度为98．2％,假阳性率为1．8％,特异度为91．2％。结论对于发生先兆流产的孕妇,尤其在孕早期,孕妇血浆中的甲基化RASSF-1具有预测自然流产的临床价值,有望成为临床上预测有先兆流产症状的孕妇孕早期发生自然流产新的生物学指标。     

荧光原位杂交和免疫组织化学技术检测乳腺癌HER-2基因扩增和蛋白表达状态对照研究

目的 比较荧光原位杂交(FISH)与免疫组织化学技术(IHC)在检测乳腺癌患者HER-2基因扩增和表达状态方面的应用.方法 采用FISH技术对66例IHC检测结果为HER-2基因过度表达(3+/2+)和低表达或无表达(1+/-)的乳腺癌石蜡切片进行HER-2基因扩增状态检测.结果 用FISH技术检测42例IHC结果显示HER-2基因过度表达(3+/2+)的标本,31例显示HER-2基因扩增,11例无扩增.检测24例IHC检测显示HER-2基因低度表达或无表达(1+/-)的标本,均未显示HER-2基因扩增.两组之间比较,Kappa系数为0.672,P<0.001,显示两项检测技术具有良好的一致性.另外.用FISH技术检测到部分病例显示17号染色体多体性,并且该多体性在HER-2高表达(3+/2+)的病例发生率显著高于低表达或无表达(1+/-)的病例(x~2=4.688,P=0.03).结论 FISH和ICH两项技术具有良好的一致性.IHC可作为HER-2基因扩增和表达状态检测的筛查手段.FISH技术可以作为检测HER-2基因扩增和17号染色体多体性的确诊手段.

Abstract：

Objective To evaluate the application of the immunohistochemistry (IHC) and the fluorescence in situ hybridization (FISH) in detecting the amplification and the expression of HER-2 gene in the breast cancer patients. Methods Sixty-six cases of paraffin-embeded breast cancer samples with overexpression, low or no expression of HER-2 gene as detected by IHC were analyzed for HER-2 gene amplification using FISH. Results Among the 42 samples with HER-2 gene overexpression (3+/2+) detected by IHC, 31 showed positive HER-2 gene amplification and 11 showed negative HER-2 gene amplification in FISH. In the 24 samples with low or no HER-2 gene expression (1+/-) detected by IHC, no HER-2 gene amplification was detected by FISH. The results of the two testing methods showed a good consistency with the kappa coefficient of 0.672 (P<0.001). We also found that the 17 chromosome polysomy in 42% of the samples and the incidence of 17 polysomy was significantly higher in the HER-2 gene overexpression (3+/2+) group than in low or no HER-2 gene expression (1+/-) group (x~2=4.688, P=0.03). Conclusion IHC can be used as a screening method for detecting HER-2 gene amplification, and FISH should be performed in cases of HER-2 gene overexpression (3+/2+) as detected by IHC.     

羊水细胞原位培养与产前诊断镶嵌体分析

目的了解载片培养瓶对羊水细胞原位培养的效果,并探讨产前诊断羊水染色体中镶嵌体不同分级水平与临床意义。方法使用载片培养瓶（研究组）与载片培养皿（对照组）对1274例有产前诊断指征的孕妇进行羊水细胞原位培养并G显带分析。结果研究组与对照组培养时间平均为6.7和8.9d,细胞克隆数平均为11.5和6.0个,两组培养天数和细胞克隆数比较差异有统计学意义（χ2=1814.4,P〈0.01;χ2=2049.04,P〈0.01）。羊水镶嵌体检出34例,Ⅰ级水平25例,Ⅱ级水平7例,Ⅲ级水平2例,其中真性镶嵌体3例。结论载片培养瓶对羊水细胞原位培养优于载片培养皿,羊水原位培养镶嵌体分级水平的研究对产前诊断有非常重要的临床意义,Ⅱ级水平不能认为全是假性镶嵌体。