烧伤创面应用酸性氧化电位水持续杀菌时间的研究

目的研究烧伤病人应用酸性氧化电位水的杀菌持续时间。方法选择大面积烧伤患者中深、浅Ⅱ度创面的患者共150例，将研究对象按酸性氧化电位水作用不同时间随机分为5组，每组30例，通过在烧伤创面上应用酸性氧化电位水，分别在作用前、作用2h、作用4h、作用6h、作用12h、作用24h不同时段的创面进行取样检测，计算出杀菌率。结果酸性氧化电位水对烧伤创面作用2h杀菌率为94．55％、作用4h为92．01％、作用6h为91．78％、作用12h为84．04％、作用24h没有杀菌作用。结论酸性氧化电位水对烧伤创面的杀菌时间只能维持12h，24h已失效。     

正常人不同部位皮肤表皮干细胞分布规律的研究

目的观察正常人不同部位皮肤表皮干细胞分布的规律,分析用P63、CD29单标记和双标记法鉴定表皮干细胞的可行性。方法取5例正常人头顶部、足背、足底、阴阜(阴毛区)、阴囊等21个部位的全层皮肤组织,采用免疫组织化学生物素-链霉亲和素-辣根过氧化物酶(SP)染色法,用P63、CD29作为一抗进行单、双标记。对染色结果作图像分析并以阳性单位(PU)值表示,观察表皮干细胞在各部位皮肤中的分布情况。结果 P63单标记法及P63、CD29双标记法染色均显示, 正常人体21个部位中,足背皮肤的PU值最小,头皮PU值最大。CD29单标记法染色显示,足底皮肤 PU值[(11．9±1．5)％]最小,头皮PU值[(29．1±5．0)％]最大。毛发区皮肤P63、CD29单、双标记染色的PU值均高于汗毛区(P<0．01),但躯干与四肢部位皮肤P63、CD29单标记及双标记染色的 PU值比较,差异均无统计学意义(P>0．05)。结论正常人头顶部、阴阜、阴囊皮肤组织中的表皮干细胞多于其他部位。P63、CD29单标记法对表皮干细胞的敏感性较高,特异性较低,而P63、CD29 双标记法的敏感性较低,特异性较高;后者不失为鉴定表皮干细胞较为简便、有效的方法。     

15-脱氧-△~(12,14)-前列腺素J2对兔耳增生性瘢痕结缔组织生长因子及胶原表达的影响

核转录因子过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)作为负调节信号,在组织和器官纤维化中发挥抗纤维化作用,但在增生性瘢痕中的作用尚不清楚.我们采用兔耳增生性瘢痕模犁,观察PPAR-γ的配体15-脱氧-△~(12,14)-前列腺素J2(15d-PGJ2)对增生性瘢痕结缔组织生长因子(CTGF)及胶原表达的影响,以期为进一步的临床治疗提供理论依据和实验基础.     

人增生性瘢痕成纤维细胞最佳转染条件:α1(Ⅰ)型前胶原基因反义寡核苷酸转染的实验

目的选择?1(Ⅰ)型前胶原基因反义寡核苷酸转染人增生性瘢痕成纤维细胞的最佳条件.方法实验于2003-10/2004-06在中山大学附属第一医院外科实验室进行.以阳离子脂质体Oligofectamine转染体外培养的第2～6代人增生性瘢痕成纤维细胞,应用荧光显微镜记录荧光素在细胞内的空间分布,用流式细胞术作荧光细胞计数和观察细胞凋亡,通过不同细胞接种数量、反义寡核苷酸浓度和脂质体量转染条件的比较,逐步获得各转染过程中的最佳条件.结果①在6孔板上转染反义寡核苷酸,所用各转染条件未引起细胞凋亡.②其最佳转染条件为接种细胞数量32.25×104/皿,反义核酸浓度150 nmol/L,脂质体量3 ?L/孔;转染后细胞浆和细胞核内均有荧光素聚集.结论获得?1(Ⅰ)型前胶原基因反义寡核苷酸转染的人增生性瘢痕成纤维细胞的最佳转染条件,可为下一步试验提供基础.     

自噬在吉西他滨抑制巨噬细胞免疫中的作用及机制研究

目的 观察吉西他滨对巨噬细胞免疫功能的影响,并对其作用机制进行探讨.方法 脂多糖(LPS)和干扰素-γ(IFN-γ)共同诱导巨噬细胞Ana-1为M1型巨噬细胞.酶联免疫吸附试验(Elisa)检测细胞因子的表达、透射电子显微镜下观察自噬体的形成,激光共聚焦显微镜下观察巨噬细胞吞噬功能及活性氧和自噬体的产生,流式细胞术检测...     

积雪草苷对增生性瘢痕成纤维细胞结缔组织生长因子及RhoA/ROCK-Ⅰ调控信号的影响

 目的 研究积雪草苷对增生性瘢痕成纤维细胞结缔组织生长因子（CTGF）的影响及RhoA/ROCK-Ⅰ信号通路在其中的作用。方法 分离培养人增生性瘢痕组织来源的成纤维细胞,应用积雪草苷300 μg·mL-1及RhoA的下游效应器Rho激酶的特异抑制剂Y-27632对实验细胞进行干扰实验。分为对照组、积雪草苷组、Y-27632组、积雪草苷+ Y-27632组。运用荧光定量PCR（SYBR Green）及免疫荧光细胞化学的方法检测各组瘢痕成纤维细胞中RhA、ROCK-Ⅰ、CTGF mRNA与蛋白表达。结果 积雪草苷300 μg·mL-1能抑制RhoA、ROCK-Ⅰ、CTGF的mRNA与蛋白表达,与对照组比较具有统计学意义（P＜0.05）;Y-27632能阻碍积雪草苷的作用,积雪草苷（300 μg·mL-1）+ Y-27632组,CTGF的mRNA与蛋白表达明显高于单纯积雪草苷组（P＜0.05）,与对照组及Y-27632组比较无显著性差异（P＞0.05）;Y-27632组与对照组比较RhoA、ROCK-Ⅰ、CTGF的mRNA与蛋白表达没有统计学意义。结论 积雪草苷300 μg·mL-1能抑制RhoA、ROCK-Ⅰ、CTGF的mRNA与蛋白表达;而且可通过RhoA/ROCK-Ⅰ信号通路抑制瘢痕成纤维细胞中CTGF mRNA与蛋白表达。这可能是积雪草苷治疗瘢痕的作用机制之一。     

RhoA和ROCK-Ⅰ在增生性瘢痕中的表达

目的：研究RhoA和ROCK-ⅠmRNA在增生性瘢痕中的表达，探讨其在增生形成中的作用。方法：用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测6例增生性瘢痕和正常皮肤中RhoA和ROCK-ⅠmRNA表达的相对水平。结果：RhoA和ROCK-ⅠmRNA的水平在增生性瘢痕中的表达较正常皮肤明显增强，差异有显著性(P<0.05)。结论：RhoA和ROCK-Ⅰ在增生性瘢痕中过量表达，可能在增生性瘢痕形成过程中具有重要的意义。     

基因物质p63、β1整合素对正常人不同部位皮肤表皮干细胞的表达和意义

目的　探讨基因物质 p63、β1整合素对正常人不同部位皮肤表皮干细胞的表达情况及意义。方法　在 5例正常人尸体上各取 2 1个不同部位的全层皮肤组织 ,采用免疫组织化学SP法 ,用基因物质 p63、β1整合素作为第一抗体标记表皮干细胞 ,并通过图像分析 ,研究表皮干细胞在正常人不同部位皮肤中的表达情况。结果　 (1)头皮 p63的PU值 [阳性单位 (% ) ] (4 2 .17± 3 .10 )最大 ,与面皮、腋部、上臂内侧、前臂内侧、腰背部、手背、足背及足底差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;足背p63的PU值(2 1.19± 6.89)最小 ,与身体其他部位差异均有显著性 (P <0 .0 5 )。头皮CD2 9的PU值 (2 9.13± 4.99)最大 ,与身体其他部位差异均有显著性 (P <0 .0 5 ) ;足底CD2 9的PU值 (11.89±1.5 2 )最小 ,阴囊与面皮、腰背、上臂内外侧、手掌、手背、腹部及足底差异有显著性 (P <0 .0 5 )。(2 )正常人不同部位多毛组与汗毛组 p63、CD2 9的PU值差异有显著性(P <0 .0 0 0 1)。(3 )躯干组与四肢组p63、CD2 9的PU值差异无显著性 (P >0 .0 5 )。(4 )屈侧与伸侧p63、CD2 9的PU值差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　 (1) p63、CD2 9对正常人不同部位皮肤表皮干细胞的表达不同 ,头皮、阴阜、阴囊皮肤组织中的阳性表达较高 ,而其他部位皮肤组织中     

胶原蛋白海绵在多种创面修复中的应用

目的：探讨胶原蛋白海绵在不同类型创面上有无促进创面愈合的作用。方法：选择56例患有不同类型创面的患者，用胶原蛋白海绵敷贴于取皮区、Ⅱ度烧伤、慢性溃疡创面上或填塞于压疮所致的窦道的底部为实验组．常规治疗为对照组；观察愈合的经过、愈合的时间，并作组织病理学检查。结果：14例取皮区创面使用胶原蛋白海绵的愈合时间是(2．86&;#177;0．86)d,对照组为(4．14&;#177;0.86)d，两者比较差异有显著性意义(P&;lt;0.01；Ⅱ度烧伤创面治疗组愈合时间是(6．75&;#177;1．39)d．对照组为(10．63&;#177;1．19)d．两者比较差异有显著性意义(P&;lt;0．01)；肉芽创面、慢性溃疡创面、压疮创面总显效率83．3％，总有效率100％；组织病理：对照组肉芽组织中可见较多内皮细胞增生形成的实性细胞簇及扩张的新生毛细血管．在毛细血管周围有散在新生的纤维母细胞。可见大量的胶原纤维形成，胶原纤维排列无序，部分融合。实验组早期及中期成纤维细胞及毛细血管数量明显多于对照组，成纤维细胞转化为纤维细胞的时期较对照组早，胶原纤维的产生增加，排列更有序。结论：胶原蛋白海绵对创面修复及愈合，加速肉芽组织的生长、促进慢性溃疡和压疮创面生长等方面均有显著的作用。