iNOS N端融合蛋白在大肠杆菌中的表达及抗体制备

目的表达ｉＮＯＳＮ端片段并制备ｉＮＯＳ特异性抗体。方法将ｉＮＯＳＮ端片段装入原核表达载体ｐＥＴ－２８ａ（＋）,在大肠杆菌ＢＬ２１中表达,Ｈｉｓ．ＢｉｎｄＴＭ柱亲和层析分离纯化及凝胶蛋白回收的两步纯化法纯化目的蛋白,使用纯化蛋白制备ｉＮＯＳ多克隆抗体。结果得到具有较高表达量的融合蛋白,经两步纯化获得ｉＮＯＳＮ端融合蛋白纯品,将此蛋白免疫家兔,得到ｉＮＯＳ多克隆抗体,Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ证实该抗体具有较好的反应性及特异性。结论原核表达ｉＮＯＳＮ端片段制备ｉＮＯＳ抗体具有很好的特异性。     

PTEN在转移性结直肠癌患者中使用西妥昔单抗的预测作用

结直肠癌是常见的消化道恶性肿瘤,其发病率和死亡率在全球范围保持上升趋势。目前,治疗晚期或转移性结直肠癌使用的药物主要有5-FU/LV、伊立替康、奥沙利铂、卡培他滨和靶向药物,包括西妥昔单抗和贝伐珠单抗。然而靶向治疗在不同患者中的获益率却存在差异,目前推荐西妥昔单抗用于K-ras基因野生型患者,治疗前检测肿瘤K-ras基因状态可作为疗效预测因子。除此以外,EGFR活化通路中的其他一些预测因子如BRAF、PIK3CA、PTEN等对靶向治疗的疗效亦有一定的预测作用。作者在系统回顾已有研究结果的基础上,对PTEN等预测因子在转移性结直肠癌患者中使用西妥昔单抗等靶向治疗的预测作用进行了总结,并归纳了近年来结直肠癌个体化治疗的发展。     

ICU患者肠内营养并发腹泻证据汇总

目的 检索并获取ICU患者实施肠内营养支持期间并发腹泻的相关证据,为ICU相关科室提供参考,以降低ICU患者肠内营养腹泻的发生率.方法 应用循证护理的方法,针对实施肠内营养支持并发腹泻提出问题,并使用计算机检索引擎检索关于肠内营养支持并发腹泻的相关研究,采用约翰霍普金斯循证护理实践模型对各类研究进行文献质量评价及证据级别评定.结果 结合专业人员的判断,汇总出33条ICU患者肠内营养支持并发腹泻的证据,包括腹泻的识别、评估、肠内营养腹泻相关因素、营养配方的选择、鼻饲/管饲给药、营养制剂的保存等方面.结论 建议临床科室在对证据进行应用时,需要评估所在医疗机构的临床环境/条件、医务人员应用证据的促进因素及阻碍因素、患者意愿及偏好等针对性的选择证据.同时,由于最佳证据随着时间的推移不断更新,应用者还持续对证据进行更新,最终通过应用最佳证据,以科学的护理方法解决肠内营养并发腹泻的问题,提升护理质量.     

诱生型一氧化氮合酶抗体的制备与初步应用

目的制备诱生型一氧化氮合酶 (iNOS)特异性抗体并应用于iNOS检测。方法将iNOSN端片段装入原核表达载体pET 2 8a(+) ,在大肠杆菌BL2 1中表达 ,两步法纯化目的蛋白 ,使用纯化蛋白制备iNOS多克隆抗体。获得的抗血清用于小鼠巨噬细胞及小鼠脑缺血模型中iNOS的检测。结果得到具有较高表达量的融合蛋白 ,经两步纯化获得iNOSN端融合蛋白纯品 ,将此蛋白免疫家兔 ,得到iNOS多克隆抗体 ,Westernblot分析表明该抗体不与nNOS、eNOS交叉反应 ,而能检测组织、细胞中的iNOS。结论原核表达iNOSN端片段制备的iNOS抗体具有很好的反应性及特异性     

异搏定促进VP_(16)诱导HL-60细胞凋亡机制的初步探讨

目的　深入了解异搏定 (verapamil,VER)对鬼臼乙叉甙 (etoposide,VP1 6)增敏作用的机制。方法　以人急性髓性白血病细胞株 HL- 60为研究对象 ,运用 DNA电泳、流式细胞仪 (flow cytom etry,FCM)两种方法观察细胞凋亡现象 ,用 Western blotting方法测定凋亡相关蛋白 bcl- 2表达水平。结果　 5 m g/ L VER可增强 VP1 6的诱导细胞凋亡作用 ,并可下调 bcl- 2蛋白表达水平。结论　 VER对 VP1 6具有增敏作用与其具有增强 VP1 6诱导 HL- 60细胞凋亡作用有关 ;Bcl- 2蛋白可能是这一作用的靶点。     

上海市普陀区病原微生物实验室医疗废物管理现状

目的了解普陀区病原微生物实验室医疗废物管理现状,为实验室医疗废物管理和实验室生物安全管理提供依据。方法通过问卷调查和现场监督检查对57个产生医疗废物的实验室进行调查分析。结果不同性质单位和不同级别实验室的医疗废物管理制度全面性有差异,非医疗卫生单位实验室的医疗废物处置设备设施有欠缺,医疗废物集中处置能力不能满足小型医疗机构和非医疗卫生单位的医疗废物处理需求。结论病原微生物实验室的薄弱环节需加强管理,要完善医疗废物管理制度,引入实验室建筑预审工作理念,着力解决医疗废物处置需求与处置能力间的矛盾,并建议根据实验室所属机构性质分类管理。     

盐酸利多卡因凝胶在重度前列腺增生患者导尿中的应用

目的:探讨盐酸利多卡因凝胶在重度前列腺增生患者导尿中的应用方法及效果。方法:将100例重度前列腺增生患者随机分为对照组和实验组各50例,对照组以液状石蜡作为润滑剂行导尿术,实验组以盐酸利多卡因凝胶作为润滑剂行导尿术。比较两组患者留置导尿管时一次置管成功率及尿道刺激情况。结果:实验组导尿一次置管成功率明显高于对照组(P<0.05),尿道刺激反应程度明显低于对照组(P<0.05)。结论:将盐酸利多卡因凝胶作为润滑剂应用于重度前列腺增生患者导尿,可明显提高一次置管成功率,减少尿道刺激。     

关于紧张型头痛患者情绪认知睡眠质量改变的研究

目的通过对紧张型头痛(tension-type headache,TTH)与情绪、睡眠质量之间关系的研究,探讨紧张型头痛的发病机制以指导紧张型头痛的诊治。方法共入选147例2013-07—2014-03就诊于潍坊市人民医院神经内二科门诊及病房诊断为紧张型头痛患者为TTH组,入选同期60例性别、年龄及受教育程度相匹配的健康体检者及病房健康陪护家属作为对照组。测评TTH组及对照组汉密顿焦虑量表、汉密顿抑郁量表、MoCA量表、匹茨堡睡眠质量指数量表得分。结果 TTH组患者汉密顿焦虑量表得分、汉密顿抑郁量表得分、匹茨堡睡眠质量指数量表得分明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P0.05)。TTH组中MoCA量表得分明显低于健康对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论焦虑抑郁情绪及睡眠质量差是造成和加重紧张型头痛的重要危险因素。TTH可能对患者认知产生影响。