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大鼠肺动脉平滑肌细胞Rho激酶对 p-Smad1核迁移的作用及机制 总被引:1,自引:1,他引:0
目的: 研究Rho激酶对p-Smad1核迁移的作用及信号转导途径,探讨它们在肺血管重构中的作用机制。方法: 分离培养大鼠远端肺动脉平滑肌细胞,应用血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)启动肺动脉平滑肌细胞Rho激酶信号通路,应用骨形态发生蛋白2(BMP-2)启动BMP信号通路,并用Rho激酶抑制剂Y-27632、MEK抑制剂U0126进行干预。培养细胞分成5组:(1)对照组;(2)BMP-2组;(3)BMP-2+PDGF-BB组;(4)BMP-2+PDGF-BB+Y-27632组;(5)BMP-2+PDGF-BB+U0126组。免疫荧光染色标记p-Smad1在细胞核内外的分布并计算p-Smad1核迁移阳性细胞百分数(即核迁移率)。分离平滑肌细胞核蛋白和胞浆蛋白,Western blotting分析p-Smad1在细胞内的总量和细胞核内外相对含量的变化。Kit-WST-8试剂盒检测细胞增殖。结果: BMP-2组p-Smad1在细胞内的总量、在细胞核中的相对含量和核迁移率明显高于对照组(P<0.05);BMP-2+PDGF-BB 组p-Smad1的核迁移率和在细胞核中的相对含量明显低于BMP-2组(P<0.05),但是细胞内p-Smad1总量无明显改变(P>0.05);BMP-2+PDGF-BB+ Y-27632组和BMP-2+PDGF-BB+U0126组细胞内p-Smad1的总量、在细胞核中的相对含量和核迁移率与BMP-2组基本相似(P>0.05)。BMP-2组的A值明显小于对照组(P<0.05);PDGF-BB+BMP-2组的A值明显大于BMP-2组(P<0.05)且大于对照组(P<0.05);BMP-2+PDGF-BB+Y-27632组和BMP-2+PDGF-BB+U0126组的A值均小于PDGF-BB+BMP-2组(P<0.05)。结论: 在大鼠肺动脉平滑肌细胞,PDGF-BB激活的Rho激酶通过MEK/ERK1/2抑制BMP-2引起的p-Smad1核迁移,促进平滑肌细胞增殖。 相似文献
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在产科临床上,为了降低围产期胎儿患病率和死亡率,迫切需要一种可靠的胎儿监护指标。目前认为测定24小时孕妇尿中雌二醇,可作为观察胎儿胎盘功能指标之一。我们从1979年9月开始对高危妊娠作尿雌三醇测定,以预测宫内胎儿状况,并观察其临床实用意义。现将20例23人次的实验结果,介绍如下。 相似文献
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本研究旨在探讨人脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UB-MSC)的衰老对其免疫调控能力的影响。从人脐带中分离MSC并进行传代培养,通过形态学观察其核质比的变化。分别选取第5代(对照组)及第13代(衰老组)MSC进行研究,运用细胞衰老特异性β-半乳糖苷酶检测试剂盒进行衰老检测,并采用CCK-8细胞计数试剂盒检测MSC对淋巴细胞增殖能力的影响,最后通过RT-PCR方法检测免疫调控相关基因在衰老MSC的表达情况。研究结果表明,随传代次数增加,MSC的长宽比增大,核质比减小。细胞衰老检测结果显示,第13代MSC的衰老细胞比例明显增加,但在体外混合淋巴细胞培养体系中,第13代MSC对淋巴细胞增殖的抑制作用与第5代相比明显增强(P<0.05),且第13代细胞免疫抑制相关基因表达增加,促炎相关基因表达减弱。结论:脐带间充质干细胞随体外培养代数增加而逐渐衰老,但免疫抑制能力逐渐加强。 相似文献
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目的:研究撤除表皮生长因子(EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)对人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)的增殖和胞外基质(ECM)表达的影响。方法:将第5代hUCMSCs分3组:对照组(保持上述生长因子浓度不变),半量撤除组(使生长因子浓度减半),完全撤除组(不添加生长因子)。培养30h后瑞特-姬姆萨法染色观察细胞形态,MTT法细胞计数。培养15h后,定量PCR检测BCL-2、BAX及胞外基质基因的表达情况。结果:撤除生长因子后细胞增殖减慢,形态变大,核质比减小,BCL-2/BAX比率增高,胞外基质表达多数下调。半量撤除组细胞的形态、增殖能力、胞外基质表达的改变相对较小,BCL-2/BAX比率增高更明显。结论:撤除生长因子会影响细胞增殖和胞外基质的表达,保留半量生长因子可以改善这种情况。 相似文献
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1404例遗传咨询外周血染色体核型分析——异常核型119例含6例世界首报 总被引:1,自引:1,他引:0
本文对1982—1991年间1404例遗传病可疑病例进行外周血染色体核型检测,发现异常核型119型,占8.48%(119/1404),其中6例为世界首报,1例为国内首报。并对核型异常与临床表现的关系进行1分析。发现:(1)反复流产夫妇292例(146对)中,异常核型27例,异常率9.2%。高于国内水平,以平衡易位为多见(20/27),并发现4例随体区异常致流产的丈夫,核型为sV(13ps—3例14ps—1例)。(2)智力低下237例中桩型异常26例,异常率11%,较国外近年报道为低。以21—三体为多见。其中1例父为易位型携带者,表型正常,核型46,XY/46,XY,-9, (9pq21q),其子代全为三体型。此种遗传形式尚未见报道。可能与随体联合有关。(3)闭经,共129例,异常核型22例,异常率17.8%(22/129)。以女性性腺发育不全为多(15/22)。主要为45,XO,个别嵌合休或X长臂缺失。其中1例核型46,XX,t(7:18)(q24;q11.2)的原发性闭经条萦状性腺者属罕见病例,有待进一步研究。(4)性发育异常均为17岁以下儿童,共111例,核型异常10例,异常率9.1%(10/111)。9例均为性染色体异常。唯1例男孩,17岁,核型46,XY,inv(5)(q13.3q34)未见过报道。(5)不孕症共187例.异常核型19例,异常率10.1%(19/187),皆为男方。18例核型均为47,XXY,1例嵌合体。(6)不良孕产史者287例中,异常核型8例,异常率2,8%(8/287),多数为性染色体三体型。另有3例大Y父亲发生畸形儿。病因国内外尚未统一。对随体致异,略加讨论。本文结果显示,染色体核型检测在妊娠胎儿丢失、智力低下、性别异常及闭经、不孕的诊断上,有肯定价值。 相似文献
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目的 探讨血小板衍生生长因子(PDGF)对人脐带间充质干细胞(UCMSCs)增殖和细胞外基质(ECM)表达的影响及其可能的作用机制。方法 体外传代培养UCMSCs,分为对照组和实验组,其中对照组不加PDGF,实验组分别加入不同质量浓度(2、5、10、20、50μg/L)的PDGF。加入PDGF 12h后,用qRT-PCR法检测ECM基因和凋亡相关基因(Bcl 2、Bax)的表达;加入PDGF 24h后,用四甲基偶氮唑(MTT)法检测细胞增殖。结果 与对照组比较,随着PDGF质量浓度的增加,反映细胞代谢活性的OD值逐渐增加,且PDGF质量浓度在20μg/L时达到最高值,但PDGF质量浓度为50μg/L时OD值反而降低;PDGF质量浓度为2μg/L时,ECM表达和Bcl 2/Bax比值较对照组有所降低,随着PDGF质量浓度的增加,ECM的表达和Bcl 2/Bax比值呈现先增高后降低的趋势,且在10μg/L时达到最高值。 结论 PDGF可以促进脐带间充质干细胞的增殖,同时能促进其ECM的表达,还能提高细胞耐受凋亡的能力,最佳作用质量浓度为10μg/L。 相似文献
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自1984~1989年,我室对160例2次或2次以上反复流产夫妇,分别进行了外周血细胞染色体检查。每例计数50个细胞分裂像,并分别进行了G、C显带和高分辨G显带,镜检照像分析核型5个细胞以上,共检出异常核型12例异常率为7.5%。其中有4例为世界首报均为平衡易位。1例为国内首报为臂间倒位。现将这5例报告如下: 相似文献
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汪大琨 《第三军医大学学报》1985,(2)
本文记述了使用改变的Shah方法,对人类羊水细胞染色体高分辨G显带获得成功。本技术对产前诊断,具有应用和临床意义。在国内我们的实验室领先掌握了羊水细胞染色体高分辨G显带技术。 相似文献