人甲状腺球蛋白的提取和纯化

目的：提取高纯度的甲状腺球蛋白（Ｔｇ）,为制备Ｔｇ抗血清及Ｔｇ单克隆抗体,建立Ｔｇ的检验方法及ＴｇＡｂ的测定方法做准备。方法：将手术切除的新鲜人甲状腺组织,加入生理盐水匀浆、过滤,把滤液浓缩,经二次ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００柱层析,再经ＤＥＡＥ纤维素离子交换层析。结果：获得较高纯度的人Ｔｇ,经ＳＤＳＰＡＧＥ鉴定,显示为１条区带,表明纯度较高,经免疫电泳鉴定,提纯的Ｔｇ有较好的免疫活性。结论：这种提     

分子识别理论在促甲状腺激素受体系统的应用

目的:观察促甲状腺激素受体(TSHR)分子上的特定片段-TR1(aa37-45)、TR2(aa353-366)和TR3(aa648-655)与其相应的反义肽- RT1(aa45-37)、 RT2(aa366-353) 和RT3(aa655-648)之间的选择性识别。方法:制备固相反义肽亲和层析柱-RT1-sepharose 4B, RT2-sepharose 4B和RT3-sepharose 4B,采用阶段洗脱法,观察相应天然肽- TR1、TR2 和TR3 在柱上的滞留行为。结果: TR1、TR2和 TR3与其相应的反义肽之间存在选择性识别,而反义肽RT1且能识别TSHR大分子; 此外, 牛促甲状腺激素(bTSH)蛋白还能被TR1识别。 结论:本实验证实了分子识别理论在促甲状腺激素受体系统的存在,它可能用于生物大分子蛋白质的分离、促甲状腺激素(TSH)与受体(TSHR)结合位点的测定,并用于实验性自身免疫性甲状腺炎大鼠的实验性治疗。     

人血清泌乳素放射受体分析及垂体腺瘤患者血清泌乳素分子形式的研究

本研究利用大鼠肝膜泌乳素受体为特异竞争结合蛋白，在国内首次建立了泌乳素放射受体分析法。该方法对泌乳素测定具有高度特异性，灵敏度为５．０±１．４ｍＩＵ／ｄｌ，批内和批间变异系数分别不超过８．８％和１１．３％，泌乳素的血清回收率为９８．６±５．０％。对垂体腺瘤的研究发现，血清泌乳素至少存在三种不同的分子形式。其表现分子量分别为９８．６ｋＤａ、５０．９ｋＤａ和２４．６ｋＤａ，它们的受体结合活性分别为５．４２ＩＵ／ｍｇ、１１．２２ＩＵ／ｍｇ和３９．６０ＩＵ／ｍｇ。与垂体非泌乳素腺瘤相比，在垂体泌乳素腺瘤患者血清中“巨”泌乳素和“大”泌乳素所占比例较高，而“小”泌乳素显著降低。     

大鼠巨噬细胞肿瘤坏死因子的分泌与内毒素剂量关系的初步分析

目的：确定内毒素(LPS)诱导巨噬细胞产生肿瘤坏死因子(TNF)的适宜用量，建立内毒素感染的细胞模型。方法：选用不同剂量的LPS，刺激大鼠腹腔巨噬细胞，分别于不同的刺激时间收集细胞培养上清。TNF细胞毒效应用L929细胞和WEHI-164细胞检测，TNF-α浓度用ELISA法检测。结果：当LPS使用浓度为0．1μg／ml至5μg／m1时，其诱导产生的TNF细胞毒效应有逐渐增加的趋势，超过此剂量时，TNF细胞毒效应反而降低；巨噬细胞TNF的分泌量也随LPS剂量的增加而减少。结论：LPS在一定的浓度范围内，巨噬细胞培养上清中TNF含量明显增多，但LPS浓度过高反而会使TNF分泌量减少。     

牛脑垂体前叶诸促激素之分离提取

脑垂体前叶所分泌的若干促激素,作用复杂,影响广泛,常为一些病变的主要因素,所以这些激素的测定有其一定的重要性。今将我们的工作介绍如下:     

酶联免疫吸附试验在甲状腺球蛋白诊断中的初步应用

酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)为70年代的一项免疫学科技术,具有较高的特异性、敏感性,目前被广泛应用于微生物学、血液学、寄生虫学及内分泌学等方面,但在内分泌学领域的应用还不够成熟。Van Weeman和Shuurs曾报导酶标法已用于HCG的测定,以后他们又用同法测定雌性激素,但敏感性较差。最近Yorde等用一种同类型的竞争性酶免疫测定法测定HCG其结果与放射免疫法相同。此外也曾用于胰岛素、亲甲状腺素及甲状腺球蛋白等的测定。     

应用催产素反义肽识别催产素体复合物

应用催产素反义肽识别催产素体复合物陆凤先王伟汤特应用催产素反义肽识别催产素体复合物@陆凤先@王伟@汤特...     

研究脂多糖在建立内毒素感染细胞模型中的应用

目的 :从大肠杆菌中制备LPS ,经凝胶色谱纯化 ,用纯化的LPS诱导大鼠腹腔巨噬细胞产生TNF ,建立内毒素感染的细胞模型。方法 :收集培养的大肠杆菌 ,洗去菌毛 ,冻干研磨成菌粉 ,经沸水浴提取 ,蛋白酶K消化 ,制成初提物。再用SephadexG -75色谱柱洗脱 ,收集纯化的组分。将纯化的LPS ,稀释成不同的浓度加入长有巨噬细胞的培养板中 ,刺激一定的时间后 ,收集上清液。用ELISA方法检测上清液中的TNF -α含量。结果 :纯化的LPS用紫外/可见光分光光度计扫描 ,呈单一吸收峰 ,并能被鲎试剂特异检出。用2.5μg/ml和5μg/mlLPS诱导巨噬细胞 ,24h后 ,培养上清液中的TNF -α含量分别为(8.13±1.25)pg/ml和(7.50±4.51)pg/ml(x±sn=4)。结论 :本法制备的LPS纯度较高 ,对鲎试剂高度敏感 ,有较好的内毒素活性 ,能满足建立内毒素感染的细胞模型的需要。该法简便、快速、适合实验室小量制备