shRNA稳定抑制XIAP和survivin表达对胰腺癌细胞生物学特征的影响

目的:探讨慢病毒载体介导的RNA干扰(RNAi)技术对胰腺癌细胞X-连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)和生存素(survivin)的抑制作用及对胰腺癌细胞增殖、凋亡及化疗敏感性的影响。方法:应用pGCSIL-PUR和pGCSIL-NEO分别构建针对XIAP和survivin的shRNA慢病毒载体,转染胰腺癌细胞株SW1990和Panc-1,经嘌呤霉素和新霉素筛选并扩大培养得到稳定转染株;实时荧光定量PCR和Western blot检测胰腺癌细胞内XIAP和survivin的表达;MTT法检测细胞增殖和化疗敏感性;caspase-3/7活性测定和DAPI染色分析细胞凋亡情况。结果:筛选XIAP和survivin的有效干扰靶点后,获得XIAP和survivin表达稳定抑制的SW1990和Panc-1细胞株。MTT检测显示稳定抑制XIAP或survivin后,两种胰腺癌细胞增殖均明显减弱,且两者联合抑制后作用增强;虽然抑制XIAP或survivin后对两种胰腺癌细胞凋亡无明显影响,但能明显增加其对化疗药物(5-FU,吉西他滨)的敏感性,且两者联合抑制后作用明显增强。结论:慢病毒载体介导的靶向XIAP和survivin的RNAi可有效抑制XIAP和survivin的表达,降低胰腺癌细胞的增殖能力并增强其对化疗药物的敏感性,且两者联合具有协同作用。     

上尿路结石并发急性肾衰的诊治体会

目的：探讨上尿路结石并发急性肾衰的诊断与治疗。方法：回顾性分析22例上尿路结石并发急性肾衰患者的临床资料。结果：8例行一次急诊双侧输尿管或／和肾盂取石术，12例行一侧取石术，2例行分次两侧手术。全部病人痊愈出院。结论：早期诊断，及早解除梗阻是保护和改善肾功能的关键。     

腹腔镜下肾癌根治术

目的　探讨经腹入路腹腔镜下肾癌根治术的手术方法。方法　 3 8例肾癌患者施行了手术 ,患者采用全侧卧位 ,用 3～ 4个套管针 ,镜下切开侧腹膜显露肾周筋膜前面 ,在肾动静脉根部分别用线结扎及钛夹钳夹后切断 ,低位切断输尿管 ,沿肾筋膜外完整切除肾脏及肿瘤 ,清扫肾门旁、腹主动脉及下腔静脉旁淋巴结 ,小切口取出肾脏。结果　手术时间 75～ 2 5 0min ,平均 110min ;出血 5 0～ 3 0 0ml,均未输血。术后恢复良好 ,疼痛较轻 ,无明显并发症。结论　经腹入路腹腔镜下肾癌根治术 ,术中暴露良好 ,便于肾动静脉处理及淋巴结清扫 ,肾筋膜外切除肾脏完整取出符合肿瘤治疗原则 ,可减少种植转移。