人衰老成纤维细胞c—fos基因对DNasiⅠ的敏感性分析

研究人衰老成纤维细胞ｃ－ｆｏｓ基因染色质结构状态。ＤＮａｓｅⅠ敏感性分析法。结果衰老胞胞ｃ－ｆｏｓ基因在表皮生长因子诱导后对ＤＮａｓｅⅠ的敏感性无明显变化，而年轻细胞对ＤＮａｓｅⅠ的敏感性显著升高。结论：衰老细胞的ｃ－ｆｏｓ基因可能在异染色质上，和于半闭状态，因而不易为ＥＧＦ所诱导。     

雄激素调控前列腺癌中PTTG1表达的研究

目的:阐明雄激素与前列腺癌中雄激素应答基因PTTG1(pituitary tumor transforming gene 1)表达的关系.方法:选择基因芯片筛选的大鼠前列腺雄激素应答基因PTTG1,应用Northern Blot检测其在去势大鼠补充雄激素Mib(Mibolerone)前后在前列腺组织中的表达.应用免疫组化检测PTTG1在人前列腺癌组织中的表达,进一步以Northern Blot检测雄激素依赖性前列腺癌细胞系LNCaP及雄激素非依赖性前列腺癌细胞系 PC3和DU145中PTTG1的表达情况.结果:PTTG1在去势7 d的大鼠前列腺组织中没有表达,而补充Mib 2 d后即有显著的表达;PTTG1主要表达于人前列腺癌上皮细胞;0.1 nmol/L Mib作用48 h可显著上调LNCaP细胞PTTG1的表达;与LNCaP细胞比较,PC3和DU145中PTTG1的基础表达水平更高.结论:雄激素可显著上调大鼠前列腺组织及人前列腺癌细胞中PTTG1的表达,提示PTTG1可能在人前列腺癌的发生、发展中发挥重要的作用.     

大鼠衰老过程中肝细胞活性染色质DNA的甲基化

用高效液相色谱（ＨＰＬＣ）法测定大鼠衰老过程中肝细胞活性染色质与非活性染色质ＤＮＡ甲基化程度的变化。结果表明，老年鼠肝细胞活性染色质ＤＮＡ甲基化程度较青年鼠的低，二者有显著性差异；而老年鼠肝细胞非活性染色质ＤＮＡ甲基化程度较青年鼠高，亦具有显著性差异，这表明衰老过程中基因组ＤＮＡ各组分甲基化程度的变化不一致。     

雌激素对Ca2+通道亚型Cav1及Cav3在子宫内膜癌细胞中表达的影响

子宫内膜癌是最常见的女性生殖道三大恶性肿瘤之一,其发生、发展与高雌激素水平相关,多见于老年妇女,近年来发病率有升高趋势.有关子宫内膜癌发病机制,传统的观点是雌激素与其核受体(nER)结合,激活下游元件调控相应的基因转录,使细胞增殖;而Wang等[1]证明了子宫内膜癌细胞膜上存在雌激素膜受体(mER),并且雌激素能够调控mER的表达;Zhang等[2]发现,雌激素可以通过细胞膜引起Ca2+浓度快速增高.     

大鼠衰老过程中肝细胞活性染色质DNA的甲基化

用高效液相色谱（ＨＰＬＣ）法测定大鼠衰老过程中肝细胞活性染色质与非活性染色质ＤＮＡ甲基化程度的变化。结果表明，老年鼠肝细胞活性染色质ＤＮＡ甲基化程度较青年鼠的低，二者有显著性差异；而老年鼠肝细胞非活性染色质ＤＮＡ甲基化程度较青年鼠高，亦具有显著性差异，这表明衰老过程中基因组ＤＮＡ各组分甲基化程度的变化不一致。     

DNA甲基化与衰老

DNA甲基化在基因表达调控和维持细胞的正常分化状态起着重要的作用。衰老过程中DNA甲基化水平的改变势必引起基因表达和细胞分化状态的异常,本文就DNA甲基化与衰老的关系综述如下。     

IL-1和TNF-α拮抗剂治疗骨关节炎实验研究

目的:观察腺病毒载体介导的白细胞介素1受体拮抗蛋白(IL-1Ra)和可溶性肿瘤坏死因子Ⅰ型受体(sTNF-RI)基因转移对兔骨关节炎的治疗作用,并探讨IL-1和TNF-α在骨关节炎发生中的作用。方法:构建Ad-IL-1Ra和Ad-sTNF-RI腺病毒载体,注射到兔骨性关节炎膝关节腔内。关节内注射腺病毒后第3天和第7天,分别用1ml生理盐水灌洗膝关节,抽取关节腔灌注液采用ELISA分析外源基因的表达。第7天处死动物,取膝关节股骨内侧髁软骨和滑膜常规石蜡切片,软骨HE染色、甲苯胺蓝染色和滑膜组织HE染色检查病理改变,并进行软骨组织学评分。结果:膝关节内注射IL-1Ra能明显抑制关节软骨的破坏,但对滑膜炎无明显治疗作用;单独sTNF-RI基因治疗对关节软骨的破坏和滑膜炎均无明显的作用。结论:IL-1Ra对骨关节炎关节软骨有明显的保护作用,而sTNF-RI对骨关节炎无明显的治疗作用,这提示在骨关节炎的发生中IL-1可能起主要的作用,因而抑制IL-1的作用对骨关节炎的治疗更为有效。     

壳聚糖载体介导的骨关节炎基因治疗

目的:探讨由壳聚糖载体介导的骨性关节炎的基因治疗。方法:分别制备壳聚糖pcD-NA3.1-IL-1Ra和壳聚糖pcDNA3.1-IL-10纳米粒复合物,采用该复合物转染体外培养的正常原代兔关节软骨细胞,并将其作为药物直接注射进骨关节炎模型兔关节腔内。分别采用RT-PCR、ELISA和免疫组化方法从mRNA水平和蛋白水平检测目的基因的转染情况,并对治疗后实验动物的关节软骨和滑膜进行大体组织学观察。结果:正常原代软骨细胞转染后,在mRNA水平上检测到外源基因的水平升高;体内转染后,在蛋白水平上检测到目的蛋白在关节软骨内有阳性染色,且经基因治疗的兔关节软骨的破坏程度明显轻于未经基因治疗的对照组。结论:壳聚糖是一种较理想的基因载体,可用于早期骨性关节炎的基因治疗。     

老年细胞原癌基因c-fos、c-myc基因可诱导性减退与特异转录因子的关系

目的观察人胚肺二倍体成纤维细胞的老年细胞中原癌基因ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｍｙｃ表达的变化及其与特异转录因子的关系。方法使用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交法检测ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｍｙｃ基因表达情况，使用Ｓｏｕｔｈｗｅｓｔｅｒｎ印迹杂交法检测特异转录因子。结果表皮生长因子（ＥＧＦ）对老年细胞中ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｍｙｃ转录的可诱导性下降，使与ｃ－ｆｏｓ基因片段特异结合的蛋白质Ｐ９１和与ｃ－ｍｙｃ基因片段特异结合的蛋白质Ｐ８０明显降低。结论老年细胞中ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｍｙｃ基因转录对ＥＧＦ可诱导性下降，可能与其结合的转录因子活性改变有关。     

老年细胞原癌基因c—fos,c—myc基因可诱导性减退与特异转录因…

目的 观察人胚肺二倍体成纤维细胞的老年细胞中原癌基因ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｍｙｃ表达的变化及其与特异转录因子的关系。 方法 使用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交法检测ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｍｙｃ基因表达情况，使用Ｓｏｕｔｈｗｅｓｔｅｒｎ印迹杂交法检测特异转录因子。 结果 表皮生长因子（ＥＧＦ）对老年细胞中ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｍｙｃ转录的可诱导性下降，使与ｃ－ｆｏｓ基因片段特异结合的蛋白质Ｐ９１和与ｃ－ｍｙｃ基因片段特异结