新型冠状病毒侧流免疫层析法研究进展

当前新型冠状病毒肺炎疫情仍在世界范围内持续流行,新型冠状病毒肺炎患者临床表现呈现新的特点,快速且准确地诊断新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者对于疾病的防控至关重要。中华人民共和国国家卫生健康委员会新型冠状病毒肺炎诊疗方案(试行第七版)将血清学诊断作为确诊的依据。血清学诊断主要包括酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)、侧流免疫层析测定(lateral flow immunoassay, LFIA)和化学发光免疫测定(chemiluminescent immunoassay, CLIA)。本文总结了国内外LFIA在COVID-19检测中的研究,供相关研究者和工作者参考。     

2011～2013年某院常见病原菌分布及耐药性分析

目的：了解该院2011～2013年临床常见病原菌分布及耐药性,为科学合理使用临床抗菌药提供依据。方法对近3年该院临床送检标本中病原菌分布及药敏结果进行回顾性分析。结果共分离出病原菌25405株,其中革兰阳性菌4365株,约占17．18％,革兰阴性菌14478株,约占56．99％,真菌6562株,约占25．83％。该院革兰阴性菌检出率明显高于革兰阳性菌,常见的革兰阴性菌依次为铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌。革兰阴性菌对多种药物呈不同程度的耐药性。鲍曼不动杆菌对头孢哌酮／舒巴坦耐药率小于20％,其他抗菌药物耐药率均大于70％,整体耐药率比较高。革兰阳性菌以葡萄球菌为主,其次是肠球菌,均对利奈唑烷、万古霉素敏感性高,对青霉素耐药率大于60％。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌连续3年在金黄色葡萄球菌中检出率偏高。白色念珠菌为最常见的真菌,其对氟胞嘧啶、伊曲康唑、氟康唑、两性霉素B和伏力康唑几乎全部敏感。结论病原菌耐药性有升高趋势,应重视细菌培养,根据药敏结果合理选择抗菌药物,减缓细菌耐药的发生。     

分子诊断在检验科的发展与未来

随着人类基因图谱绘制的完成和生物医学的发展，分子诊断技术成为21世纪最有潜力的学科之一。分子诊断是将分子生物学原理和技术应用于疾病诊断而产生的一门新兴的检验医学技术，是以疾病相关基因及其产物为检测对象，从分子水平来探讨疾病发生和发展的机制，从而为疾病的预防、诊断、疗效评估、预后判断等提供关键信息和决策依据。是当代医学发展的重要前沿领域之一，其核心是基因诊断技术。     

细胞因子联合对4.5 Gy γ射线照射 比格犬的实验治疗作用

目的 观察细胞因子新的组合(rhG-CSF+rhIL-11+rhIL-2)对骨髓型急性放射病(ARS)比格犬的治疗作用。方法 以4.5 Gy  ⁶⁰Co γ射线照射比格犬制备骨髓型ARS动物模型,动物分为照射对照(5只)、综合对症(5只)和综合对症加细胞因子治疗3组(6只),通过观察动物体征、存活时间、存活数以及动物造血及胃肠道等脏器的恢复情况,分析细胞因子联合治疗效果。结果 4.5 Gy  ⁶⁰Co γ射线照射后,比格犬出现食欲下降、发热、精神状态差和柏油便等症状,照射对照组动物于照射后2周内全部死亡,平均存活(12.7±1.4)d;综合对症组呈现明显的急性放射病症状,并于照射后第33天死亡1只;而综合对症加细胞因子组动物在45 d观察期内不仅全部存活,临床症状明显改善,且其造血功能及胃、肠道等受损组织基本恢复。结论 在综合对症基础上给予rhG-CSF+rhIL-11+rhIL-2组合治疗可以有效地促进4.5 Gy ⁶⁰Co γ射线照射比格犬造血系统功能和胃肠道等重要脏器的恢复,提高受照动物存活数,并改善动物生存质量。     

应用二维电泳和质谱技术筛选4.5Gy照射比格犬差异表达蛋白质的初步研究

目的 从分子水平探索细胞因子治疗急性放射病的作用机制。方法 4.5 Gy γ射线照射后收集不同时间点细胞因子治疗组比格犬血清,应用二维电泳分离血清中差异表达的蛋白质,找出其中差异显著的蛋白质点进行质谱分析,并确定蛋白质的氨基酸序列。结果 获得了分辨率较高的凝胶蛋白图谱。共筛选出6个差异表达蛋白质点,成功鉴定出其中的4个蛋白质点。经氨基酸序列分析发现其中一个较有意义的蛋白质是相对分子质量为13 077、等电点为6.26的血清淀粉样蛋白A(SAA)。该蛋白在照射前及照后36 d均无表达,照射后1 d略有增强(吸光度为0.2166),14 d显著增强(吸光度为0.4577)。结论 SAA的表达变化与病程进展相一致,可能对病情的转归有重要的提示意义。     

Studies on mechanism of treatment of granulocyte colony-stimulating factor,recombinant human interleukin-11 and recombinant human interleukin-2 on hematopoietic injuries induced by 4.5 Gy γ-rays irradiation in beagles

Objective To investigate the mechanism of treatment of granulocyte colony-stimulating factor(rhG-CSF),recombinant human interleukin-11(rhIL-11)and recombinant human interleukin-2 (rhIL-2)on hematopoietic injuries induced by 4.5 Gy60 Coγ-ray irradiation in beagles,and to provide experimental evidence for the clinical treatment of extremely severe myeloid acute radiation sickness (ARS).Methods Sixteen beagle dogs were given 4.5 Gy60 Co γ-ray total body irradiation(TBI),then randomly assigned into irradiation control group,supportive care group or cytokines+supportive care (abbreviated as cytokines)group.In addition to supportive care,rhG-CSF,rhlL-11 and rhIL-2 were administered subcutaneously to treat dogs in cytokines group.The percentage of CD34+cells,cell cycle and apoptosis of nucleated cells in peripheral blood were examined by Flow cytometry.Results After 4.5 Gy 60 Co γ-ray irradiation,the CD34+cells in peripheral blood declined obviously(61.3%and 52.1% of baseline for irradiation control and supportive care group separately).The cell proportion of nucleated cells in Go/G1 phase was increased notably(99.27% and 99.49% respectively).The rate of apoptosis(26.93% and 21.29% separately)and necrosis(3.27% and 4.14%,respectively)of nucleated cells were elevated significantly when compared with values before irradiation(P<0.05) 1 d post irradiation.When beagles were treated with cytokines and supportive care,the CD34+cells in peripheral blood were markedly increased(135.6% of baseline).The effect of G0/G1 phase blockage of nucleated cells became more serious(99.71%).The rate of apoptosis(5.66%)and necrosis(1.60%)of nucleated cells were significantly lower than that of irradiation control and supportive care groups 1 d after exposure.Conclusions Cytokines maybe mobilize CD34+cells in bone marrow to peripheral blood,indce cell cycle block at G0/G1 phase and reduce apoptosis,and eventually cure hematopoieticinjuries induced by irradiation.     

继发性高血压相关检测项目不同条件下尿液标本的稳定性研究

目的 分析不同保存温度及不同保存时间继发性高血压相关生物标志物醛固酮(aldosterone, ALD)、17-羟类固醇(17-hydroxysteroid, 17-OHCS)、17-酮类固醇(17-keto steroids, 17-KS)、香草扁桃酸(vanilla mandelic acid, VMA)、微量白蛋白(microalbumin, MALB)及肌酐(creatinine, CREA)尿液样本的稳定性,为临床样本的前处理及检测提供实验依据。方法 收集健康志愿者新鲜尿液样本,利用标准品制备不同浓度尿液样本,高低浓度均匀分布,在加速37℃、室温(18～26℃)、冷藏(2～8℃)、冷冻(-10～-20℃)等不同条件下保存不同时间后分别进行检测,运用Bland-Altman法和偏差分析观察6项指标的一致性和偏差。结果 醛固酮、17-酮类固醇、肌酐尿液样本保存于37℃,可稳定放置11h; 17-羟类固醇尿液样本可稳定8h;香草扁桃酸和微量白蛋白尿液样本不宜在37℃放置。保存于18～26℃条件下,醛固酮尿液样本可稳定放置24h; 17-羟类固醇、香草扁桃酸和肌酐尿液样本可稳定放置4...     

血清胃蛋白酶原水平在胃食管反流病诊断中的应用价值

目的研究血清胃蛋白酶原(pepsinogen,PG)水平在胃食管反流病诊断中的价值,并对三种检测试剂盒进行相关性分析。方法选取2018年8月至2019年2月在火箭军特色医学中心收治的胃食管反流病患者40例,同期健康体检者40例,比较2组血清PGI、PGII及PGI/PGII水平,建立ROC曲线并分析PGI、PGII及PGI/PGII对胃食管反流病诊断的价值。结果胃食管反流病组血清中PGI及PGI/PGII均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),两组血清中PGII水平无显著差异(P>0.05)。ROC曲线分析显示,PGI对胃食管反流病具有诊断价值(曲线下面积0.739),PGII与PGI/PGII诊断价值不大(曲线下面积0.614、0.696)。国产某A产品与雅培检测系统对PGI、PGII及PGI/PGII检测的相关性分别为0.9947、0.9893、0.8063,国产某B产品与雅培检测系统对PGI检测的相关性为0.9427,但PGII与PGI/PGII两者与雅培检测系统相关性为0.7957、0.7695。结论血清胃蛋白酶原水平对胃食管反流病有较好的诊断意义,可作为胃食管反流病实验室诊断的一项新指标。     

大剂量重组人粒细胞集落刺激因子对8.0 Gy 60Co γ射线照射小鼠长期存活率及远后效应的影响

目的 探索重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对8.0 Gy 60Coγ射线照射小鼠长期存活率及远后效应的影响.方法 70只雄性C57BL/6小鼠,随机分为正常对照、照射对照及rhG-CSF大、中、小剂量治疗共5组,除正常对照组外,其他4组均接受8.0 Gy 60Co γ射线照射.治疗组小鼠于照射后0.5和24 h两次分别皮下注射rhG-CSF1000、500和250 μg/kg,随时记录各组动物存活率,照射后70、160和300 d进行外周血细胞计数分析,300 d时检测各组存活小鼠造血和免疫相关指标.结果 照射对照组动物照后19 d内全部死亡,平均存活时间(12.1±3.0)d;rhG-CSF 1000μg/kg治疗组照射后30、100和300 d存活率分别为86.7%、86.7%和80.0%,死亡小鼠平均存活时间较照射对照组明显延长(P＜0.01).照后300 d时,rhG-CSF 1000μg/kg治疗组的外周血红细胞和血小板计数均与正常对照组没有统计学差异,骨髓混合细胞集落形成单位数量显著低于正常对照组(P＜0.01);rhG-CSF治疗组的CD4+/CD8+比值倒置且250μg/kg剂量组明显低于正常对照组(P＜0.05);rhG-CSF治疗组造血和免疫器官的组织病理切片结果显示仍然存在不同程度的病变.结论 rhG-CSF 1000μg/kg治疗可以显著提高8.0 Gy 60Co γ射线照射小鼠存活率,但照射后300 d造血和免疫系统相关指标尚未完全恢复正常.