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目的探讨siRNA抑制饥饿素-O-乙酰基转移酶(GOAT)对肝脂肪变性影响及作用机制。方法游离脂肪酸(FFA)作用于人肝细胞系LO2细胞以诱导肝细胞脂肪变性。FFA与siRNA-GOAT单独或联合处理LO2细胞,分为4组,即空白对照(NC)组:仅用PBS处理;siRNA-GOAT组:仅以终浓度为10 nmol/L的siRNA-GOAT处理;FFA组:仅以终浓度为1 mmol/L的FFA处理;FFA+siRNA-GOAT组:采用上述浓度FFA和siRNA-GOAT混合处理。肝细胞油红O染色检测脂肪滴形成情况;TG检测试剂盒检测LO2细胞脂质水平;免疫印迹法(Western Blot)、实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫荧光染色、电子显微镜检测自噬活性;酶联免疫吸附测定法、RT-PCR检测TNFα、IL-6水平。Western Blot检测雷帕霉素(m TOR)、磷酸化m TOR(pm TOR)、AMP-活化蛋白激酶(AMPK)以及磷酸化AMPK(p-AMPK)的蛋白水平变化。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果 FFA+siRNA-GOAT组脂肪滴形成较FFA组明显减轻,TG水平明显低于FFA组,差异有统计学意义(P0.001)。FFA+siRNA-GOAT组TNFα和IL-6蛋白、mRNA表达水平较FFA组均明显下降,差异均有统计学意义(P值均0.005)。siRNA-GOTA组LC3-Ⅱ、Beclin-1 mRNA表达水平明显高于NC组,差异均有统计学意义(P值均0.001)。FFA+siRNA-GOAT组LC3-Ⅱ、Beclin-1 mRNA表达水平明显高于FFA组,差异均有统计学意义(P值均0.001)。siRNA-GOAT组LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白水平明显高于NC组,差异均有统计学意义(P值均0.05)。FFA+siRNA-GOAT组LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白水平明显高于FFA组,差异均有统计学意义(P值均0.05)。免疫荧光染色示FFA+siRNA-GOAT组LO2细胞中内源性LC3-Ⅱ表达水平较FFA组、siRNA-GOAT组升高。电子显微镜观察结果示FFA+siRNA-GOAT组自噬体表达较FFA组增加。自噬抑制剂siRNA-ATG5、3-MA或刺激剂雷帕霉素处理LO2细胞后,FFA+siRNA-ATG5组、FFA+3-MA组TG水平分别与FFA+siRNA-GOAT组、FFA+雷帕霉素组比较,差异均有统计学意义(P值均0.001)。FFA+siRNA-GOAT组、FFA+雷帕霉素组LC3-Ⅰ/Ⅱ水平明显高于FFA+siRNA-ATG5组、FFA+3-MA组,差异均有统计学意义(P值均0.05)。FFA+siRNA-GOAT组p-AMPK蛋白表达水平明显高于于FFA组、p-m TOR蛋白表达水平明显低于FFA组,差异均有统计学意义(P值均0.05)。结论 siRNA抑制GOAT可通过调节AMPK/m TOR通路,上调自噬活性,进而减轻肝细胞内脂肪变性。 相似文献
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44.
血清标记物甲胎蛋白(AFP)对原发性肝癌(PHC)虽有很好的诊断价值,但阳性率仅占70%左右,因此十分必要探寻新的检测标记物,以弥补AFP之不足。我们对52例PHC患者血清α—L—岩藻糖苷酶(AFU)活力进行了检测,并同时与其它肝病、胃肠道恶性肿瘤及正常人血清AFU进行了对照,以探讨AFU对PHC的诊断价值。 相似文献
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糖尿病是由遗传因素与环境因素共同引起的一种慢性高血糖状态。随着人们生活水平的提高,饮食结构的改变及人口老龄化的加重,其发病率正在逐年增高,现已成为继肿瘤、心脑血管疾病之后严重危害人类身体健康的慢性疾病。目前,我国现有糖尿病患者超过4 000万,居世界第2位, 相似文献
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目的探讨全科团队对社区老年居民慢性便秘的综合干预治疗作用。方法选择2010年1—10月在上海市金山区山阳镇社区卫生服务中心门诊就诊的老年慢性便秘患者116例,按序号单、双号将便秘患者分成干预组58例和对照组58例。对照组实施患者自主就诊给予泻药治疗的模式管理半年。干预组由全科团队分析病因,结合患者的特点,进行心理、饮食、运动及药物指导、中医针灸等健康教育和干预措施,1次/月上门治疗和随访,为期半年的电话或上门随访强化管理。结果两组患者治疗后疗效比较,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者治疗后3个月第1周和治疗后6个月第1周的排便次数均较治疗前增多、大便性状评分和排便困难程度评分均较治疗前降低,差异均有统计学意义(P<0.05);干预组治疗后3个月第1周和治疗后6个月第1周的排便次数均较对照组增多、大便性状评分和排便困难程度评分均较对照组降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论全科团队通过对社区老年慢性便秘患者的综合干预,对防治功能性便秘起到不同程度的改善效果。 相似文献
47.
血清HBVM始终阴性丁型肝炎一例 总被引:1,自引:0,他引:1
徐某,男,26岁,因反复乏力、纳差伴肝功异常7年,于2003年10月23日再次来我院门诊.患者无明显诱因于7年前开始感乏力、纳差、当时在本院查肝功单项ALT增高,为128 IU/L其他无异常.经休息、护肝、降酶等治疗症状好转ALT降至正常,但以后又反复,ALT时常波动于73~194 IU/L,TBil和AST也常高于正常至今.7年来先后6次采用ELISA方法和2次在外院采用Abbott方法进行乙型病毒性肝炎标志物(即HBVM)5项指标及HBV DNA(采用PCR方法)检查,结果始终阴性,还多次进行甲型、丙和戊型病毒性肝炎病原学检测结果也均阴性. 相似文献
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实习护生职业防护现状调查分析 总被引:4,自引:0,他引:4
目的 了解护生实习期间职业防护现状。方法 采用自行设计问卷,对2001级高职护理专业3年制阶段实习回校后的42名护生进行职业防护问卷调查。结果 护生实习期间锐器损伤发生率为100.0%,职业安全意识较差;防护知识严重缺乏,防护意识不强;对职业防护知识需求较高。结论 在护理学教学中及实习前需时护生进行各种形式的职业防护教育,避免发生职业性损伤。 相似文献
49.
Ghrelin是生长激素促分泌素受体的内源性配体,主要在胃部产生,也广泛分布于其他组织.具有多种生物学效应.近年来研究发现ghrelin可抑制多种细胞的凋亡,包括神经细胞、心肌细胞、骨细胞、内皮细胞、胰岛细胞及小肠上皮细胞等,其中可能涉及到腺苷酸环化酶/cAMP/蛋白激酶A、磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B、细胞外信号调节激酶1/2等信号转导途径.这方面的研究有一定的临床价值,将来有望应用于疾病的诊断和治疗,本文就ghrelin的抗细胞凋亡作用及其机制作一综述. 相似文献
50.
第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因(PTEN)作为肿瘤抑制基因,可以负性调节肿瘤细胞的生长。目前发现PTEN在纤维化疾病中也有重要的作用和意义,但其与肝纤维化的关系尚不明确,对PTEN在各器官纤维化中的作用这一问题的深入研究可能为纤维化疾病的治疗提供新的思路。本文就近年来PTEN在纤维化疾病中的作用和意义作一综述。 相似文献