胃肠道癌单克隆抗体在鉴别原发性与移性卵巢癌中的意义

在实验利用对胃癌、结肠癌选择性很强的单克隆抗体MG_7及MC_3,通过免疫组化实验检测原发性与转移性卵巢癌的相应抗原。实验结果33例卵巢(原发性)上皮性癌全部为阴性,18癌例卵巢转移性癌总阳性率为94.4％,提示本实验有可能用于鉴别原发性与转移性(来源于胃肠道癌)卵巢癌、对协助病理诊断(实验对2例病理诊断困难的病例明确了诊断)、判定原发病灶及指导治疗具有一定的意义。     

免疫抑制性酸性蛋白单克隆抗体对卵巢上皮性癌的免疫组化研究

通过免疫抑制性酸性蛋白(IAP)单克隆抗体(MI)对33例卵巢上皮性癌的免疫组化实验研究表明,MI_2识别的IAP亚型似主要由癌细胞产生,对卵巢癌细胞的选择性较强,可能做为诊断卵巢癌的一种标志物。实验结果表明阳性着柒率与卵巢癌类型,病理分级关系不显著,而柒色程度与临床分期及预后密切相关,这对临床初步判定预后、估计复发、指导治疗有一定的意义。     

重组小鼠MIG趋化因子的高效真核表达及免疫活性测定

目的 克隆小鼠CXC趋化因子干扰素-γ诱生单核因子（MIG）并在杆状病毒表达系统中进行高效表达，进而对MIG蛋白进行纯化和活性鉴定。方法从小鼠脑组织中用RT-PCR的方法扩增出小鼠MIG基因的全长cDNA，在克隆入Bae-to-Bac杆状病毒表达载体后在High-Five昆虫细胞中进行分泌型表达；表达产物经S-Sepharose进行了纯化并进行了生化鉴定；最后对纯化的重组小鼠MIG蛋白进行了钙离子内流诱发试验和淋巴细胞趋化测定以鉴定其免疫活性。结果成功克隆了小鼠MIG基因并在Bac-to-Bac杆状病毒表达系统中进行了高效表达，其表达蛋白主体相对分子质量约为15000；经过单步S-Sepha-rose纯化法就可获得纯度为85％以上的重组小鼠MIG蛋白，产量为10mg/L；该蛋白该纯化蛋白在体外具有诱导小鼠T淋巴细胞钙离子内流和吸引、趋化小鼠脾细胞的活性。结论小鼠MIG蛋白可在杆状病毒表达系统中高产量分泌表达并可用S-Sephavose纯化法直接纯化；小鼠重组MIG蛋白具有激活、趋化淋巴细胞的生物活性；rmMIG纯化蛋白的大量制备为进一步研究小鼠MIG蛋白在炎症、免疫器官的成熟和其它疾病中的功能和作用提供了有利的工具。     

胃液中肿瘤相关抗原MG_7Ag的检测及临床意义

为探讨提高胃癌患者胃液中肿瘤相关抗原的检出率及早期胃癌检测的敏感性，应用以胃癌单克隆抗体的特异性和聚合酶链反应（ＰＣＲ）的高度敏感性相结合建立的免疫－ＰＣＲ检测胃液中肿瘤相关抗原ＭＧ７Ａｇ。结果胃癌３７例、慢性萎缩性胃炎８例、慢性浅表性胃炎４例及消化性溃疡８例，胃液中ＭＧ７Ａｇ阳性分别为３０例、２例、０例及１例，胃癌患者胃液中ＭＧ７Ａｇ的阳性检出率为８１．１％。结果提示该方法对诊断胃癌有较大的应用价值     

经皮左锁骨下动脉化疗药盒植入治疗胰腺癌的临床研究

目的探讨左锁骨下动脉植入化疗药盒对不能手术切除胰腺癌的治疗价值,方法不能手术切除的胰腺癌患者145例,随机分为2组。介入化疗组:73例,经皮左锁骨下动脉植入化疗药盒,将导管前端置于肝总动脉,经药盒介入化疗。全身化疗组:72例,静脉给药全身化疗。采用FAM方案,7d为一疗程,间隔1～2个月重复下一疗程。结果介入化疗组行2～10次化疗,平均7.6次。完全缓解(CR)4例,部分缓解(PR)49例,有效率(CR+PR)为60.2%;生存期3～34个月,中位生存时间13.5个月。全身化疗组行1～7次化疗,平均3.8次。无CR病例,PR25例,有效率为34.7%;生存期1～13个月,中位生存期6.2个月,2组有效率和生存期比较差异均有统计学意义(P<0.05)。在临床症状方面,介入化疗组中56例患者有顽固性疼痛,化疗2～3周后27例疼痛完全消失,22例不同程度缓解,占87.5%。全身化疗组有疼痛54例,化疗后疼痛完全消失11例,缓解14例,占46.3%。介入化疗组治疗过程中无严重的肝、肾、心脏和骨髓损害,25例出现轻微的胃肠道反应和白细胞降低,占34.3%,均不影响继续化疗。全身化疗组3例出现严重骨髓抑制,1例死亡,肝、肾功能也有不同程度损害,发生胃肠道反应和白细胞降低67例,占90.3%,2组不良反应无论在发生率和严重程度上比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论经化疗药盒行局部规律性介入化疗治疗胰腺癌可明显改善患者生存质量,提高生存率,是值得选择的较好疗法     

fas基因与bcl-2反义RNA转导胃癌耐药细胞的药敏上调效应

目的比较fas基因和bcl-2基因在胃癌耐药细胞与非耐药细胞表达的差异,将fas基因和bcl-2反义核酸导入胃癌耐药细胞,并分析转导前后的细胞在mRNA与蛋白的表达水平,研究转导株与非转导株对化疗药物敏感性的区别.方法采用分子克隆技术将fas 基因和反义bcl-2片段分别插入真核表达载体pBK-CMV和pDOR-SV40的多克隆克隆位点之间,以脂质体介导法将两个重组表达载体分别转染受体细胞SGC7901/ VCR,G418筛选克隆细胞,Northern blot, Western blot检测耐药细胞与非耐药细胞以及转导细胞中fas基因和bcl-2基因mRNA及其蛋白的表达,MTT法药敏实验检测转导细胞与非转导细胞对VCR、顺铂、5-FU 的敏感性.结果真核表达载体pBK-fas cDNA和pDOR-bcl-2 cDNA转导胃癌耐药细胞后,分别从2×105细胞中筛选出大约80和120个抗性克隆,转导率各为0.4‰和0.6‰,随机各挑选2个克隆继续筛选与扩增培养,均获得了稳定的抗性细胞,我们将此命名为SGC7901 fas/ VCR cell和SGC7901 anti bcl-2/ VCR cell. 杂交结果表明,胃癌耐药细胞SGC7901/ VCR与非耐药细胞相比,bcl-2基因的表达明显较高,而fas基因表达极其微弱. 转导株SGC7901 fas/ VCR cell的fas mRNA及其蛋白水平的表达显著高于非转导株,SGC7901 anti bcl-2/ VCR cell中bcl-2蛋白的表达明显低于非转导株. 2株转导细胞对VCR、顺铂、5-FU的敏感性明显高于非转导株.结论胃癌耐药细胞与非耐药细胞相比,bcl-2基因处于高表达状态,而fas基因处于极其低弱的表达状态. 通过脂质体介导的基因转染,有效地阻断了bcl-2蛋白在SGC7901 anti bcl-2/ VCR cell的表达,明显增强了fas mRNA及其蛋白在SGC7901 fas/ VCR cell的表达. bcl-2反义核酸和fas基因转导胃癌耐药细胞后,对化疗药物的敏感性明显增加.     

假性胰腺囊肿的内镜治疗

目的 观察经十二指肠乳头引流治疗胰腺假性囊肿的疗效以及并发症，探讨新的微创治疗方法。方法 选择胰腺假性囊肿患者8例，均有2次以上外科手术史，再次外科手术难度较大。经内镜逆行胰胆管造影(ERCP)后，十二指肠乳头、主胰管括约肌切开，行内引流管置人或主胰管探条扩张治疗，囊肿消失后经内镜取出内引流管。结果 ERCP提示，3例囊肿与主胰管相通，l例囊肿压迫造成胆总管下段狭窄梗阻。置入内引流管5例；探条扩张治疗3例。术后l～4个月囊肿完全消失7例；l例囊肿缩小约l／3，临床症状消失，随访6个月囊肿未再缩小，转外科手术治疗。术后2例出现一过性血、尿淀粉酶升高，无严重并发症发生。结论：ERCP及其派生的治疗技术，治疗胰腺假性囊肿有效、安全，可作为胰腺假性囊肿的微创治疗方法。     

环行七肽CGNSNPKSC的受体鉴定及其在胃癌中的表达

目的：探讨血管特异结合短肽CGNSNPKSC在胃癌中的表达及与肿瘤分化程度的关系;初步筛选短肽CGNSNPKSC的受体.方法：采用免疫组化SP法检测CGNSNPKSC在胃癌中的表达及与分化程度的关系;以CGNSNPKSC作为＂探针＂免疫筛选表达型λZAP噬菌体cDNA文库,筛选CGNSNPKSC可能的受体,并利用生物信息学对阳性克隆进行初步分析.结果：CGNSNPKSC受体在高,中,低度分化胃癌的血管中表达率依次为12/18（67%）,17/23（74%）,22/24（92%）;在低分化胃癌组织中的表达明显高于高分化和中分化胃癌组织（P＜0.05）.cDNA文库筛选获得43个独立候选克隆,生物信息学显示分属于13种不同的基因.结论：CGNSNPKSC与胃癌的血管特异结合,可作为肿瘤血管抑制治疗的靶向载体.     

胃肠道癌单克隆抗体在鉴别原发性与转移性卵巢癌中的意义

Monoclonal antibodies MG7 and MC3, which are highly specific for gastrocolonic carcinomas, were used in immunohistochemical studies of detecting the relevant antigens present in the primary and metastatic carcinomas in ovaries. All 33 cases of primary ovarian carcinomas examined were negative, and positive reaction was obtained in 94.4% of 18 cases of metastatic carcinomas in ovaries. Results of this investigation confirmed the specificity of MG7 and MC3 in differential diagnosis of primary ovarian cancers from metastatic cancers in ovaries originating from the gastrointestinal tract.     

胃癌细胞耐药相关性单克隆抗体的制备及初步鉴定

以胃癌细胞SGC 7901的耐长春新碱细胞株SGC 7901/VCR为免疫原,免疫雌性BALB/C小鼠,经21次融合,获得1株抗体MGr_1与耐药细胞的反应性明显高于药敏细胞,ELISA检测两者差值达0.57±0.08.流式细胞仪分析,MGr_1与SGC 7901/VCR结合阳性的百分率为95.5%,明显高于药敏细胞的48.3%,而且前者的荧光强度明显强于后者.ABC免疫组化染色发现未行化疗的47例胃癌组织,仅1例呈阳性反应,47例正常胃粘膜也仅1例呈弱阳性反应.SDS-PAGE及免疫印迹法等揭示该抗体识别的抗原MGr_1-Ag为一种糖蛋白,主要分布在耐药细胞的胞膜上,分子量是110KD,抗原决定簇位于该糖蛋白分子的蛋白部分,提示是一种新的耐药相关分手.