专业型医学研究生的临床思维培养

在硕士研究生不断扩招的背景下,临床医学专业型硕士研究生的临床思维的培养也经受着前所未有的考验.本文简要分析了造成研究生临床思维能力欠缺的原因,并结合笔者所在学校的硕士研究生教育的一些体会,对当代医学研究生的临床思维的培养提出了一些新的见解.     

改良食指背侧岛状皮瓣及其感觉训练的临床研究

目的关于食指背侧岛状皮瓣改良术式临床修复拇指软组织缺损或瘢痕挛缩及皮瓣异位感觉康复训练的临床研究。方法2006年2月至2007年12月,对12例拇指软组织缺损患者利用改良的食指背侧岛状皮瓣方法修复拇指创面。术后鼓励患者做患指康复训练,拆线后指导患者加强拇指康复训练,特别加强改善皮瓣异位感觉的康复训练。结果所有皮瓣均成活。本组病例随访4-6月,患者拇指皮瓣外形好,拇指掌指关节及指间关节活动在正常范围,皮瓣血运良好,皮瓣感觉正常,皮瓣异位感觉康复训练后的感觉恢复需要约4个月,而未经过康复训练的皮瓣异位感觉恢复要晚2个月左右。结论临床上修复拇指软组织缺损,无论食指背桡侧动脉为三型中的哪一种分型,通过改良食指背侧岛状皮瓣切取修复,均能保证皮瓣一期成活,经康复训练,使拇指皮瓣异位感觉提前2个月恢复。     

Detla1基因在肌源性干细胞分化为神经样细胞过程中的表达

目的:研究Detla1基因在大鼠肌源性干细胞体外诱导分化为神经样细胞过程中的表达.方法:大鼠乳鼠骨骼肌体外培养增殖,分为对照组完全培养基培养,实验组加入诱导剂培养.通过RT-PCR、免疫荧光和免疫印迹法观察Detla1基因存诱导组和对照组的表达差异.结果:对照组Detla1基因表达强阳性,实验组基本不表达.结论:大鼠肌...     

骨髓基质细胞移植对大鼠脊髓损伤后环氧化酶-2和血管内皮生长因子表达的影响

目的：观察骨髓基质细胞（bone marrow stromal cells,BMSCs）移植对大鼠脊髓损伤后环氧化酶-2（cyclooxygenase-2, COX-2）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）蛋白表达的影响。方法大鼠随机分为3组：A为假手术组,B为细胞培养基（DMEM）对照组,C为BMSCs移植组。B组和C组大鼠进行脊髓压迫损伤模型制作。脊髓损伤后, B组和C组大鼠分别给予DMEM培养液或BMSCs脊髓损伤周围区注射。术后应用Western Blot方法检测COX-2、VEGF蛋白在损伤脊髓组织中的表达变化。结果 COX-2、VEGF蛋白在A组大鼠未损伤脊髓组织中均低水平表达。B组与A组相比,脊髓损伤后COX-2蛋白表达水平明显增加（P＜0.01）,VEGF蛋白表达水平则短暂显著增加（P＜0.05）。C组与B组相比, COX-2和VEGF蛋白表达水平均显著增加。结论 BMSCs移植能够增加脊髓损伤后COX-2、VEGF蛋白的表达。     

5-溴脱氧尿嘧啶核苷体外标记肌源性干细胞：最佳浓度及时间

肌源性干细胞移植入动物体内可以修复骨、肌肉、软骨或神经系统的损伤,但要了解其在体内的迁移、增殖及分化的情况,还需要一种有效、安全的标记方法来追踪其在体内的变化。目的：观察5-溴脱氧尿嘧啶核苷标记肌源性干细胞的效果,探讨其最佳标记浓度和时间。方法：采用差速贴壁法体外分离SD大鼠肌源性干细胞,免疫细胞化学染色法鉴定第2代细胞并进行细胞计数。以终浓度5,10,15,20 μmol/L的5-溴脱氧尿嘧啶核苷标记肌源性干细胞,检测其最佳标记浓度,免疫细胞化学染色法分析其标记率;通过MTT法、锥虫蓝排斥实验观察5-溴脱氧尿嘧啶核苷对细胞增殖的影响。结果与结论：免疫细胞化学染色显示肌源性干细胞呈Desmin阳性,阳性率为(85.7±6.0)%;经5-溴脱氧尿嘧啶核苷标记的肌源性干细胞与未进行标记细胞在活力和增殖上相比未见明显差异(P > 0.05),标记后的肌源性干细胞活细胞率可达(92.3±2.1)%。其中浓度为10,15,20 μmol/L标记组标记效果均优于5 μmol/L标记组,10 μmol/L为最佳工作浓度,最佳标记时间为3 d,标记率为(70.9±4.5)%,随时间延长无明显变化。证实应用5-溴脱氧尿嘧啶核苷标记肌源性干细胞后,对细胞的活力及增殖情况无影响,标记率也能达到细胞移植对其示踪的要求。     

加杨树叶中3种黄酮类成分的含量测定

目的 建立同时测定加杨树叶中的槲皮素、高良姜素、白杨素含量的分析方法。方法 采用高效液相色谱法,色谱柱Agilent TC C18柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相：甲醇-0.1%甲酸,梯度洗脱：0∽5 min,甲醇25%→55%,5∽25 min,甲醇55%→65%,25∽35 min,甲醇65%→75%;流速：1.0 mL.min 1;检测波长：264 nm;柱温：30℃。结果 加杨树叶中槲皮素、高良姜素、白杨素分离效果良好,线性范围分别为3.7∽120,2.5∽80和3.125∽100μg.mL 1;平均加样回收率分别为99.0%,100.1%,101.4%。结论 该方法准确可靠、结果稳定、重复性好,可为评价加杨树叶的质量提供依据。     

组织工程神经支架修复周围神经缺损的应用与前景

周围神经缺损过去一直是困扰医学界的难题,组织工程神经支架的出现为周围神经缺损的修复开辟了广阔的前景和思路。将神经支架修复神经缺损的研究进展作一综述,并通过分析指出:复合型组织工程神经支架在长段神经缺损的修复中在理论和实际上具有明显的优势是未来本领域的研究发展方向。     

外源性人骨形态发生蛋白-2基因在兔骨髓基质细胞中的稳定表达及其诱导成骨作用

目的:通过观察携带外源性人骨形态发生蛋白-2(humanbonemor-phorgeneticprotein-2,hBMP-2)基因的骨髓基质细胞(bonemarrowstromalcells,MSCs)生物学性状变化和检测MSC分泌hBMP-2的含量,探讨hBMP-2基因在MSC中的稳定表达。方法:应用脂质体介导的方法将携带hBMP-2基因的重组载体PcD-NA3-hBMP2导入体外培养的兔MSC中,用G418筛选获得阳性细胞,应用ELISA检测MSC表达并分泌hBMP-2水平,并绘制细胞的生长曲线。结果:从细胞的培养基中可检测到hBMP-2蛋白质。转染后阳性细胞的倍增时间和生长时间没有因为目的基因的导入而改变,与正常培养的细胞相比差异无显著性意义。结论:hBMP-2基因在MSC中可获得较高水平的稳定表达并能分泌hBMP-2蛋白质,为骨缺损修复中内源性hBMP-2作用的发挥提供可能。     

大鼠坐骨神经缺损修复中应用新型可降解材料的可行性研究

目的：探讨新型的人工合成的可降解材料Poly(DL-laetide-co-ε-caprolac-tone)修复周围神经损伤的可行性。方法：将Poly(DL-laetide-co-ε-caprolac-tone)用特殊方法制成长10mm．内径1．3mm，壁厚0．5mm的神经套管。健康成年SD大鼠24只，随机分为3组，每组8只。实验组用Poly(DL-lactide-co-ε-caprolac-tone)神经套管，对照I组用自体神经移植，对照Ⅱ组用硅胶管桥接。3组均修复5mm长坐骨神经缺损，术后3个月分别观察3组大鼠的足跟溃疡时间、步态、关节活动。计算坐骨神经指数(sciatic nerve function index，SFI)，测量坐骨神经动作电位的潜伏期、波幅和传导速度。并行常规苏木精-伊红(HE)染色和S-100免疫组织化学染色(常规ABC法)，以及运动终板的免疫组织化学和透射电镜观察超微结构。结果：实验组术后3个月各组坐骨神经动作电位的波幅和传导速度与对照Ⅱ组比较，差异有显著性意义；HE染色显示神经套管桥接处神经结构连续性良好，移植段可见神经纤维通过，同时可见新生的血管。S-100免疫反应阳性的雪旺氏细胞沿神经纤维分布成条带状。运动终板乙酰胆碱酯酶阳性反应加深。于腓肠肌的中上部形成终板带，经结合镀银染色可见再生神经束及发出的分支与运动终板相连。电镜观察超微结构接近正常的运动终板。结论：Poly(DL-lactide-co-ε-caprolac-tone)导管可以修复神经缺损，可进一步研究其构建组织工程化人工神经的可能性。