类风湿关节炎滑膜组织T7噬菌体展示cDNA文库的构建

目的构建类风湿关节炎(RA)滑膜组织T7噬菌体展示cDNA文库,为筛选和鉴定RA特异性基因的研究奠定基础。方法取确诊RA患者的滑膜组织,用Trizol试剂提取总RNA,Oligotex离心柱分离mRNA,电泳检测其质量,逆转录合成双链cDNA,经末端修平、接头连接、酶切后去除过多接头,收集>300bp的cDNA片段,与T7Select10-3载体连接,体外包装并扩增得到类风湿关节炎滑膜组织T7噬菌体展示cDNA文库。最后,通过铺平板滴度测定及PCR技术鉴定文库质量。结果所构建原始文库重组克隆数为2×107pfu,扩增滴度8.9×1010pfu/ml。PCR法检测片段插入率为90%,插入片段在300～2000bp之间。文库噬菌体裂解液PCR扩增得到BiP基因片段。结论成功构建了高质量的RA滑膜T7噬菌体展示cDNA文库,为下一步RA自身抗原的筛选奠定了基础。     

服用羟氯喹者的视觉电生理检查

目的 对服用羟氯喹者进行视网膜电图和眼电图检查,评价用药安全性.方法 选择正在服用羟氯喹的180例自身免疫病患者,行视力、眼压、眼前节及散瞳眼底检查,其中55例患者行视网膜电图和眼电图检查.每6个月复诊1次.结果 180例患者的视力、眼压、眼底均正常,55例患者按用药时间分组,各用药时段组Arden比、a波、b波峰时和a波平均振幅及30 Hz反应差异均无统计学意义(P>0.05),而在用药13～24月组,-15dB光刺激强度下的b波平均振幅较未用药组和用药3～12月组差异均有统计学意义(P<0.05).结论 使用低剂最的羟氯喹具有良好的眼部安全性.     

对欧洲抗风湿病联盟《全身糖皮质激素治疗风湿病建议》的再认识

糖皮持激素在风湿病中应用的依据多来自于临床经验的积累，循证医学证据尚少，在临床工作中GC应用不规范的问题仍比较常见。     

系统性红斑狼疮患者自身反应性T 细胞的分离和鉴定及其细胞反应性使用情况分析

系统性红斑狼疮 (SLE)是一种累及多器官、多系统的自身免疫性疾病 ,其典型的特征是B细胞多克隆活化和多种自身抗体的产生[1 4 ] 。多种证据表明自身反应性T细胞能促进疾病相关自身抗体的产生 ,在体外能够辅助自身的B细胞产生抗双链DNA(dsDNA)抗体等自身抗体[1 4 ] 。我们在体外建立可长期培养的自身反应性CD4+T细胞系并对其功能及其T细胞反应性 (TCR)的使用情况进行分析 ,为进一步了解SLE的自身免疫机制并为将来的临床治疗提供理论基础。一、对象与方法1.培养基及试剂 :细胞培养所用培养基为完全RPMI 16 40 (Hyclone)含有 10 %热…     

痛风患者伴发疾病与诊治现状调查

目的 了解痛风患者伴发疾病情况及目前痛风的诊治现状.方法 采用现况调查方法,对2008年4月至10月就诊于北京大学人民医院风湿科门诊的200例痛风患者的一般资料、伴发疾病、诊断及治疗进行现场调查,并记录近3个月的血脂、血肌酐、血尿酸、尿常规结果,用肾脏病膳食改良试验(MDRD)公式计算肾小球滤过率.结果 痛风患者伴发高血压、肥胖、肾结石、冠心病、脑梗死、糖尿病的分别为54.5%(109/200)、23.2%(42/181)、20.0%(40/200)、12.0%(24/200)、8.0%(16/200)和7.0%(14/200).伴发高甘油三酯血症为53.7%(101/188).63.7%(114/179)的患者有肾功能下降,15.1%(27/179)伴发慢性肾脏病.200例患者中分别有124例(62%)、72例(36%)、12例(6%)和30例(15%)于痛风急性发作期使用非甾体抗炎药、秋水仙碱、糖皮质激素及降血尿酸药物.痛风间歇期,符合较公认降血尿酸治疗指征的患者中69.8%(81/116)接受过降血尿酸治疗,仅8.6%(10/116)血尿酸水平维持在0.06 g/L以下.不符合降血尿酸治疗指征者中73.8%(48/65)也接受了降血尿酸治疗.结论 痛风患者最常见的伴发疾病是高血压、高脂血症及肥胖,其次是肾结石、慢性肾脏病和冠心病等.非甾体抗炎药是痛风急性发作期首选治疗,患者降血尿酸治疗时机与目前国际上较公认的指征不一致,达到治疗目标的比例低.     

细小病毒性关节炎四例临床分析并文献复习

目的 通过对我科确诊的4例细小病毒B19（parvovimsB19）关节炎的临床特点的总结．提高对该病的认识。方法 报道4例确诊为细小病毒B19关节炎的临床及实验室检查特点．并进行文献复习。结果 4例患者（男性2例，女性2例），年龄15～55岁，发病年龄中位数为34岁。关节炎同时出现流感样症状、皮疹等表现，外周血细小病毒B19 IgM均阳性，3例患者外周血细小病毒B19DNA检测阳性，除外其他原因所致关节炎，治疗效果肯定，随访1～3年无一例复发。结论 对于某些症状不典型的关节炎，应警惕细小病毒B19关节炎的可能，及时行细小病毒B19抗体及DNA检测，以助诊断。     

微量白蛋白尿在系统性红斑狼疮患者早期肾损害诊断中的意义

目的探讨微量白蛋白尿在诊断系统性红斑狼疮(SLE)早期肾损害中的意义及其与疾病活动性的相关性。方法检测104例系统性红斑狼疮患者的24小时尿白蛋白定量,分析其与临床病程、疾病活动性及免疫学指标之间的关系。结果104例患者中72例(69.2%)24小时尿白蛋白升高。在尿常规检测尿蛋白阴性患者中,47.5%(29/61)的患者24小时尿白蛋白升高(微量白蛋白尿),其中在初治和复治患者中分别有48.7%(19/39)和45.5%(10/22)的患者24小时尿白蛋白升高;初治患者尿白蛋白升高组的SLEDAI评分[(10.2±3.6)分]和血沉[(62.9±37.1)mm/1 h]较尿白蛋白正常组[分别为(6.6±2.9)分和(40.2±29.5)mm/1 h]显著升高(P均<0.05),且伴有血白蛋白降低(10/19)和免疫球蛋白升高(5/19)的比例较正常组(分别为3/20和0/20)显著增加(P均<0.05);复治患者尿白蛋白升高组的SLEDAI评分[(6.5±3.5)分]也较正常组[(3.3±2.7)分]显著升高,且伴有贫血(4/10)和血清补体降低(7/10)的比例较正常组(分别为0/12和2/12)显著增加(P均<0.05)。结论检测微量白蛋白尿有助于早期发现系统性红斑狼疮患者的肾损害,并与疾病的活动度及严重性显著相关。     

白细胞介素-33的测定及其与早期类风湿关节炎相关性的研究

目的 通过检测早期类风湿关节炎(RA)患者血清中的白细胞介素(IL)-33水平,分析其与早期RA之间的相关性.方法 收集病程<1年的早期RA患者100例,骨关节炎(OA)患者40例以及健康对照者70名.采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清中的IL-33水平,并分析血清IL-33水平与RA各临床和实验室指标的相关性.计量资料的比较采用Kruskal-Wallis检验和(或)Mann-Whitney U检验,计数资料比较采用X2检验,相关性分析采用Spearman相关分析.结果 RA患者血清IL-33水平为(282±871)pg/ml,显著高于健康对照组[(7±38)pg/ml,P(0.01)和OA患者[(8±35)pg/ml,P<0.01].血清IL-33水平与类风湿因子(RF)、隐性类风湿因子IgG(HRF-IgG)、抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体、抗突变型瓜氨酸化波形蛋白(MCV)抗体呈正相关(r分别为:0.312,0.277,0.213,0.302,P<0.01或P<0.05). IL-33阳性组患者的RF阳性率、HRF-IgG阳性率、抗CCP抗体阳性率、抗MCV抗体阳性率(86%、31%、86%、94%)较IL-33阴性组患者(54%、11%、42%、72%)显著升高(P均<0.05). 结论 IL-33在RA患者血清中显著升高,并与多种自身抗体(包括RF、抗CCP抗体、抗MCV抗体和HRF-IgG)显著相关,可能是RA预后不良的因素之一.     

抗细胞膜DNA抗体在三种自身抗体阴性系统性红斑狼疮中的诊断价值

目的 研究抗细胞膜DNA（mDNA）抗体在抗Sm抗体、抗双链DNA（dsDNA）抗体和抗核小体抗体（AnuA）等特异性自身抗体阴性的系统性红斑狼疮（SLE）中的诊断意义。方法 随机选择145例SLE患者。以Raji细胞为底物，采用间接免疫荧光法检测SLE患者血清抗mDNA抗体和抗dsDNA抗体，采用免疫印迹法检测抗Sm抗体，酶联免疫吸附法测定AnuA。分析抗mDNA抗体在其他特异性自身抗体阴性SLE患者中的诊断价值。结果 抗mDNA抗体在SLE中的阳性率为69．7％，明显高于抗Sm抗体（19．7％）、抗dsDNA抗体（31．9％）和AnuA（45．8％，均P〈0．01）。在抗dsDNA抗体阴性的SLE患者中，抗mDNA抗体的阳性率达64．3％；在抗Sm抗体阴性的SLE患者中，抗mDNA抗体的阳性率为70．2％；而AnuA阴性的SLE患者中，抗mDNA抗体的阳性率为60．3％。结论 抗mDNA抗体是一种敏感性较高的SLE血清学标志之一，尤其对抗Sm抗体、抗dsDNA抗体或AnuA阴性SLE的诊断具有重要参考意义。