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61.
芒果苷的高效毛细管电泳法分析 总被引:5,自引:0,他引:5
目的 :研究一种简便有效的芒果苷分离分析方法。方法 :利用高效毛细管电泳的自由溶液毛细管区带电泳 (CZE)技术分析从芒果树叶中提取的芒果苷。结果 :在波长 2 5 4nm可有效的检测Sigma和本实验室提取的两种来源的芒果苷 ,迁移时间相似。分别使用pH 6 .4,7.4和 8.4的 0 .0 5mol·L-1硼酸盐缓冲液和甲醇以 1∶0 .2 ,1∶0 .3,1∶0 .4,1∶0 .5混合作电泳缓冲液 ,发现以 pH7.4的硼酸盐缓冲液和甲醇以 1∶0 .3的比例混合作电泳缓冲液得到较好的分离效果 ,重复性好。结论 :CZE法分析芒果苷是一种简便、快速、成本低和效果好的方法 ,在临床药物分析中尤其适用。 相似文献
62.
高血糖对人红细胞醛糖还原酶活性的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的研究高浓度葡萄糖对人红细胞醛糖还原酶(aldosereductase,AR)活性的影响。方法利用DEAE-纤维素(DE-52)柱层析法,将正常人、糖尿病患者及体外高浓度葡萄糖孵育的红细胞醛糖还原酶部分纯化,测定其活性,并对其性质作进一步分析。结果①高浓度葡萄糖孵育的红细胞醛糖还原酶Km值下降约6~7倍;②糖尿病红细胞醛糖还原酶活性明显高于正常人,酶活性升高程度与血糖值正相关;③高糖时醛糖还原酶不仅对多种底物的Km值(包括葡萄糖)显著下降,而且对醛糖还原酶抑制剂(aldosereductaseinhibitors,ARIs)的抑制不敏感。结论①高血糖时ARIs的用量需加大,才能取得满意的疗效;②(DE-52)柱层析法测定红细胞AR活性准确、方便,可以作为判断糖尿病慢性并发症病情及评估醛糖还原酶抑制剂疗效的一项重要指标 相似文献
63.
目的 观察酪氨酸蛋白激酶(TPK)、蛋白激酶C(PKC)和磷酯酰肌醇-3-激酶(P13-K)特异性抑制剂(分别为tyrphostin-25、D-sphingosine和wortmannin)对日本血吸虫感染小鼠虫卵肉芽肿病变的影响,并探讨其作用机制。 方法 于小鼠感染日本血吸虫后第35天起,经尾静脉分别注射3种信号转导分子抑制剂,连续5 d。在小鼠感染后6和8wk,观察小鼠肝肉芽肿病变,并用ELISA夹心法和硝酸还原酶法分别测定小鼠血清IFN-γ、IL-4和一氧化氮(NO)水平。结果 感染小鼠应用TPK和PKC抑制剂后均可显著抑制肝肉芽肿病变,PKC抑制剂可使肉芽肿减少率达56.2%~63.4%(P<0.01)。PKC抑制剂主要抑制Th2细胞因子IL-4的表达,其抑制率为34.1%和65.6%(P<0.01),而对NO水平的检测结果进一步证明了PKC抑制剂对IL-4表达的抑制作用。 结论 在日本血吸虫感染早期应用PKC抑制剂干预T淋巴细胞信号转导可显著抑制小鼠肝肉芽肿病变,其机制可能是由于抑制了Th2优势应答并介导Th2向Th1免疫反应偏移。 相似文献
64.
65.
66.
[目的 ]研究β _连环蛋白在胃癌及癌旁组织中的表达及其与肿瘤细胞分化、浸润、转移等生物学行为的关系。 [方法 ]应用免疫组织化学 ABC法检测 75例胃癌及癌旁组织石蜡标本β _连环蛋白的表达水平。 [结果 ]β _连环蛋白在癌组织中的表达明显高于癌旁组织,低分化癌组织较高分化、中分化组织β _连环蛋白的表达高,有淋巴结转移的组织较无转移的表达高,浸润程度越深表达越高。 [结论 ]β _连环蛋白是一个与胃癌发生及发展较为相关的生物学指标,可能可以作为观察胃癌细胞侵袭转移的较有价值的病理指标。 相似文献
67.
从皮肤成纤维细胞张地连蛋白及其片段N-糖链结构。用明胶-Sepharose4B亲和柱纯化培养的人皮肤成纤维细胞所分泌的纤连蛋白,用胰糜蛋白酶限制性水解,获得明胶结合片段和肝素结合片段;用化的凝集素与经过碘酸氧化后的辣根过氧化物酶缩合的方法制备4种HRP-UXT 相似文献
68.
研究纤连蛋白受体(FnR)分子中N-糖链对其与纤连蛋白(Fn)结合的影响。利用纤连蛋白片断亲和层析柱和麦胚凝集素亲和层析柱,从人胎盘组织中纯化得到了FnR,经SDS-聚丙烯酞胺凝胶电泳证实为α和β两个亚基所组成。制备嵌合FnR的脂质体后,用糖甘酶处理以获得合不同糖链结构FnR脂质体,研究FnR分子中糖链在受体与配体结合中的作用。结果:用唾液酸酶处理嵌合FnR的脂质体,与Fn的粘附能力保持不变。嵌合FnR的脂质体单用p-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶处理,或用唾液酶,β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶,β-半乳糖苷酶三者联合处理,其与Fn的粘附能力均下降50%。结论:FnR上糖链改变确实能影响FnR与Fn的结合,但FnR糖链上末端的唾液酸可能不影响两者的结合,而FnR糖链上末端或平分型N-乙酸氨基葡萄糖(GlcNAc)在两者结合时可能起重要作用。 相似文献
69.
雌激素对人乳腺癌细胞株MCF7增殖的促进作用 总被引:6,自引:0,他引:6
目的:观察雌二醇对乳腺癌细胞增殖的促进作用和可能的机制。方法:经不同浓度的雌二醇处理乳腺癌细胞株MCF7后,用MTT比色试验观察雌二醇对MCF7增殖活性的影响,免疫印迹法测量多种与细胞周期、抑癌、增殖、凋亡相关的蛋白质。结果:经MTT比色试验检测,雌二醇能增加MCF7细胞株的增殖活性,细胞周期素-D1明显增加。但雌二醇对抑癌基因:PTEN的蛋白表达没有明显影响,以及对具有抗细胞凋亡作用的PKB蛋白量也无明显作用。结论:雌二醇可促进乳腺癌细胞的增殖,可能通过细胞周期素-D1介导的分子机制,而不涉及PKB抗凋亡作用。 相似文献
70.
背景与目的:抑癌基因PTEN在胶质瘤中突变率达20%~40%,且PTEN缺失和表皮生长因子受体突变体EGFRvⅢ同时存在EGFR表达的胶质瘤组织中.PTEN通过直接与FAK作用从而降低其酪氨酸磷酸化来抑制肿瘤细胞侵袭.EGFRvⅢ表达,PTEN缺失都是肿瘤细胞侵袭性增加的原因之一.PTEN功能的丧失可能是EGFRvⅢ表达的肿瘤进一步发展成恶性侵袭性肿瘤的原因之一.本文将探讨在EGFRvⅢ表达和PTEN缺失的肿瘤细胞中转入PTEN以观察其是否能抑制EGFRvⅢ所引起的肿瘤细胞的侵袭.方法:将野生型PTEN及其突变体分别导入人胶质瘤细胞U87ΔEGFR中,利用Transwell-细胞侵袭实验观察细胞侵袭运动变化;免疫印迹实验检查FAK磷酸化变化;FAK表达载体来转染FAK磷酸化程度低的U87ΔEGFR-wtPTEN细胞,观察细胞侵袭运动变化.结果:PTEN和PTEN(G129E)能够抑制U87ΔEGFR细胞侵袭,并且下调FAK 397位点磷酸化水平.U87ΔEGFR-wtPTEN细胞中FAK 397位点磷酸化水平增加伴随着细胞侵袭能力的提高.结论:PTEN 可能通过下调FAK 397位点磷酸化水平来抑制EGFRvⅢ引起的胶质瘤细胞侵袭. 相似文献