胆固醇结石病人胆汁免疫球蛋白含量增高及其对胆固醇-磷脂泡的影响

目的 :研究胆固醇结石病人胆囊胆汁、胆总管胆汁、血清3种免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)含量及其对胆固醇-磷脂泡变化的影响。方法:通过Con A亲和层析与Sephadex G-200分子筛凝胶两次过滤,从胆囊胆固醇结石病人及胆囊胆色素结石病人、无结石对照病人、非结石急性胆囊炎病人以及白胆汁病人胆囊胆汁、胆总管胆汁和血清中分离提纯Ig A、Ig G和Ig M;应用单向免疫扩散法检测3种Ig含量;应用电子显微镜观察Ig在模拟胆汁体系对胆固醇-磷脂泡的影响。结果:胆固醇结石组胆囊胆汁含有较高浓度的Ig G和Ig M,胆总管胆汁的3种Ig含量增高。胆色素结石组胆总管胆汁Ig A、Ig M含量与对照组无差异。胆固醇结石组和胆色素结石组除血清Ig A含量低于对照组外,其余Ig含量与对照组无差异。胆固醇结石组胆囊胆汁Ig G和Ig M分别作用于模拟胆汁7 d,明显促使单层泡直径增大,且增加多层泡数量;而Ig A仅轻微增加单层泡直径,不影响多层泡数量。结论:本实验结果显示,胆固醇结石组胆汁中Ig增高,可能通过影响胆固醇-磷脂泡变化,促进胆固醇结石形成。     

新癌基因β-Catenin研究进展

连环蛋白 (Ｃａｔｅｎｉｎ ,Ｃａｔｓ)是一组具有相似结构的胞内糖蛋白家族 ,他们的氨基酸组成中都具有数个相同序列的结构域。最早把Ｃａｔｓ分成α 、β 、γ 三类 ,后又发现 ｐ12 0 (ｃｔｎ)。Ｃａｔｓ都能与一种叫钙黏蛋白 (ｃａｄｈｅｒｉｎ ,Ｃａｄ)的跨膜糖蛋白的胞内肽段 (Ｃ 末端 )结合 ,共同担负上皮细胞的黏附和信号转导功能。研究发现 ,许多肿瘤都涉及 β Ｃａｔ的基因突变、表达异常、转位等 ,最近将定为一种新的癌基因。一、β Ｃａｔ的分子基础及其在细胞黏附与信号转导中的作用β Ｃａｔ是一个相对分子质量为 92 0 0 0的细…     

纤维连接蛋白在大鼠肺纤维化中的作用

目的 研究纤维连接蛋白(FN)在肺纤维化中的作用。方法 用免疫组织化学方法观察实验性大鼠肺纤维化纤维连接蛋白（FN）的动态变化;用Northem印迹杂交和免疫细胞化学方法分别观察FN对体外培养的大鼠肺成纤维细胞I、Ⅲ型前胶原mRNA和蛋白表达的影响。结果（1）实验性肺纤维化大鼠肺组织内FN的含量持续增多;（2）体外培养的肺成纤维细胞经FN作有2h,I、Ⅲ型前胶原mRNA的表达即增强,分别在12h、6h达到最大值,平均吸光度（A值）为对照组的1．7、3．2倍;I、Ⅲ型前胶原蛋白的表达亦增强（P＜0．01）。抗FN受体的抗体能部分抑制FN对胶原表达的上调作用（P＜0．05）。结论 FN能够促进大鼠肺成纤维细胞合成I、Ⅲ型胶原、其调控机制之一是在转录水平上增强了前胶原mRNA的表达。     

人肝细胞癌中PTEN基因的DNA杂交及突变分析

目的　研究人肝细胞癌中ＰＴＥＮ基因缺失及第５、第８外显子突变。方法　应用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交检测人肝细胞癌中ＰＴＥＮ基因限制性片段长度多态性和纯合性缺失、半合性缺失、片段缺失。应用聚合酶链单链构象多态性（ＰＣＲＳＳＣＰ）检查ＰＴＥＮ基因的第５、第８外显子的突变。结果　Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交结果显示,所有３４例肝细胞癌中ＰＴＥＮ基因未见限制性片段长度多态性或纯合性缺失、半合性缺失、片段缺失。ＰＣＲＳＳＣＰ检测发现,２例肝细胞癌第５外显子ＰＣＲ产物均显示１条额外电泳迁移带,突变率为５．９％（２／３４）。另２例肝细胞癌第８外显子ＰＣＲ产物呈现额外电泳迁移带,突变率为５．９％（２／３４）,合计突变率为１１．８％（４／３４）。结论　所检３４例人肝细胞癌中ＰＴＥＮ基因未见纯合性缺失、半合性缺失、片段缺失,但存在突变。     

调节食欲-生殖的信号肽在雄激素致不孕大鼠中的表达及滋肾阴药的作用

目的探讨雄激素不孕大鼠(ASR)肥胖及无排卵的中枢机制及滋肾阴药的作用。方法给出生9日龄SD雌性大鼠一次性皮下注射丙酸睾丸酮,建立ASR模型。用原位杂交、双标原位杂交的方法检测与肥胖发生有关的几种信号肽/激素如神经肽Y(NPY)、瘦素(leptin)受体长体(OB-Rb)、前阿黑皮素原(POMC)mRNA在ASR下丘脑弓状核(ARC)的表达含量和其关系,以及灌服滋肾阴药后上述指标的变化。结果ASR呈肥胖、无排卵状态。ASR的ARC中NPYmRNA神经元上有OB-RbmRNA表达,NPYmRNA神经元与POMCmRNA神经元有突触联系。NPY和POMC基因表达水平明显增加(P<0.01),OB-Rb基因表达水平明显降低(P<0.01)。中药治疗ASR后,大鼠出现减肥和排卵现象,ARC中NPY、POMC基因表达下降,OB-Rb基因表达上升至正常大鼠水平(P>0.05)。结论ASR肥胖及无排卵可能与NPY、POMC基因过表达、OB-RbmRNA数目减少有关,中药可能有调控这些信号肽的表达而发挥减肥及促排卵作用。     

人肝癌细胞整合蛋白基因表达调控与细胞生物学行为关系的研究

本项目主要探讨重要的细胞粘附分子一整合蛋白介导的信号途径对肿瘤恶性生物学行为和动物体内成瘤的影响。主要研究成果如下：①视磺酸(RA)调控整合蛋白基因表达以及通过p38、粘着斑激酶影响SMMC-7721人肝癌细胞凋亡的研究发现，全反式视黄酸(atRA)可上调肝癌细胞整合蛋白α5和β1表达，并使FAK含量下降而p38得以双磷酸化激活，     

纤维连接蛋白对大鼠肺成纤维细胞纤维连接蛋白和整合素α5β1表达的影响

目的　研究纤维连接蛋白 (fibronectin ,FN)及其受体整合素α5β1在肺纤维化中的作用。方法　应用Northern印迹杂交和免疫细胞化学技术。结果　经FN作用 2h ,肺成纤维细胞α5β1和FNmRNA的杂交信号均增强 ,6h达最高值 ;FN作用 6、1 2、2 4h ,免疫细胞化学染色显示整合素α5β1、FN蛋白的表达增强 ;经α5单克隆抗体预作用 ,FN作用组的肺成纤维细胞整合素α5β1和FN蛋白表达减弱 ,其抑制作用依次分别在 6h(α5β1)、1 2h(FN)最明显。结论　FN能直接刺激肺成纤维细胞合成FN或通过上调整合素α5β1的表达来促进自身合成FN。     

黄酮类化合物抗肿瘤作用研究进展

黄酮类化合物是一类存在于多种植物中的多酚化合物 ,研究发现它们具有许多潜在的药用价值 ,其中抗肿瘤作用是一个研究热点。其抗肿瘤作用主要表现在抗细胞增殖、诱导细胞凋亡、干预细胞信号转导和增强抑癌基因活性及抑制癌基因表达等功效。本文就黄酮类化合物抗肿瘤作用的研究进展进行综述。     

小鼠肾脏芳香酰胺酶动力学研究

本文在纯化小鼠肾脏芳香酰胺酶(E.C.3.4.11.2.Arylamidase,简称AAD)的基础上,进一步作了动力学方面的研究。此酶对热较为稳定;对尿素失活敏感。在Co~( )存在下,此酶的Km和Vm均变大,但Lineweaver-Burk作图中其斜率不变,属反竞争性类型。苯丙氨酸(Phe)、甲硫氨酸(Met)和亮氨酸(Leu)是此酶的竞争性抑制剂,其Ki值分别为0.3×10~(-3)M、0.5×10~(-3)M和3.7×10~(-3)M。此酶还对L-亮氨酰胺有轻微的水解作用,其Km值为2.4 x 10~(-3)M。此外,抑制性氨基酸能拮抗Co~( )对酶的激活作用,但二者似乎作用于酶的不同部位。     

膀胱癌细胞中DAPK基因启动子甲基化状态分析

目的 分析DAPK抑癌基因在T24、5637、ScaBER三种膀胱癌细胞中的表达情况及该基因启动子区的甲基化状态。方法 采用半定量RT-PCR和Westernblot分别检测三种膀胱癌细胞中DAPK基因的表达，用甲基化特异PCR（MSP）方法检测三种细胞中的DAPK基因启动子甲基化状态。观察甲基转移酶（DMNT）抑制剂5-aza-2’-deoxy．cytidine（5-aza-CdR）对各细胞中的基因表达和甲基化状态的影响。结果 T24细胞中未检测到DAPK基因的表达，也未检测到启动子甲基化；5637细胞中该基因表达水平极低，在SeaBER细胞中该基因的表达较前两者要高。5637细胞和ScaBER细胞中均有甲基化改变。2．5μmol／l浓度的5-aza-CdR可以有效上调5637和ScaBER细胞的DAPK基因的表达。结论 抑癌基因DAPK的表达异常与移行细胞癌的发生发展有重要联系，且基因启动子区CpG岛的异常甲基化在调节DAPK基因的表达中发挥重要作用。