细胞信号转导抑制剂对日本血吸虫感染小鼠Th1/Th2免疫偏移的调控

目的　观察酪氨酸蛋白激酶 (TPK)、蛋白激酶 C(PKC)和磷酯酰肌醇 - 3-激酶 (PI- 3K)特异性抑制剂(Tyrphostin- 2 5、D- sphingosine和 Wortmannin)分别特异性抑制 TPK、PKC和 PI- 3K后 ,对小鼠脾 CD4 + T淋巴细胞经虫卵可溶性抗原 (SEA)诱生 IFN- γ和 IL- 4的表达水平及对 Th1/Th2免疫偏移的影响。　方法　分别于小鼠感染日本血吸虫后 0、4、8和 12周 ,用单克隆抗体分离脾 CD4 + T淋巴细胞体外培养 ,并进行细胞信号转导抑制试验 ,用 EL ISA夹心法和硝酸还原酶法分别测定小鼠脾 CD4 + T淋巴细胞体外培养上清 IFN-γ、IL - 4和一氧化氮 (NO)表达水平。　结果　Tyrphostin- 2 5对 IFN-γ和 IL - 4水平的抑制作用均非常显著 (P<0 .0 1) ,D- sphingosine主要影响 IL - 4的表达 (P<0 .0 1) ,而 Wortmannin则主要影响 IFN-γ的表达 (P<0 .0 1) ,对反映 Th1/Th2免疫平衡的 Th2分化指数分析表明 ,D-sphingosine可使 Th2免疫应答优势减弱 ,而 Wortmannin则可使 Th2免疫应答优势增强。对脾 CD4 + T淋巴细胞培养上清 NO水平检测结果显示 ,NO水平动态与 IFN-γ相一致 ,NO水平主要受 TPK抑制剂 Tyrphostin- 2 5和 PI- 3K抑制剂Wortmaninn的影响 ,结合该两种信号分子抑制剂对 Th1/Th2细胞因子表达水平的作用结果分析 ,     

地塞米松影响足细胞活动力的相关分子研究

Objective To investigate the potential roles of dexamethasone (Dex) in podocyte motility, and to explore the mechanism of modulating α-actinin-4, nephrin. Methods Podocytes were divided into three groups: Dex group [1 ?滋mol/L Dex+50 mg/L puromycin aminonucleoside (PAN)], PAN group (50 mg/L) and normal control group. Scrape wound assay and Transwell migration assay were used to detect cell motility. Filtering ratio of podocytes was measured by FITC labeled BSA. Real-time PCR and Western blotting were used to examine the expressions of α-actinin-4 and nephrin. Results From the scrape wound assays, the ability of wound repair in podocytes of PAN group was significantly increased (P＜0.01), and the number of migrating cells in this group also rose (P＜0.01). Compared to PAN group, podocytes in Dex group did not enhance the motility after treatment with the same dose PAN (P＜0.01). Real-time PCR and Western blotting showed that Dex could significantly inhibit the up-regulated expression of α-actinin-4 and nephrin induced by PAN. Conclusions Dex can relieve the enhanced motility induced by PAN. Its mechanism may be associated with the modulation of the expressions of α-actinin-4 and nephrin.     

肝癌细胞表型的逆转

用SMMC-7721人肝癌细胞株,经10μmol/L维甲酸(RA)处理后,其生长受到抑制,停留在G0/G1期细胞比例上升,而S、G2 M期细胞的比例下降。光镜及图象分析发现该细胞经RA作用后,形态由长棱形为主且核大转变为以多边形为主且核小,核浆比例由0.595下降至0.247。免疫荧光法检测发现,经RA作用后细胞膜上纤维连接蛋白的含量上升。经RA处理的该株细胞,AFP的分泌量明显低于相应天数的对照细胞,而白蛋白的分泌量则明显增高。结果表明:RA可以从细胞生物学、形态学发生物化学水平逆转人肝癌细胞表型。     

纤维连接蛋白对大鼠肺成纤维细胞纤维连接蛋白和整合素α5β1表达的影响

目的　研究纤维连接蛋白 (fibronectin ,FN)及其受体整合素α5β1在肺纤维化中的作用。方法　应用Northern印迹杂交和免疫细胞化学技术。结果　经FN作用 2h ,肺成纤维细胞α5β1和FNmRNA的杂交信号均增强 ,6h达最高值 ;FN作用 6、1 2、2 4h ,免疫细胞化学染色显示整合素α5β1、FN蛋白的表达增强 ;经α5单克隆抗体预作用 ,FN作用组的肺成纤维细胞整合素α5β1和FN蛋白表达减弱 ,其抑制作用依次分别在 6h(α5β1)、1 2h(FN)最明显。结论　FN能直接刺激肺成纤维细胞合成FN或通过上调整合素α5β1的表达来促进自身合成FN。     

调节食欲-生殖的信号肽在雄激素致不孕大鼠中的表达及滋肾阴药的作用

目的探讨雄激素不孕大鼠(ASR)肥胖及无排卵的中枢机制及滋肾阴药的作用。方法给出生9日龄SD雌性大鼠一次性皮下注射丙酸睾丸酮,建立ASR模型。用原位杂交、双标原位杂交的方法检测与肥胖发生有关的几种信号肽/激素如神经肽Y(NPY)、瘦素(leptin)受体长体(OB-Rb)、前阿黑皮素原(POMC)mRNA在ASR下丘脑弓状核(ARC)的表达含量和其关系,以及灌服滋肾阴药后上述指标的变化。结果ASR呈肥胖、无排卵状态。ASR的ARC中NPYmRNA神经元上有OB-RbmRNA表达,NPYmRNA神经元与POMCmRNA神经元有突触联系。NPY和POMC基因表达水平明显增加(P<0.01),OB-Rb基因表达水平明显降低(P<0.01)。中药治疗ASR后,大鼠出现减肥和排卵现象,ARC中NPY、POMC基因表达下降,OB-Rb基因表达上升至正常大鼠水平(P>0.05)。结论ASR肥胖及无排卵可能与NPY、POMC基因过表达、OB-RbmRNA数目减少有关,中药可能有调控这些信号肽的表达而发挥减肥及促排卵作用。     

人肝细胞癌中PTEN基因的DNA杂交及突变分析

目的　研究人肝细胞癌中ＰＴＥＮ基因缺失及第５、第８外显子突变。方法　应用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交检测人肝细胞癌中ＰＴＥＮ基因限制性片段长度多态性和纯合性缺失、半合性缺失、片段缺失。应用聚合酶链单链构象多态性（ＰＣＲＳＳＣＰ）检查ＰＴＥＮ基因的第５、第８外显子的突变。结果　Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交结果显示,所有３４例肝细胞癌中ＰＴＥＮ基因未见限制性片段长度多态性或纯合性缺失、半合性缺失、片段缺失。ＰＣＲＳＳＣＰ检测发现,２例肝细胞癌第５外显子ＰＣＲ产物均显示１条额外电泳迁移带,突变率为５．９％（２／３４）。另２例肝细胞癌第８外显子ＰＣＲ产物呈现额外电泳迁移带,突变率为５．９％（２／３４）,合计突变率为１１．８％（４／３４）。结论　所检３４例人肝细胞癌中ＰＴＥＮ基因未见纯合性缺失、半合性缺失、片段缺失,但存在突变。     

芒果甙对肝癌可溶性E-上皮钙黏蛋白及癌胚抗原和单胺氧化酶的影响

上皮型钙黏蛋白 (Ｅ ｃａｄ)是细胞黏附分子和信号转导分子 ,最近已被认为是抑癌因子。近来有报道 ,Ｅ ｃａｄ的胞外肽段在一定条件下可发生蛋白水解作用而释放到血液中 ,并发现某些恶性肿瘤如大肠癌、卵巢癌、肺癌等患者血清 (浆 )中可溶性Ｅ ｃａｄ含量明显升高 ,治疗后 (如手术 )下降 ,可作为一种疾病疗效和判断预后的指标。而芒果甙被认为具有抗脂质过氧化、增强免疫功能和抗肿瘤作用[1] 。表皮生长因子(ＥＧＦ)是一种细胞促分裂剂 (丝裂原 ) ,能使上皮细胞向癌变转化。为探讨芒果甙的抗肿瘤作用及其机制 ,我们建立大鼠肝癌模型 ,检测肝…     

E-钙粘蛋白在肿瘤中的表达与分化转移的关系

目的　研究Ｅ钙粘蛋白（Ｅｃａｄｈｅｒｉｎ）在胃癌、结直肠癌、宫颈癌、乳腺癌中的表达与肿瘤分化程度，侵袭转移等生物行为的关系及在４种癌症中表达的相互关系。方法　用免疫组织化学ＡＢＣ法检测２０例胃癌、２１例结直肠癌、２０例宫颈癌、２０例乳腺癌石蜡标本Ｅ钙粘蛋白的表达水平。结果　Ｅ钙粘蛋白在４种肿瘤中的表达有一定的相似，即癌组织较癌旁组织的表达水平低，高中分化肿瘤比低分化肿瘤表达水平高。Ｅ钙粘蛋白在不同转移情况肿瘤中的表达结果差异不明显。结论　Ｅ钙粘蛋白癌旁组织中的表达明显高于癌组织，并与分化程度有直接关系；与转移的关系比较复杂，有待于进一步研究。Ｅ钙粘蛋白在４种肿瘤中的表达有一致性，所以Ｅ钙粘蛋白免疫组织化学研究有一定的临床病理价值。     

黄酮类化合物抗肿瘤作用研究进展

黄酮类化合物是一类存在于多种植物中的多酚化合物 ,研究发现它们具有许多潜在的药用价值 ,其中抗肿瘤作用是一个研究热点。其抗肿瘤作用主要表现在抗细胞增殖、诱导细胞凋亡、干预细胞信号转导和增强抑癌基因活性及抑制癌基因表达等功效。本文就黄酮类化合物抗肿瘤作用的研究进展进行综述。